Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
Latar belakang: Infeksi C. diphtheriae toksigenik memerlukan penanganan segera karena dapat mengancam nyawa. Pemeriksaan kultur sebagai uji baku emas hanya dapat dilakukan di laboratorium rujukan dan memakan waktu lama. Pemeriksaan awal yang dapat dilakukan adalah menggunakan teknik pewarnaan. Pewarnaan khusus difteri seperti Albert atau Neisser dapat menggambarkan granul metakromatik yang spesifik terhadap Corynebacterium sp., namun laboratorium yang mampu mengerjakannya sangat terbatas. Oleh karena itu, berbagai laboratorium menggunakan teknik pewarnaan Gram sebagai alternatif untuk menunjang diagnosis dini difteri. Tujuan: Evaluasi pemeriksaan mikroskopik langsung yang rutin dilakukan pada spesimen swab tenggorok untuk menunjang diagnosis dini difteri. Metode: Uji diagnostik dengan desain potong lintang. Pemeriksaan mikroskopik Gram dan pewarnaan khusus Albert serta Neisser dibandingkan dengan kultur sebagai baku emas untuk mendapatkan nilai sensitivitas, spesifisitas, nilai duga positif, nilai duga negatif, dan akurasi. Uji kesesuaian antara kedua teknik pewarnaan dan PCR dinilai menggunakan koefisien Kappa. Analisis multivariat dilakukan pada variabel independen data faktor risiko dan gambaran klinis. Nilai probabilitas yang dihasilkan dimasukkan ke dalam kurva Receiver Operating Characteristic (ROC). Pertambahan luas Area Under Curve (AUC) dinilai setelah menambahkan pemeriksaan mikroskopik ke dalam model. Hasil: Pewarnaan khusus difteri dan Gram memiliki sensitivitas 70% dan 20%, spesifisitas 83,72% dan 79,06%, nilai duga positif 33,33% dan 10%, nilai duga negatif 96% dan 89,47% serta akurasi 82,29% dan 72,92%. Kesesuaian minimal antara kedua metode pewarnaan (reliabilitas 4-15%). Pewarnaan khusus difteri memiliki kesesuaian yang lebih baik dengan uji PCR,dibandingkan dengan pewarnaan Gram. Pewarnaan khusus difteri menunjukan penambahan nilai diagnostik sebesar 3,8% pada model faktor risiko dan gambaran klinis yang bermakna untuk menunjang diagnosis dini difteri. Kesimpulan: Pewarnaan khusus difteri pada spesimen klinis langsung untuk diagnosis dini difteri tidak dapat digantikan dengan pewarnaan Gram. .....Background: Infection caused by toxigenic C. diphtheriae requires immediate treatment because it can be life threatening. Culture examination as gold standard can only be done in a reference laboratory and is time-consuming. The initial examination can be performed using the staining technique. Diphtheria special staining such as Albert or Neisser can characterize metachromatic granules that are specific to Corynebacterium sp., but the availability of these stains in many laboratories are limited. Therefore most laboratories use Gram staining technique as an alternative to support early diagnosis of diphtheria. Objective: Evaluation of the direct microscopic examination commonly used on throat swab specimens to support the early diagnosis of diphtheria. Methods: Diagnostic test with a cross-sectional design. Gram microscopic examination and special staining of Albert and Neisser were compared with culture examination as the gold standard to obtain sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, and accuracy. The realibility test between the two staining and PCR techniques was assessed using the Kappa coefficient. Multivariate analysis was performed on the independent variables of risk factors and clinical features data. The resulting probability value was entered into the Receiver Operating Characteristic (ROC) curve. The improvement of the area under the curve (AUC) was assessed after microscopic examination was added on the model. Results: Diphtheria and Gram staining had a sensitivity of 70% and 20%, specificity 83.72% and 79.06%, positive predictive value 33.33% and 10%, negative predictive value 96% and 89.47% and accuracy 82.29 % and 72.92%. Minimal concordance was found between the two staining methods (4-15%). Diphtheria-specific staining have better realibility result, compared to the PCR test, than Gram staining. Diphtheria special staining showed an additional 3.8% diagnostic value, in the significant of risk factors and clinical features model, to support the early diagnosis of diphtheria. Conclusion: Diphtheria special staining directly on clinical specimens for early diagnosis of diphtheria cannot be replaced by Gram staining.

