Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"LATAR BELAKANG: Regulasi fungsi spermatozoa bergantung pada modifikasi paska translasi yang dapat diaktivasi melalui serangkaian tranduksi sinyal. Berbagai hormon telah diketahui mengatur aktivasi serangkaian transduksi sinyal dalam spermatozoa matang. Pemberian prolaktin pada spermatozoa normal telah diketahui dapat berperan sebagai faktor ketahanan hidup melalui aktivasi jalur transduksi sinyal PI3K/AKT ? anti apoptosis, sehingga spermatozoa dapat mempertahankan motilitas dan viabilitas. Namun efek pemberian prolaktin terhadap kondisi spermatozoa lainnya seperti astenozoospermia (motilitas rendah dan marker apoptotik tinggi) masih belum diketahui. Inkubasi in vitro pada spermatozoa pasien infertil sebelum dilakukannya fertilisasi berbantuan dapat menyebabkan penurunan viabilitas dan motilitas sperma akibat proses apoptosis. Oleh sebab itu, penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian prolaktin terhadap fosforilasi AKT dari spermatozoa pasien infertil astenozoospermia.BAHAN DAN CARA KERJA: Sampel penelitian ini berjumlah 30 pasien yang dibagi dalam kelompok perlakuan dengan prolaktin dan tanpa prolaktin (Kontrol). Status astenozoospermia, data motilitas sebelum dan sesudah perlakuan didapatkan dari analisis data CASA oleh staff laboratorium androlog Klinik IVF Yasmin, RSCM Kencana Jakarta. Analisis ekspresi protein, fosforilasi dan apoptosis dilakukan dengan teknik imunositokimia dan western blot kemudian dilanjutkan dengan analisis densitometri dengan Image J.HASIL : Berdasarkan hasil uji anova one way dan t test independent, terdapat peningkatan motilitas yang bermakna antara kelompok sebelum inkubasi dan sesudah inkubasi dengan prolaktin serta antara kelompok inkubasi dengan prolaktin dan tanpa prolaktin (kontrol) (p<0,05), meskipun tidak terdapat perbedaan fosforilasi tirosin yang bermakna antara kelompok perlakuan dengan prolaktin dan kontrol. Pada kelompok perlakuan terdapat peningkatan fosforilasi AKT yang bermakna dibandingkan kelompok kontrol (p<0,05), akan tetapi tidak terdapat perbedaan aktivasi kaspase 3 yang bermakna antara kelompok perlakuan dengan prolaktin dan kelompok kontrol.KESIMPULAN : Pemberian prolaktin pada spermatozoa astenozoospermia dapat meningkatkan motilitas dan tingkat ketahanan hidup pada spermatozoa astenozoospermia melalui induksi fosforilasi AKT meskipun tidak memberi perubahan signifikan pada tingkat apoptosis (aktivasi kaspase 3).

---

BACKGROUND: The regulation of sperm cell function depends on post translation modification that can be activated through several signal transduction pathways. Those transduction pathways can be activated by several hormones. It has been reported that prolactin exerts a prosurvival effect on human spermatozoa via mechanisms that involved the stimulation of akt phosphorylation and suppression of caspase activation and capacitation, so that it could preserves viability and motility of spermatozoa. However, prolactin effect on asthenozoospermic sperm has not been investigated. Asthenozoospermia, or low sperm motility, is a common cause of human male infertility. Apoptosis markers appeared significantly higher in asthenozoospermia as compared with normozoospermia. Studies have revealed that apoptosis markers tend to increase in spermatozoa following cryopreservation and thawing or others preparation before assisted reproductive technology treatment. The aim of this research was to evaluate any possible effect of prolaktin as prosurvival factor to induce AKT phosphorylation on spermatozoa of patients with asthenozoospermia.METHODS: Human spermatozoa of asthenozoospermic patients (n=30) were divided into two groups, one with prolactin treatment and one as control (without prolactin. Determination of asthenozoospermic condition, sperm motility parameters were assessed using CASA System at Andrology Laboratorium, Yasmin IVF Clinic, RSCM Kencana,Jakarta. Analysis of prolactin receptor, tyrosine phosphorylation and apoptosis were performed with immunocytochemistry and western blot analysis at Molecular biology Laboratorium FK University of Indonesia and continued with densitomtry analysis using Image J (NIH) program.RESULT : The result of anova one way dan t test independent show that there was a significant increase of motility in the group of sample after incubation with prolactin compare togroup of sample before treatment and control (p<0,05), even though there was no significant difference of tyrosine phosphorilation in both group tratment with prolactin and control. Incubation of spermatozoa with prolactin showed a significant increase in AKT phosphorylation compare with control group (p<0,05), however there was no significant difference of Caspase 3 activation between treatment group and control.CONCLUSION: Prolactin treatment on spermatozoa of asthenozoospermic patient has increase survival rate by induction of AKT phosphorylation, however the high level of proapoptosis factor caused a failure to prevent caspase 3 activation."

