Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
Hati merupakan organ yang memiliki kemampuan regenerasi tinggi setelah mengalami kerusakan. Sel punca mesenkimal asal tali pusat merupakan sumber progenitor hati yang dapat ditranplantasikan dan dapat digunakan pada kasus kerusakan hati yang parah. Kerusakan hati yang parah akan memunculkan sel oval sebagai pertahanan tingkat ke dua. Proses regenerasi hati yang diperantarai sel oval sangat kompleks karena melibatkan sitokin, faktor pertumbuhan, hormon dan morfogen. DLK1 (Delta-Like 1 homolog) merupakan salah satu morfogen yang diekspresikan kembali pada kasus kerusakan hati dengan kondisi proliferasi hepatosit yang dihambat. DLK1 diekspresikan oleh sel oval dalam jumlah yang terbatas. Penelitian ini bertujuan mengetahui ekspresi DLK1 dan proliferasi hepatosit yang dinilai menggunakan Ki67 pada kerusakan yang diinduksi 2AAF/CCl₄. Selain itu juga akan dinilai pengaruh sel punca pada ekspresi DLK1 dan proliferasi hepatosit yang dinilai menggunakan Ki67 pada saat proses regenerasi hati. Penelitian ini menggunakan 30 tikus jantan strain Wistar berusia 8 minggu yang dibagi menjadi 5 kelompok (n=6). Proses Induksi kerusakan hati menggunakan 2AAF/CCl₄ selama 12 minggu kemudian diberikan injeksi sel punca mesenkimal asal tali pusat manusia dengan dosis 1x10⁶ sel melalui vena ekor. Dua kelompok (kontrol dan induksi 2AAF/CCl₄) diterminasi pada akhir minggu ke-12 sebagai model kerusakan hati sedangkan tiga kelompok lainnya (kontrol, kelompok dengan sel punca dan kelompok tanpa sel punca diterminasi pada akhir minggu ke-14. Pada penelitian ini ditemukan bahwa terdapat perbedaan signifikan ekspresi DLK1 namun tidak terdapat perbedaan signifikan pada tingkat proliferasi hepatosit yang dinilai dengan Ki67 pada kerusakan hati yang diinduksi 2AAF/CCl₄. Sedangkan pada regenerasi hati tidak ditemukan perbedaan signifikan ekspresi DLK1 dan Ki67 antara kelompok yang diberikan sel punca dan tidak diberikan sel punca. ......The liver is an organ that has a high regeneration ability after being injured. Mesenchymal stem cells from the human umbilical cord are transplanted sources of liver progenitors and can be used in cases of severe liver injury. Severe liver damage will bring out oval cells as a second level defense. The process of liver regeneration which is mediated by oval cells is very complex because it involves cytokines, growth factors, hormones and morphogens. DLK1 (Delta-Like 1 homologue) is one of the morphogens that is expressed again in cases of liver injury with inhibited hepatocyte proliferation. DLK1 is expressed in subpopulation in oval cells compartement of rat liver. This study aims to determine the expression of DLK1 and hepatocyte proliferation which was assessed using Ki67 in the 2AAF/CCl₄ induced severe injury. It will also be assessed the effect of mesenchymal stem cells on DLK1 expression and hepatocyte proliferation which was assessed using Ki67 during the liver regeneration process. This study used 30 male 8-week-old Wistar strain rats divided into 5 groups (n = 6). The process of induction of liver injury using 2AAF/CCl₄ for 12 weeks was then given mesenchymal stem cell injection from human umbilical cord at a dose of 1x10⁶ cells through the tail vein. Two groups (control and 2AAF/CCl₄ groups) were terminated at the end of the 12th week as models of liver injury while the other three groups (control, groups with stem cells and groups without stem cells were terminated at the end of week 14. In this study it was found that there was a significant difference in DLK1 expression but there was no significant difference in the rate of hepatocyte proliferation assessed by Ki67 in 2AAF/CCl₄ induced liver injury, whereas in liver regeneration there was no significant difference in DLK1 and Ki67 expression between groups given stem cells and not given stem cells.