Abstrak :
Karsinoma hepatoseluler (KHS) adalah kanker primer liver dan penyebab kedua kematian akibat kanker. Eksosom pada lingkungan mikro KHS berfungsi untuk komunikasi antar sel dan bila endositosis ke sel NK dapat menyebabkan perubahan pada sel NK. Penelitian ini bertujuan menganalisis eksosom dari darah pasien KHS, perubahan fenotipe sel NK, dan uji pewarnaan histologi (peroksidase, toluidine blue) untuk mengamati perubahan granula azurofilik sel NK akibat endositosis eksosom. Metode penelitian meliputi isolasi sel NK dari donor sehat dan eksosom darah pasien KHS, karakterisasi eksosom dengan PSA, stimulasi sel NK dengan eksosom, flow cytometry reseptor pada sel NK dan CD81+ pada eksosom, imunofluoresens endositosis eksosom ke sel NK, pewarnaan toluidine blue dan peroksidase.Hasil menunjukkan eksosom berukuran 34,7 nm, bermuatan -4,33 mV dan positif CD81+. Perubahan reseptor sel NK sehat yang dipaparkan eksosom KHS tidak signifikan (P>0,05). Imunofluoresens memperlihatkan endositosis eksosom ke sel NK. Pewarnaan sel NK toluidine blue menunjukkan metakromasia dan peroksidase negatif. Sel NK+eksosom mengalami perubahan hasil pewarnaan. Peneliti menyimpulkan bahwa eksosom dari darah pasien KHS sesuai kriteria MISEV 2018.Tidak terjadi perubahan fenotipe sel NK sehat yang dipaparkan eksosom dari darah pasien KHS. Pewarnaan peroksidase dan toluidine blue dapat digunakan sebagai metode pengamatan endositosis eksosom ke sel NK. ......Hepatocellular carcinoma (HCC) is the primary liver cancer and the second leading cause of death from cancer. Exosomes in the HCC microenvironment function for communication between cells and when endocytosed to NK cells can cause changes in NK cells. This study aims to analyze exosomes from the blood of HCC patients, changes in NK cell phenotype, and histological staining tests (peroxidase, toluidine blue) to observe changes in NK cell azurophilic granules due to exosome endocytosis. NK cells from healthy donors and blood exosomes of KHS patients were isolated, exosomes characterized by PSA, stimulation of NK cells with exosomes, and flow cytometry of receptors on NK cells and CD81+ on exosomes were done. Endocytosis of exosomes onto NK cells were observed through immunofluorescence, then metacromasia and azurofilic granules of NK cells were observed after toluidine blue and peroxidase staining. Results showed The exosome is 34.7 nm in size, has a charge of -4.33 mV and is CD81+ positive. Changes in healthy NK cell receptors exposed to HCC exosomes were not significant (P>0.05). Immunofluorescence demonstrates exosome endocytosis in NK cells. Toluidine blue NK cell staining showed negative metachromasia and peroxidase. In NK cell+exosome there is a change in staining results. We concluded exosomes from the blood of HCC patients comply with MISEV 2018 criteria. There is no change in the phenotype of healthy NK cells exposed to exosomes from the blood of HCC patients. Peroxidase and toluidine blue staining can be used as a method of observing exosome endocytosis in NK cells.