"ABSTRAKLatar Belakang: Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh stres oksidatif pada ketahanan hidup spermatozoa manusia melalui peningkatan ekspresi caspase 3 dan aktivasi Akt. Informasi ini berhubungan dengan infertilitas laki-laki yang menurunkan viabilitas dan parameter kinetik spermatozoa.Metode: Spermatozoa manusia diperoleh dari donor normozoospermia. Spermatozoa dimurnikan menggunakan larutan percoll. Spermatozoa dari seminal plasma dilarutkan dalam media Bigger, Whitter, dan Whittingham (BWW). Kemudian, spermatozoa diinkubasi dengan hidrogen peroksida (H2O2) 50 M, 100 M, 150 M, 200 M dan 250 M selama 2 jam. Stres oksidatif diuji dengan uji malondialdehid (MDA). Viabilitas diperiksa dengan larutan eosin Y. Parameter motilitas diukur dengan Computer Assisted Sperm Analyzer (CASA). Deteksi protein western blot akan dilakukan dengan antibodi anti-caspase-3 untuk mengenali caspase-3 dan antibodi phosphodetect yang mengenali fosforilasi Akt.Hasil: Setelah inkubasi H2O2 selama 2 jam, terdapat efek H2O2 terhadap penurunan viabilitas dan motilitas (VAP, VSL, VCL) secara signifikan. Selain itu, viabilitas dan motilitas memiliki hubungan positif dengan proses apoptosis dan ketahanan hidup spermatozoa dengan menggunakan caspase 3 (meningkat) dan fosforilasi Akt (menurun) secara signifikan.Kesimpulan: Stres oksidatif dapat menurunkan viabilitas dan kinetik spermatozoa melalui peningkatan ekspresi caspase-3 dan penurunan aktivitas Akt

---

ABSTRACTBackground: The purposes of this study was to evaluate the effect of oxidative stress on survival of human spermatozoa through releasing apoptotic process, This information has correlated with idiopathic infertility that decrease viability and motility parameters spermatozoa.Methods: Human spermatozoa were obtained from normozoospermic volunteer donors. Spermatozoa was purified using discontinuous Percoll. Spermatozoa from the plasma seminal dissolved in Bigger, Written, and Whittingham (BWW) medium. Then, spermatozoa were incubated with 50 M, 100 M, 150 M, 200 M dan 250 M hydrogen peroxide (H2O2) for 2-h. Oxidative stress were assed by malondialdehyde (MDA) assay. Viability was examined by eosin Y solution. Kinectic parameters were assessed by Computer Assisted Sperm Analyzer (CASA). Detection of perotein in the western blot was examined with anti-caspase-3 antibodies to recognize caspase-3 activity and phsophodetect antibody that recognizes the phosphorylation of Akt.Results: After 2-h incubation H2O2, there was dose dependent effect of H2O2 on viability and motility parameters significantly decrease. Therefore, viability and kinetic were positive relationship on apoptotic and survival effect by using caspase-3 activation (increase) and akt (decrease) significantly.Conclusions: Oxidative stress can decreases viability and kinetic spermatozoa through increase caspse 3 and decrease Akt activation"

