Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"ABSTRAKLatar belakang. Eksitoksisitas merupakan salah satu mekanisme penting dalam kerusakan otak masa perinatal. Eksitoksisitas terjadi akibat peningkatan glutamat ekstrasel. Stem cell From Human Exfoliated Deciduous dapat mensekresi enzim GAD yang akan memgkatalisis perubahan glutamat menjadi GABA. Perubahan glutamat menjadi GABA menyebabkan kadar glutamat ekstrasel menurun, namun peningkatan GABA dapat menyebabkan terjadinya depolarisasi yang dapat berakibat timbulnya eksitoksisitas. penelitian bertujuan untuk menentukan potensi neuroproteksi CM SHED mencegah kerusakan progenitor neuron akibat induksi glutamat.Metode. Progenitor neuron diisolasi dari otak tikus umur 2 hari dan conditioned medium didapat dari MSC SHED. Sampel dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu kelompok kultur progenitor neuron dengan medium neurobasal tanpa glutamat dan glisin N- , dengan medium neurobasal ditambah glutamat dan glisin N , dengan CM SHED tanpa glutamat dan glisin K- , dengan CM SHED ditambah glutamat dan glisin K . Pada progenitor neuron dilakukan pemeriksaan kadar mRNA GABAAR1, subunit NR2B NMDAR dengan RT PCR, kadar protein NMDAR1 dan GABAAR1 dengan ELISA. Caspase -3 dan 7AAD dengan Muse. Pada CM dilakukan pemeriksaan kadar GABA dengan Elisa.Hasil. Viabilitas progenitor neuron pada kelompok K 78,05 lebih tinggi dari kelompok kontrol N- 73,22 , sedangkan kelompok N lebih kecil 68,90 . Kelompok K memiliki kadar GABA paling tinggi dan berbeda bermakna dengan kelompok lainnya, sedangkan pada kelompok N paling kecil. Kadar GABA yang tinggi pada kelompok K diduga karena adanya enzim GAD yang dapat mengkatalisis perubahan glutamat menjadi GABA pada CM SHED. Hasil pemeriksaan mRNA GABAAR1 kelompok K paling tinggi dibandingkan kelompok lain, diduga disebabkan GABA dapat mengaktivasi jalur MAPK yang menyebabkan terjadinya proses transkripsi mRNA GABAAR1. Kadar protein GABAAR1 pada kelompok K paling kecil dibandingkan kelompok lain, hal ini diduga disebabkan karena adanya perubahan subunit dari 2 akibat peningkatan kadar GABA. Kadar GABA yang rendah pada kelompok N diduga disebabkan GABA banyak terpakai terikat dengan reseptor GABAAR1, sehingga terlihat rendah saat pemeriksaan. Hasil ini sesuai dengan pemeriksaan kadar GABAAR1, dimana pada kelompok N kadar GABAAR1 paling tinggi. Kemungkinan lain adalah adanya umpan balik negatif oleh GABAAR1. Pada pemeriksaan mRNA GABAAR1 kelompok N didapat penurunan ekspresi relatif terhadap kontrol. Diduga peningkatan protein GABAAR1 sudah tidak diperlukan sehingga ekspresi mRNA GABAAR1 dihambat. Pemeriksaan dilakukan setelah perlakuan selama 24 jam, diduga kondisi progenitor neuron telah mengalami fase akhir. Terdapat perubahan dinamik pada regulasi GABAAR1 progenitor neuron. Pada fase awal aktivitas eksitatorik merupakan hasil kerjasama GABAAR1 dan NMDAR, kemudian terjadi perubahan aktivitas GABAAR1 dari eksitatorik menjadi inhibitorik. Pada kelompok N diduga aktivitas inhibitorik GABAAR1 tidak dapat mengatasi aktivitas eksitatorik akibat induksi glutamat, sehingga menyebabkan terjadinya apoptosis. Sedangkan pada kelompok K , dimana terdapat peningkatan GABA akibat CM SHED, aktivitas inhibitorik GABAAR1 dapat mengimbangi aktivitas eksitatorik oleh glutamat sehingga terjadi neuroproteksi.Kesimpulan. Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan CM SHED memiliki potensi neuroproteksi dalam mencegah apoptosis progenitor neuron akibat induksi glutamat.