Abstrak :
Osteoporosis adalah penyakit tulang yang ditandai dengan rendahnya massa tulang yang menyebabkan peningkatan risiko patah tulang. Pada penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa aspirin dapat mengurangi kadar S1P (Sphingosine-1-Phosphate) sehingga resorpsi tulang akibat osteoklas dapat menurun. Kombinasi aspirin dan kalsium digunakan dalam penelitian ini untuk melihat pengaruhnya terhadap jumlah sel osteoklas. Penelitian ini dilakukan pada tikus putih betina Sprague-Dawley yang dibagi menjadi 8 kelompok yaitu kelompok sham dan kontrol negatif yang diberikan CMC Na 0,5%, kelompok kontrol positif yang diberikan tamoksifen 3,6 mg/200 gBB/hari, kelompok aspirin yang diberikan aspirin 5,4 mg/200gBB/hari, kelompok kalsium yang diberikan kalsium 15 mg/200 g BB/hari, serta kelompok kombinasi aspirin dan kalsium dengan masing-masing dosisnya yaitu D1 aspirin 1,8 mg/200 g BB/hari dan kalsium 15 mg/200gBB/hari; D2 aspirin 5,4 mg/200gBB/hari dan kalsium 15 mg/200gBB/hari; dan D3 aspirin 16,2 mg/200gBB/hari dan kalsium 15 mg/200gBB/hari secara peroral. Sebelum pemberian obat, semua tikus dibedah ovariektomi kecuali kelompok sham dan kontrol negatif yang dibedah sham. Setelah pembedahan, tikus dipelihara selama 28 hari kemudian diberikan obat. Parameter yang diukur adalah berat tulang tibia dan jumlah sel osteoklas yang dilihat secara histopatologi dengan pewarnaan HE (Hematoksilin-Eosin). Berat tulang tibia kelompok sham 321,90±10,39mg, kontrol negatif 272,30±54,18mg, kontrol positif 312,50±40,86mg, aspirin 336,67±29,57mg, kalsium 335,90±60,66mg, D1 346,27±83,91mg, D2 377,00±4,51mg, D3 366,67±48,52mg. Jumlah sel osteoklas kelompok sham 7,8±0,4sel/lapang pandang, kontrol negatif 9,13±1,10sel/lapang pandang, kontrol positif 8,13±1,67sel/lapang pandang, aspirin 7,53±1,52sel/lapang pandang, kalsium 7,67±0,64sel/lapang pandang, D1 7,47±0,31sel/lapang pandang, D2 5,33±0,99sel/lapang pandang, D3 7,67±0,31sel/lapang pandang. Hasil ini menunjukkan bahwa aspirin dan kalsium dapat meningkatkan berat tulang dan menurunkan jumlah sel osteoklas. ......Osteoporosis is a bone disease characterized by low bone mass which causes an increased risk of fracture. Previous study have shown that aspirin can reduce S1P (Sphingosine-1-Phosphate) levels so that bone resorption due to osteoclasts can decrease. The combination of aspirin and calcium was used in this study to see its effect on the number of osteoclasts. This study was conducted on female white Sprague-Dawley rats which were divided into 8 groups, sham, negative control groups were given 0.5% CMC Na, positive control group was given tamoxifen 3.6 mg/200gBW/day, aspirin group was given 5.4 mg/200gBW/day, calcium group was given calcium 15 mg/200gBW/day, and the aspirin and calcium combination group with each dose of D1 aspirin 1.8 mg/200gBW/day and calcium 15 mg/200gBW/day, D2 aspirin 5.4 mg/200gBW/day and calcium 15 mg/200gBW/day, and D3 aspirin 16.2 mg/200gBW/day and calcium 15 mg/200gBW/day orally. All rats were ovariectomized except for the normal group and the negative control group which underwent sham surgery. The rats were kept for 28 days and then given the drug. The parameters measured were the weight of the tibia bone and the number of osteoclasts seen histopathologically with HE (Hematoxylin-Eosin) staining. Weight of tibia bone are 321.90±10.39mg for sham, 272.30±54.18mg for negative control, 312.50±40.86mg for positive control, 336.67±29.57mg for aspirin, 335.90±60.66mg for calcium, 346.27±83.91mg for D1, 377.00±4.51mg for D2, 366.67±48.52mg for D3. The number of osteoclasts in cells/field of view are 7.8±0.4 for sham, 9.13±1.10 for negative control, 8.13±1.67 for positive control, 7.53±1.52 for aspirin, 7.67±0.64 for calcium, 7.47±0.31 for D1, 5.33±0.99 for D2, 7.67±0.31 for D3. The result is the combination of aspirin and calcium can increase bone weight and decrease the number of osteoclasts.

Abstrak :
ABSTRACT
The goals of the present study were to evaluate, in vitro, the staining of different composite resins submitted to different common beverages, and to compare the staining effect of each of these solutions. A total of 288 specimens were randomly divided into six groups and immersed for 4 weeks in five staining solutions represented by red wine, orange juice, coke, tea and coffee or in artificial saliva as a control group. When analyzed over a black background, mean E00 values varied from 0.8 for Venus Diamond, Saremco Microhybrid and ELS in saliva and Estelite Posterior in coke to 37.6 for Filtek Supreme in red wine. When analyzed over a white background, mean ΔE00 values varied from 0.5 for Saremco Microhybrid in saliva to 51.1 for Filtek Supreme in red wine. All materials showed significant changes in color after 4 weeks of immersion in staining solutions. Significant differences were found between the tested composite resins and also between the staining solutions.