Abstrak :
Latar Belakang: Vesikel ekstrasel (VE) dari sel punca mesenkimal (MSCs) telah banyak dipelajari dan memberikan hasil yang baik terhadap fibrosis dan regenerasi hati. Prekondisi MSCs dengan sitokin spesifik dapat meningkatkan aktivitas terapeutik dari VE. TNF-a dan TGF-b telah terbukti menghambat respon inflamasi dan memicu perbaikan jaringan bila digunakan untuk prekondisi MSCs pada penelitian bidang urologi dan ortopedi. Penelitian ini menggunakan VE dari sel punca mesenkimal tali pusat manusia (hUC-MSC) yang diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier yang mengandung TNF-a dan TGF-b sebagai terapi atresia bilier pada model tikus. Metode: Vesikel ekstrasel dari hUC-MSCs dikultur dalam medium komplit dan diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier. Dilakukan ekstraksi VE dengan sentrifugasi serial pada conditioned medium (CM) hUC-MSC tersebut. Sebelas tikus Sprague Dawley menjalani ligasi duktus koledokus (CBD), lima tikus sebagai kontrol dan enam tikus sebagai penerima perlakuan. Kelompok perlakuan mendapatkan injeksi EV intravena ekor yang dimulai 3 minggu pascaligasi CBD, sebanyak tujuh dosis 150 uL selama tujuh hari berturut-turut. Satu ekor tikus kontrol diterminasi 3 minggu pascaligasi CBD untuk melihat skor fibrosis sebelum diberikan perlakuan. Tikus-tikus kelompok kontrol dan perlakuan diterminasi pada 1 hari dan 2 minggu setelah injeksi VE terakhir. Dilakukan penilaian skor Laennec jaringan hati serta kadar hepatocyte growth factor (HGF), aspartate transaminase (AST), dan alanine transaminase (ALT) darah. Hasil: Pemeriksaan histopatologi jaringan hati 3 minggu pascaligasi CBD menunjukkan skor fibrosis 2. Skor fibrosis kelompok kontrol dan perlakuan 1 hari dan 2 minggu pascainjeksi VE seluruhnya mendapatkan nilai 2. Kadar HGF pada kelompok perlakuan lebih rendah secara signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol 1 hari pascainjeksi VE (1,04+0,11 vs 1,53+0,06; p<0,001), namun lebih tinggi pada 2 minggu pascainjeksi VE meskipun tidak bermakna secara statistik (1,18 (1,18-1,18) vs 0,83 (0,73-0,84); p=0,064). Kadar AST 1 hari pascainjeksi VE kelompok kontrol 1,66+0,05 dan kelompok perlakuan 1,29+0,15 dengan nilai p 0,001. Dua minggu pascainjeksi VE, perbedaan kadar AST pada kedua kelompok menurun (1,12(1,11-1,22) vs 0,74(0,70-0,78); p=0,064). Kadar ALT pada kelompok perlakuan lebih rendah secara signifikan pada 1 hari dan 2 minggu pascainjeksi VE dengan nilai p <0,001 dan 0,025. Kesimpulan: Vesikel ekstrasel dari hUC-MSC yang diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier tidak menurunkan skor fibrosis, namun dapat meningkatkan kadar HGF dan menurunkan penanda cedera hati. ......Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs)-derived extracellular vesicles (EVs) have long been studied and yield a satisfactory result in liver fibrosis and regeneration. Preconditioning of MSCs by specific cytokines can enhance the therapeutic activities of EVs. TNF-a and TGF-b were cytokines that has the potency to inhibit inflammatory responses and promote tissue repair when used as pre-conditioning agent of MSCs in nonliver studies. This study used serum of biliary atresia patients that contain TNF-a and TGF-b as pre-conditioning agent of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs)- derived EVs for the treatment of biliary atresia rat model. Methods: hUC-MSCs were cultured in complete medium and pre-conditioned with serum of human biliary atresia patient. The conditioned medium (CM) from preconditioned hUC-MSCs underwent serial centrifugation to extract EVs. Eleven 5 weeks old Sprague Dawley rats underwent bile duct ligation (BDL). Five rats among the BDL group act as control while six rats were given EVs injection 3 weeks after BDL procedure, seven doses in seven consecutive days, 150 uL each dose. One rat were sacrificed 3 weeks post BDL for fibrosis staging prior to treatment. Rats from control and EVs group were sacrificed at 1 day and 2 weeks after the last EVs injection. Liver tissue were assessed for fibrosis score and blood were analysed for hepatocyte growth factor (HGF), aspartate transaminase (AST), and alanine transaminase (ALT). Results: Liver histopathology 3 weeks post BDL showed Laennec score 2. Fibrosis score of control and EVs group 1 day and 2 weeks after the last EVs injection were all 2. Hepatocyte growth factor level on EVs group were significantly lower than control group on 1 day post EVs injection (1,04+0,11 vs 1,53+0,06; p<0,001), but higher on EVs group on 2 weeks post EVs injection although not statistically significant (1,18 (1,18-1,18) vs 0,83 (0,73-0,84); p=0,064). The level of AST were 1,66+0,05 in control group and 1,29+0,15 in EVs group 1 day after EVs injection, with p value 0,001. Two weeks post EVs injection, the AST levels decreased furthermore (1,12(1,11-1,22) vs 0,74(0,70-0,78); p=0,064). Alanine transaminase level were significantly lower on EVs group both 1 day and 2 weeks post EVs injection, with p value <0,001 and 0,025. Conclusion: Extracellular vesicles from hUC-MSCs pre-conditioned with serum of biliary atresia patients could not lessen fibrosis score, but can increase HGF level and decrease markers of liver injury.