"Selama oogenesis, oosit tumbuh dalam ukuran dan memperoleh kompetensi pematangannya. Kompetensi pematangan oosit sangat diperlukan untuk mendukung terjadinya fertilisasi dan perkembangan embrio berkualitas baik. Ketidakmampuan untuk menentukan oosit yang berpotensi menghasilkan embrio yang viable masih menjadi kendala utama pada proses Fertilisasi In Vitro (FIV). Penelitian ini bertujuan mengetahui apakah ukuran diameter oosit bisa menjadi prediktor kualitas oosit dan embrio. Penelitian ini menggunakan desain penelitian prospektif cohort. Metode penelitian untuk pengukuran diameter oosit menggunakan aplikasi Image J, setiap oosit dan sel granulosa dikelompokkan sesuai ukuran diameter oosit, oosit dilakukan fertilisasi dengan teknik ICSI/IMSI kemudian diikuti perkembangan embrio sampai hari ke-5. Pemeriksaan ELISA dipakai untuk mengkonfirmasi kualitas oosit dengan melihat kadar protein Akt dan total Akt pada sel granulosa kumulus oosit, sedangkan untuk mengkonfirmasi kualitas embrio adalah dengan melihat parameter morfokinetik embrio, pencapaian blastokista dan frekuensi abnormalitas pembelahan. Hasil penelitian menunjukkan tidak ada perbedaan signifikan (P>0,05) pada kadar protein p-Akt dan total Akt sel granulosa kumulus antara ketiga kelompok. Selain itu pengamatan morfokinetik embrio menunjukkan tidak ada perbedaan signifikan (P>0.05) kecuali parameter S2, begitu pula dengan pencapaian blastokista serta frekuensi abnormalitas pembelahan kecuali parameter reverse cleavage (RC). Kesimpulan yang didapat dari penelitian ini adalah ukuran diameter oosit tidak mempengaruhi kualitas oosit dan embrio. Ukuran diameter oosit tidak bisa menjadi prediktor kualitas oosit dan embrio, karena tidak ada perbedaan signifikan pada kualitas oosit dan embrio ketiga kelompok. Oosit dengan ukuran diameter kecil memiliki potensi untuk menjadi embrio dengan kualitas baik.

---

During oogenesis, oocytes grow in size and acquire maturation competence. Oocyte maturation competence is necessary to support fertilization and the development of good quality embryos. The inability to determine which oocytes have the potential to produce viable embryos remains a major obstacle in the In Vitro Fertilization (IVF). This study aims to determine whether oocyte diameter can be a predictor of oocyte and embryo quality. This study used a prospective cohort research design. The method used for measuring oocyte diameter using Image J application. Each oocyte and cumulus granulosa cells is grouped according to the size of oocyte diameter, oocyte are fertilized with ICSI/IMSI techniques and then followed by embryo development until day 5. ELISA examination is used to confirm oocyte quality by looking at p-Akt and Akt total protein levels in oocyte cumulus granulosa cells, while to confirm embryo quality by looking at the morphokinetic embryo, blastocyst achievement and frequency of cleavage abnormalities. The results showed no significant difference (P>0.05) in p-Akt and Akt total protein levels in cumulus granulosa cells between the three groups. In addition, morphokinetic observation of embryos showed no significant difference (P>0.05) except S2 parameter, as well as the achievement of blastocyst and the frequency of cleavage abnormalities except the reverse cleavage (RC) parameter. The conclusion obtained from this study is that the size of the oocyte diameter does not affect the quality of oocytes and embryos. Oocytes diameter size can not be a predictor of oocyte and embryo quality, because there is no significant difference in the quality of oocytes and embryos of the three groups. Oocytes with a small diameter size have the potential to become embryos with good quality."

"Latar Belakang: Dalam rangka mengembangkan terapi alternatif rekonstruksi tulang alveolar pada celah bibir dan palatum (CLP), teknologi rekayasa jaringan menjadi alternatif yang menjanjikan dengan menggunakan komponen sel stromal dan faktor pertumbuhan. Penelitian terbaru mengenai DPSC pada pasien CLP menghasilkan penyembuhan tulang yang memuaskan. Selain itu, ditemukan ekspresi berlebih dari IGF-1 pada DPSC pasien CLP. AKT dan MTOR merupakan downstream dari jalur pensinyalan IGF-1. AKT memiliki peran sebagai pengatur kelangsungan hidup dan proliferasi sel. Pensinyalan MTOR mengatur transkripsi gen dan sintesis protein untuk mengatur proliferasi sel dan diferensiasi sel. Namun, karakteristik DPSC subjek normal dan pasien celah bibir dan palatum berdasarkan ekspresi gen AKT dan MTOR dengan penghambat IGF-1 belum diketahui secara pasti. Tujuan: Mengevaluasi efek anti IGF-1R dan IGFBP-3 terhadap karakteristik DPSC subjek normal dan pasien CLP melalui ekspresi gen AKT dan MTOR. Metode: RNA DPSC subjek normal (n=4) yaitu kelompok sebelum perlakuan, kontrol negatif tanpa FBS, kontrol negatif dengan FBS, perlakuan anti IGF-1R. RNA DPSC CLP (n=3) yaitu kelompok sebelum perlakuan, kontrol negatif tanpa FBS, kontrol negatif dengan FBS, perlakuan anti IGF-1R. Analisis ekspresi gen AKT dan MTOR menggunakan GAPDH sebagai housekeeping gene dengan Real time PCR. Hasil: Tidak terdapat perbedaan ekspresi gen AKT dan MTOR, antara DPSC subjek normal dengan CLP sebelum perlakuan (p0,05) ataupun DPSC subjek normal dengan CLP setelah perlakuan anti IGF-1R (p0,05). Kesimpulan: Sel stromal pulpa gigi permanen subjek normal dan pasien celah bibir dan palatum pada kelompok sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan anti IGF-1R memiliki karakteristik yang sama melalui ekspresi gen AKT dan MTOR.