Abstrak :
Fruktosiltransferase (FTFase) atau fruktansukrase merupakan enzim ekstraseluler yang digunakan oleh bakteri asam laktat (BAL) untuk mensintesis produk eksopolisakarida (EPS) fruktan dari substrat sukrosa. Manfaat dari produk ini tidak hanya diaplikasikan dalam industri makanan, tetapi juga dalam industri farmasi, kesehatan dan kosmetik. Dalam studi sebelumnya, FTF rekombinan dari Escherichia coli telah dikonstruksi. Kemudian Escherichia coli rekombinan yang telah membawa gen ftf dipelajari ekspresinya untuk memperoleh protein fruktansukrase rekombinan dan mengetahui aktivitas fruktansukrase rekombinan dengan menggunakan teknik SDS-PAGE serta esei aktivitas enzim secara in situ pada studi ini. Escherichia coli rekombinan ditumbuhkan dan diinduksi dengan IPTG untuk menghasilkan protein FTF. Setelah sel dipecah, filtrat pelet sel dipekatkan dengan konsentrator untuk selanjutnya dimurnikan dengan kromatografi kolom affinitas Ni2+. Langkah ini dilakukan untuk mengisolasi FTF rekombinan yang bergabung dengan tag Histidin agar berikatan secara efisien terhadap Ni2+. Dengan demikian, hanya FTF rekombinan dalam fraksi terakhir akan dielusikan oleh buffer imidazol, dan fraksi ini digunakan untuk melakukan analisis lebih lanjut, yaitu SDS PAGE. Dengan menggunakan SDS PAGE, berat molekul protein diperkirakan 130 kDa, sedangkan untuk aktivitasnya, dilakukan protokol in situ dengan menggunakan PAS staining. Aktivitas FTF dapat diamati pada gel yang di-staining PAS setelah gel diinkubasi dengan rafinosa sebagai substrat, tetapi tidak dapat diamati pada substrat sukrosa.