---

ABSTRACTBackgound. Exitoxicity is one of the important mechanisms in perinatal period brain damage. Exitoxicity results from increased extracellular glutamate. Stemcell From Human Exfoliated Deciduous can secrete a GAD enzyme that will analyze the change of glutamate to GABA. The change of glutamate to GABA causes extracellular glutamate levels to decrease, but an increase in GABA can lead to depolarization which may result in the excitoxicity. the study aimed to determine the potential neuroprotection of CM SHED to prevent progenitor neuron damage of glutamate induction.Method. Progenitor neurons were isolated from the brains of mice aged 2 days and conditioned medium obtained from MSC SHED. The samples were divided into 4 groups, ie the progenitor culture group of neurons with neutral glutamate and neurobasal medium N- , with neurobasal medium plus glutamate and glycine N , with CM SHED without glutamate and glycine K- , with CM SHED plus glutamate and glycine K . In progenitor neuron, GABAAR1 mRNA, NR2B NMDAR subunit with PCR RT, protein NMDAR1 and GABAAR1 with ELISA were examined. Caspase -3 and 7AAD with Muse. In CM, GABA levels were evaluated with Elisa.Result. The viability of progenitor neurons in the K group 78.05 was higher than the control group N 73.22 , whereas the N group was smaller 68.90 . The K group had the highest levels of GABA and was significantly different from the other groups, whereas in the smallest N group. High GABA levels in the K group are thought as a result of the presence of GAD enzymes that can catalyze the change of glutamate to GABA in CM SHED. The highest level of GABAAR1 group compared to other groups was thought to be caused by GABA to activate MAPK pathway causing transcription of GABAAR1 mRNA. The level of GABAAR1 protein in the K group was the smallest compared to the other groups, presumably due to a subunit change from ? 2 due to elevated levels of GABA. Low levels of GABA in the N group are thought to be caused by GABA being widely used bound with GABAAR1 receptors, making it noticeably low during examination. This result is in accordance with the GABAAR1 concentration, which in the N group of GABAAR1 levels is highest. Another possibility is negative feedback by GABAAR1. On examination of group GABAAR1 mRNA N , there was a decrease in expression relative to control. It is suspected that the increase in GABAAR1 protein is not needed so that GABAAR1 mRNA expression is inhibited. The examination was performed after 24 hours treatment, presumably progenitor neuron has ending phase. There is a dynamic change in GABAAR1 progenitor neuron regulation. In the early phase of excitatory activity is the result of cooperation GABAAR1 and NMDAR, then there is a change of activity GABAAR1 from excitatory become inhibitory. In the N group it is suspected that GABAAR1 inhibitory activity can not overcome the excitatory activity by caused of glutamate induction, thus causing apoptosis. While in the K group, where there is an increase in GABA considering CM SHED, GABAAR1 inhibitory activity can compensate for the excitatory activity by glutamate resulting in neuroprotection.Conclution. From the results of this study can be concluded CM SHED has the potential of neuroprotection in preventing progenitor neuron apoptosis through glutamate induction."

"ABSTRAKPendahuluan. VDAC merupakan protein kanal ion yang bertanggung jawab atas aliran ion Ca2+ dan ATP dalam flagela spermatozoa. Defisiensi gen VDAC3 pada mencit dan mutasi gen VDAC3 pada manusia menyebabkan penurunan motilitas spermatozoa, sehingga VDAC3 dapat dijadikan antigen potensial untuk pengembangan vaksin kontrasepsi laki-laki. Tujuan penelitian ini adalah memproduksi protein rekombinan hVDAC3 dari gen hVDAC3 ekson 5-8 spesifik spermatozoa, dan digunakan sebagai antigen untuk produksi antibodi poliklonal pada kelinci.Metode. Gen hVDAC3 ekson 5-8 spermatozoa diperoleh melalui RT PCR, gen disisipkan ke plasmid pET100/D-TOPO dan diklona dalam E coli TOP 10. Analisis gen sisipan dengan PCR, enzim restriksi dan sekuensing DNA. Protein rekombinan hVDAC3 diekspresikan dalam E coli BL21 StarTM (DE3). Karakterisasi protein dilakukan dengan uji Bradford, SDS PAGE, western blot dan purifikasi protein dengan resin Ni-NTA. Antibodi poliklonal diperoleh dengan cara imunisasi protein rekombinan hVDAC3 ke kelinci dan diukur dengan indirect ELISA. Determinasi lokasi hVDAC3 di spermatozoa dengan metode immunoflurosence.Hasil. Amplifikasi PCR gen hVDAC3 ekson 5-8 berukuran 435 pb dan analisis BLAST menunjukkan 100% identik dengan gen VDAC3 manusia dari bank gen. Vektor rekombinan berukuran 6195 pb mengekspresikan protein rekombinan hVDAC3 berukuran 20 kDa. Antibodi poliklonal telah diproduksi kelinci secara bermakna (p<0.05) dengan titer 2.817, dan antibodi dapat berikatan dengan protein hVDAC3 di kepala dan flagela spermatozoa. Selanjutnya, antibodi poliklonal ini akan digunakan dalam pengembangan vaksin kontrasepsi pada laki-laki.