Abstrak :
Pendahuluan: Status batas sayatan merupakan faktor prognostik penting pada operasi tumor ganas solid. Frozen section (FS) sebagai baku emas batas sayatan intraoperatif butuh waktu tunggu dan alat FS mahal. Pewarnaan vital (PV) adalah metode pewarnaan pada sel hidup tanpa menyebabkan kematian sel. Tujuan penelitian ini adalah didapatkannya cara cepat untuk membedakan tumor ganas solid dengan jaringan normal. Metode: Studi dilakukan pada pasien tumor solid yang dioperasi oleh Bedah Onkologi RSCM periode Desember 2017 – April 2018. Penelitian ini disetujui oleh Komite Etik FKUI/RSCM. Kriteria eksklusi adalah sampel berukuran <5 mm, jaringan nekrosis, dan tidak setuju ikut penelitian. Total 150 pasien tumor solid (payudara, tiroid, mulut, dan lain-lain). Spesimen dibelah dua (mirroring technique) sebagai sampel perlakuan dan kontrol. Sampel perlakuan disemprot dengan asam asetat 10%, dibilas, lalu disemprot iodin, lalu bilas dengan akuades. Perubahan menjadi putih (acetowhitening) merupakan hasil positif. Bila berubah kuning kecoklatan merupakan hasil negatif. Ahli PA di-blinding. Hasil PA fokus ganas atau ganas tergolong hasil positif. Hasil PA selain hasil tersebut dicatat sebagai negatif. Analisis Data: Metode riset berdasarkan VIA (Visual Inspection Acetic Acid) dari WHO. Data dianalisis dengan IBM SPSS versi 25, menggunakan chi square. Hasil: Dari 150 pasien didapatkan 520 sampel. Sensitivitas staining 82%, spesifisitas 63,5%, PPV 65,8%, NPV 80,5%. Pada subgrup tumor payudara epitelial sensitivitasnya 100%, spesifisitas 79,3%, PPV 66,8%, NPV 100 %. Pada kasus tiroid sensitivitas 65,7%, spesifisitas 83,3%, PPV 92%, NPV 45%. Kasus tumor rongga mulut sensitivitasnya 94,1%, spesifisitas 33,3%, PPV 88,9%, NPV 50%. Diskusi: Staining ini bereaksi positif terhadap tumor ganas solid secara umum dan bereaksi negatif terhadap jaringan normal. Sensitivitas tertinggi pada kasus tumor payudara dan rongga mulut, dan spesifisitas tinggi pada kasus tiroid. Iodin bereaksi terhadap glikogen, namun struktur sel yang bereaksi dengan asam asetat adalah protein inti sel dan sitoplasma. ......Introduction: The surgical margin is an important prognostic factor in solid cancer surgery. Frozen section (FS) as the gold standard for intraoperative surgical margin evaluation but requires waiting time and expensive FS devices. Vital staining (VS) is a method of coloring on living cells without causing cell death. The purpose of this study was to obtain a quick way to distinguish solid cancer from normal tissue or nonmalignant tumor. Methods: The study was conducted on solid tumor patients who were operated on by RSCM Surgical Oncologic Division in the period December 2017 - April 2018. This study was approved by the Ethics Committee of FMUI / RSCM. Exclusion criteria were samples measuring less than 5 mm, tissue necrosis, and the patient did not agree to join the study. A total of 150 of solid tumors (breast, thyroid, mouth, etc.) patients. The specimen is divided (mirroring technique) as a treatment and control sample. The treatment sample was sprayed with 10% acetic acid, rinsed, then sprayed with iodine, then rinse with distilled water. Acetowhitening reaction of the sample is a positive result. But if the sample turns brownish yellow, it is a negative result. The pathologist is blinded in this study. Focused or malignant lesion of PA results are classified as positive results. The results of PA other than these results are recorded as negative. Data Analysis: Research method based on WHO (Visual Inspection Acetic Acid). Data were analyzed with IBM SPSS version 25, using chi square. Results: From 150 patients 520 samples were obtained. Staining sensitivity was 82%, specificity was 63.5%, PPV was 65.8%, NPV was 80.5%. In the subgroup epithelial breast tumor, the sensitivity was 100%, specificity was 79.3%, PPV was 66.8%, NPV was 100%. In the case of thyroid sensitivity 65.7%, specificity 83.3%, PPV 92%, NPV 45%. For oral cancer cases sensitivity 94.1%, specificity 33.3%, PPV 88.9%, NPV 50%. Discussion: This staining reacts positively to solid malignant tumors in general and reacts negatively to normal tissue. The highest sensitivity in breast and oral cavity tumors cases, and high specificity in the of thyroid cases. Iodine reacts to glycogen, but the cell structure that reacts with acetic acid is nuclear and cytoplasmic protein.

Abstrak :

Kurkumin merupakan pigmen kuning alami dari rimpang kunyit yang diduga memiliki aktivitas kemopreventif terhadap sel kanker melalui mekanisme jalur pensinyalan apoptosis. Penelitian ini bertujuan untuk menguji hubungan kurkumin terhadap kadar protein RASSF1A,  Bax, dan aktivitas kaspase-3 dalam menunjang  mekanisme apoptosis pada sel kanker payudara CSA03, MCF-7, dan MDA-MB-468.

Penelitian eksperimen in vitro dilakukan di laboratorium terpadu Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Jakarta,  laboratorium terpadu Fakultas Kedokteran Universitas YARSI Jakarta, RSUPN Dr. Cipto Mangunkusumo Jakarta, serta RS Islam Jakarta tahun 2016–2018. Pemberian kurkumin terhadap sel kanker didasarkan atas perbedaan dosis dan waktu pemberian. Uji sitotoksisitas  setelah pemberian kurkumin ditentukan secara MTS.   Kadar protein RASSF1A dan Bax diuji secara ELISA. Aktivitas kaspase-3 digunakan untuk mengetahui apoptosis diuji secara flowsitometri. Selanjutnya perubahan morfologi sel diamati melalui pewarnaan acridine orange/ethidium bromide.

Pemberian kurkumin terhadap sel-sel yang diuji menunjukkan konsentrasi IC₅₀ yaitu 40,85 µg/mL pada sel CSA03; 75,73 µg/mL pada sel MCF-7; dan 380,79 µg/mL pada sel MDA-MB-468. Pemberian kurkumin menunjang mekanisme apoptosis melalui jalur RASSF1A, Bax, dan aktivitas kaspase-3 pada sel kanker payudara.

 

Kata Kunci:  Apoptosis, Bax, CSA03, kaspase-3, kurkumin,  MCF-7, MDA-MB-468, pewarnaan ganda, RASSF1A

 

---

Curcumin is a natural yellow pigment from turmeric rhizome which is thought to have a chemopreventive effect on cancer through the mechanism of apoptotic signaling pathways. This study aims to examine the correlation of curcumin with protein level of RASSF1A, Bax, and caspase-3 activities in conjunction with the mechanism of apoptosis in CSA03, MCF-7, and MDA-MB-468 breast cancer cells.

In vitro experimental research was carried out at the Integrated Laboratory of Faculty of Medicine, Universitas Indonesia Jakarta; RSUPN. Dr. Cipto Mangunkusumo Jakarta; and Jakarta Islamic Hospital during 2016–2018. Curcumin was administered to the cancer cells in different doses and time. Cytotoxicity test after administration of curcumin was determined by MTS. The protein level of RASSF1A and Bax were measured by ELISA. Caspase-3 activity was used to determine apoptosis by flow cytometry. Furthermore, changes in cell morphology were observed by acridine orange/ethidium bromide staining.

The administration of curcumin to the cells showed IC50 concentrations of 40.85 µg/mL in CSA03 cells; 75.73 μg/mL in MCF-7 cells; and 380.79 µg/mL in MDA-MB-468 cells. The administration of curcumin supports the mechanism of apoptosis through the RASSF1A, Bax, and caspase-3 activity in breast cancer cells.

Abstrak :
Fruktansukrase merupakan enzim ekstraselular yang biasanya diproduksi oleh Bakteri Asam Laktat (BAL). Oleh BAL, enzim ini digunakan untuk memproduksi eksopolisakarida (EPS) dari substrat sukrosa maupun substrat rafinosa. EPS memiliki potensi yang besar dalam industri farmasi, pangan dan kesehatan. Dalam penelitian sebelumnya, Fruktansukrase rekombinan diklon ke dalam Bacillus subtilis DB 403 dan dirancang untuk disekresikan keluar sel. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi protein fruktansukrase rekombinan dari bakteri Bacillus subtilis dan untuk mengetahui aktivitas fruktansukrase rekombinan tersebut. Pada penelitian ini, Bacillus subtilis rekombinan ditumbuhkan dan dipanen untuk mendapatkan protein fruktansukrase di dalam supernatan kultur. Protein dieksresikan secara ekstraselular. Ke dalam supernatan lalu ditambahkan PMSF untuk mencegah terjadinya degradasi oleh protease. Selanjutnya protein diliofilisasi dengan metode freeze dry. Pelet protein diresuspensikan dalam sejumlah kecil buffer sedemikian rupa sehingga konsentrasinya pekat, setelah itu difiltrasi dengan menggunakan Amicon® Ultra-15 Centrifugal Filter Device cutoff -30 kDa untuk memisahkan fraksi protein yang berukuran besar dan kecil. Fraksi protein yang lebih besar dari 30 kDa dikumpulkan, kemudian dianalisis dengan SDS-PAGE. Sebagian fraksi tersebut dianalisis secara in situ dengan PAS-staining. Aktivitas fruktansukrase dapat diamati pada gel yang diinkubasi dengan substrat sukrosa dan substrat rafinosa berupa pita berwarna pink intensif. ...... Fructansucrase is an extracellular enzyme which usually produced by Lactic Acid Bacteria (LAB). By LAB, this enzyme is used to produce exopolysaccharide (EPS) from both sucrose and rafinose substrates. EPS has huge potential in pharmaceutical, food and health industries. In previous research, fructansucrase recombinant was cloned into Bacillus subtilis DB 403 and was designed to be secreted extracelullarly. This research aims to isolate the recombinant protein fructansucrase from Bacillus subtilis and to understand the activity of this recombinant fructansucrase. Bacillus subtilis was grown and extracted to obtain the fructansucrase protein within the culture supernatant. PMSF was added into the supernatant to prevent any degradation by proteases. The supernatant was liofilized using freeze-dry method. The protein pellets were then resuspended with small volume of buffer to obtain a more concentrated sample. Subsequently, the protein was filtrated using Amicon® Ultra-15 Centrifugal Filter Device cutoff -30 kDa to separate protein filtrate by size. Protein fraction which was larger than 30 kDa was collected and analyzed by SDS PAGE. Some of the fraction was analyzed in situ using PAS-staining. Fructansucrase activity is observed on gel after incubation with both sucrose and raffinose substrate as a pink intensive band.