---

ABSTRACT

Introduction. Voltage dependent anion channels (VDAC), also known as mitochondrial porins, are group of proteins in mitochondrial outer membrane that allow the passage of metabolites across the mitochondrial outer membrane, and are involved in ions and ATP transport in sperm flagella. Deficiency and mutation of VDAC3 may cause abnormality in structure and motility of human spermatozoa. VDAC3 could be a potential target to develop non hormonal male contraceptive vaccine. The objective of the study was to produce hVDAC3 recombinant proteins from exon 5 to 8 of human sperm VDAC3 spesific gene.

This recombinant protein was subsequenly used as an antigen to produce polyclonal antibodies in rabbits. Methods. hVDAC3 sperm gene obtained by RT PCR, this gene was inserted into plasmid pET 100/D-TOPO and cloned in E coli TOP 10. The gene was analyzed by PCR method, restriction enzymes and DNA sequencing. The proteins expressed in E coli BL21 StarTM (DE3). Characterization of proteins was evaluated by Bradford method, SDS PAGE and western blot. The recombinant protein was purified with NI-NTA resin. Polyclonal antibodies were obtained by immunization of hVDAC3 recombinant protein into rabbits. Indirect ELISA was done to analyze the antibody. Localization of the VDAC3 recombinant protein in human spermatozoa was evaluated by immunofluorescence method.

Result. By doing PCR amplification and BLAST analysis, the study showed that the hVDAC3 gene had 100% identical to hVDAC3 genes in data bank. E coli BL21 StarTM (DE3) containing recombinant vector (6195 bp) expressed the recombinant protein of hVDAC3 in 20 kDa. This protein produced polyclonal antibodies that bound VDAC3 protein on the head and flagella of human spermatozoa."

"ABSTRAKDisertasi ini membahas modifikasi mineral trioxide aggregate (MTA) menjadi nanopartikel mineral trioksida (NMT) dan menentukan potensi NMT tersebut dengan cara menganalisis aktivitas proliferasi dan diferensiasi sel punca mesensimal pulpa gigi serta maturasi sel ke arah odontoblas. Penelitian ini adalah penelitian kuantitatif dengan desain eksperimental laboratorik Hasil penelitian menyimpulkan bahwa a) NMT meningkatkan proliferasi dan tidak toksis terhadap DPSC dan SHED; b) NMT meningkatkan aktivitas ALP khususnya pada SHED; c) NMT meningkatkan aktivitas OC khususnya pada DPSC; d) NMT meningkatkan aktivitas DSPP pada DPSC dan SHED; e) NMT meningkatkan jumlah deposit kalsium dan matrik ekstrasellular pada DPSC dan SHED.

---

ABSTRACTThe Dissertation discussed the modification of mineral trioxide aggregate (MTA) to nanoparticle mineral trioxidea (NMT) and determining NMT potential by analyzing the proliferation and differentiation of dental pulp stem cells and maturation activities to odontoblasts. The quantitative research used experimental laboratory design. Based on the research findings, it can be concluded that a) NMT increased cells proliferation and was not toxic to DPSC and SHED; b) NMT increased ALP activities, especially on SHED; c) NMT increased OC activities, especially on DPSC; d) NMT increased DSPP activities on DPSC and SHED; e) NMT increased the quantity of calcium deposit and extracellular matrix on DPSC and SHED."

"Disertasi ini menganalisis hubungan profil Human Leukocyte Antigen DRB1 dan DQB serta polimorfisme alel yang dominan, dengan terjadinya ulser mulut pada pasien Systemic Lupus Erythematosus (SLE), dengan memperhatikan faktor usia, jenis kelamin, ras dan stres. Penelitian dilakukan di Rumah Sakit Kramat 128 Jakarta pada 96 pasien SLE dengan dan tanpa ulser mulut, dengan pengambilan data secara cross sectional. Hasil penelitian menunjukkan dominasi alel DRB1*15:01 dan DQB*05:01 pada SLE dengan ulser mulut. Terdapat hubungan bermakna antara HLA-DRB1*15:01 dengan terjadinya ulser mulut (p<0,05), dan terdapat hubungan bermakna antara stres dengan terjadinya ulser mulut. Kejadian ulser mulut pada pasien SLE dengan HLA-DRB1*15:01 yang mengalami stress meningkat 3,7 kali (OR=3,77). Terdapat kesamaan sequence DNA HLA dengan HLA-DRB1*15:01 pada alel yang sama diantara pasien dengan ulser mulut.

---

The present study was design to analize the association of HLA-DRB1, DQB profile, and polymorphisms of dominant alel with oral ulcers SLE. This study included an evaluation association of age, gender, race and stress. A cross sectional of 96 SLE patients with or without oral ulcers followed up at the Kramat 128 Hospital Jakarta. The result shows that the HLA-DRB1*15:01 and DQB*05:01was more frequent in SLE patients with oral ulcers. HLA-DRB1*15:01 was significantly associated with susceptibility to oral ulcers SLE (p<0.05). Stress was also significance association with oral ulcers SLE. Patiens with HLA-DRB1*15:01 and stress, have a higher risk of oral ulcers (OR=3.77). There is similarity sequens DNA HLA with HLA-DRB1*15:01 in the same alel in SLE patients with oral ulcers."

"Latar Belakang. Candida albicans (C. albicans) merupakan flora normal rongga mulut sebagai agen utama infeksi kandidiasis oral. Asap rokok dilaporkan sebagai salah satu faktor peningkatan biofilm dan transisi perubahan morfologi C. albicans. Tujuan penelitian ini adalah menganalisis peran cigarette smoke condensate (CSC) terhadap pembentukan biofilm dan transisi perubahan morfologi C. albicans isolat saliva. Metode Candida albicans isolat saliva perokok dikultur pada CHROM Agar dan disetarakan dengan Mc. Farland 0,5 (1 × 108 CFU/ml). Selanjutnya diuji potensi pembentukan biofilm berdasarkan optikal densitas spektrofotometri pada panjang gelombang 620 nm yang hasilnya dianalisis dengan one way anova. Sedangkan transisi perubahan morfologi sel C. albicans setelah disensitisasi dengan CSC kretek dan non-kretek diamati dengan mikroskop pada pembesaran 1000x. Hasil. Akititas CSC non kretek lebih kuat menginduksi pembentukan biofilm dibandingkan dengan CSC kretek, khususnya pada waktu 24, 48, dan 72 jam (p<0,05) dibandingkan masa inkubasi 12 jam, dengan korelasi yang sangat kuat (p<0,01), hal ini sejalan dengan profil massa biofilm yang diamati secara visual dengan mikroskop. Hasil tersebut sejalan dengan transisi perubahan morfologi C. albicans dari blastospora ke bentuk psudohypha dan hypha yang diinduksi dengan CSC non-kretek lebih baik dibandingkan dengan CSC kretek dan C. albicans isolat saliva (tanpa sensitisasi dengan CSC). Kesimpulan. CSC kretek dan non-kretek dapat meningkatkan pembentukan biofilm Candida albicans isolat saliva, sekaligus mempercepat perubahan transisi morfologi dari blastospora menjadi pseudohypha dan hypha.

---

Candida albicans (C. albicans) is a commensal of oral cavity and the main agent of oral candidiasis. Cigarette smoke is reported as predispose factors of biofilm formation and transition of morphological changes of C. albicans. This study to analyze the role of cigarette smoke condensate (CSC) on biofilm formation and transition of morphological changes of C. albicans saliva isolates. Candida albicans smoker saliva isolate is cultured on CHROM-Agar and synchronized with Mc. Farland 0.5 (1×108 CFU/ml). Biofilm assay based on spectrophotometric density at 620 nm wavelength and data analyzed by one way ANOVA. The biofilm mass and transition of morphological changes of C. albicans cells was observed by light microscope at 1000x magnification. Result study shown The CSC no-kretek strongly induced the formation of biofilms compared with CSC kretek, particularly at 24, 48, and 72 hours (P<0.05) compared to the 12-hour, correlation (P<0.01) in accordance with the biofilm mass observed by light microscope also consistent the transition of C. albicans morphological changes from blastospora to pseudohypha and hypha (P<0,05). CSC kretek and non-kretek could increase the biofilm formation of Candida albicans saliva isolates, simultaneously accelerating the morphological transition changes from blastospora to pseudohypha and hypha."

"Latar Belakang: Enterococcus faecalis adalah bakteri yang sering ditemukan pada infeksi endodontik sekunder pada pasca perawatan saluran akar. Beberapa tanaman berkhasiat obat telah diteliti dan dikembangkan kearah obat herbal terstandar untuk digunakan dalam bidang kedokteran gigi sebagai antibakteri, salah satu diantaranya adalah kulit buah C. aurantifolia. Tujuan: Menetapkan potensi ekstrak etanol dan fraksi-fraksi kulit buah C. aurantifolia sebagai anti bakteri E. faecalis serta keamanannya. Metode: Kulit buah C. aurantifolia diekstraksi dengan pelarut etanol, lalu di fraksinasi dengan pelarut n-heksana, kloroform,etil asetat. Enterococcus faecalis isolat klinik dan ATCC 29212 digunakan sebagai bakteri uji. Identifikasi kelompok senyawa kimia berdasarkan uji fitokimia dan komponen kimia ekstrak etanol dan fraksi-fraksi kulit buah C. aurantifolia berdasarkan uji GC-MS. Selanjutnya daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri E. faecalis diuji berdasarkan zona hambat dengan metode difusi cakram. Bahan antibakteri kulit buah C. aueantifolia terbaik, di uji sitotoksisitas terhadap sel fibroblas dan sel osteoblas menggunakan uji MTT. Uji pembentukan massa biofilm E. faecalis dengan metode crystal violet dan uji viabilitas E. faecalis pada massa biofilm dan kondisi planktonik dengan metode total plate count. Hasil penelitian: Kelompok senyawa kimia dan komponen kimia dari ekstrak etanol dan fraksi-fraksi kulit buah C. aurantifolia teridentifikasi. Ekstrak etanol kulit buah C. aurantifolia menunjukkan zona hambat, tidak toksik terhadap sel fibroblas dan osteoblas, menghambat pembentukan massa biofilm E. faecalis isolat klinik dan E. faecalis ATCC 29212 serta dapat menurunkan viabilitas E. faecalis pada massa biofilm dan kondisi planktonik. Kesimpulan: Ekstrak etanol kulit buah C aurantifolia teridentifikasi berdasarkan kelompok senyawa kimia dan komponan kimianya serta memiliki potensi sebagai antibakteri dan antibiofilm terhadap E. faecalis serta tidak menimbulkan efek toksik terhadap sel mamalia.

---

Background: Enterococcus faecalis is a bacterium that commonly found in secondary infections of post-endodontic treatment. Several medicinal plants have been studied as standardized herbal medicines for dentistry as an antibacterial agent, such as C. aurantifolia peel fruit. Objectives: To determine the potency of ethanol extract and C. aurantifolia fruit peel fractions as an antibacterial for E. faecalis and its biological safety. Method: C. aurantifolia fruit peels were extracted with ethanol, then fractionated with n-hexane, chloroform, ethyl acetate. The E. faecalis used was clinical isolate and E. faecalis ATCC 29212. Identification component of chemical compounds based on phytochemical tests and chemical components of ethanol extract and fruit peel fractions of C. aurantifolia based on GC-MS test. The growth inhibition towards E. faecalis was tested by evaluating the inhibition zone using the disc diffusion test. The growth inhibition towards E. faecalis was tested by evaluating the inhibition zone using the disc diffusion test. The best antibacterial agent of C. aueantifolia fruit peel was tested for cytotoxicity against fibroblasts and osteoblasts using the MTT assay. Furthermore, biofilm mass formation of E. faecalis, bacterial viability in biofilm mass as well as planktonic conditioned were evaluated by a crystal violet staining and total plate count, respectively. Results: Active compounds and chemical components of ethanol extracts and C. aurantifolia peel fruit fractions were identified. The ethanol extract of C. aurantifolia peel fruit showed an anti bacterial in either E. faecalis strain tested and showed non-toxic to fibroblast and osteoblast cells. Conclusion: Ethanol extract of C. aurantifolia peel has a promising potential ability as an antibacterial against E. faecalis and is non-toxic to mammalian cells."