---

Background: In order to develop alternative therapies for alveolar bone reconstruction in cleft lip and palate (CLP), tissue engineering technology is a promising alternative using stromal cell and growth factors. Recent studies regarding DPSC in CLP patients have resulted in satisfactory bone healing. In addition, overexpression of IGF-1 was found in the DPSC of CLP patients. AKT and MTOR are downstream of the IGF-1 signaling pathway. AKT has a role as a regulator of cell survival and proliferation. MTOR signaling regulates gene transcription and protein synthesis to regulate cell proliferation and cell differentiation. However, the characteristics of DPSC normal subjects and cleft lip and palate patients based on AKT and MTOR gene expression with IGF-1 inhibitors are unknown. Objective: To evaluate the effect of anti-IGF-1R and IGFBP-3 on DPSC normal and CLP subject through AKT and MTOR gene expression. Methods: RNA from DPSC normal subject (n=4) with pretreatment, negative control without FBS, negative control with FBS, anti IGF-1R treatment dan DPSC CLP subject (n=3) with pretreatment, negative control without FBS, negative control with FBS, anti IGF-1R treatment. Analysis of AKT and MTOR gene expression using GAPDH as a housekeeping gene with Real time PCR test. Results: There was no difference in AKT and MTOR gene expression, either between DPSC of normal subjects and CLP patients before treatment (p0.05) or DPSC of normal and CLP patients after anti IGF-1R treatment (p0.05). Conclusion: DPSC of normal subjects and cleft lip and palate patients have the same characteristic with anti IGF-1R treatment through AKT dan MTOR gene expression."

"Kanker serviks merupakan masalah kesehatan yang penting terutama di negara- negara berkembang seperti Indonesia. Keganasan ini merupakan jumlah terbanyak kedua dari seluruh keganasan pada wanita di seluruh dunia. Ketahanan hidup yang merupakan bagian dari prognosis pasien kanker serviks dapat ditentukan oleh tingkat respon sel kanker terhadap radioterapi. Selama ini faktor histopatologi berupa derajat diferensiasi merupakan faktor prognosis, semakin buruk derajat diferensiasi suatu kanker serviks maka semakin buruk pula prognosisnya. Ekspresi MVP dapat digunakan untuk memperkirakan resiko kegagalan pengobatan, sehingga dalam penelitian ini digunakan MVP sebagai salah satu faktor prognosis. MVP juga terkait dengan resistensi sel terhadap radioterapi dan diduga berhubungan dengan pencegahan terjadinya apoptosis jalur COP-1/p53. Interaksi antara P53 dan PI3K/Akt berperan penting dalam menentukan kematian sel kanker.Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui hubungan MVP, P53 dan Akt pada kanker serviks sebelum kemoradioterapi dengan respon terapi, dan untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan kualitatif asam deoksiribonukleat (DNA) MVP sebelum dan sesudah kemoradioterapi. Penelitian ini dilakukan dengan teknik pewarnaan imunohistokimia menggunakan antibodi MVP, P53, dan Akt pada 21 sampel biopsi sel kanker serviks. Analisis dengan Real-time PCR juga dilakukan terhadap darah pasien untuk MVP. Uji statistik dengan SPSS menunjukkan tidak adanya hubungan antara umur dengan MVP, P53, dan Akt (p =0,076, p= 0,801, p= 0,494).Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak ada hubungan antara stadium sel dengan MVP dan Akt tetapi terdapat hubungan antara stadium dengan P53. Hasil juga menunjukkan tidak adanya hubungan antara MVP dengan P53 dan antara MVP dengan Akt, namun terdapat hubungan P53 dengan Akt . Tidak ditemukan adanya hubungan antara respon terapi dengan MVP, dengan P53 dan dengan Akt. MVP juga terdapat dalam darah pasien dengan menggunakan Real-time PCR. Kesimpulan dari penelitian ini adalah bahwa ekspresi protein MVP, P53 dan Akt dalam sel kanker dalam kategori sedang (mild) (30-70%).

---

Servical cancer is of important cases in health sector in developing countries such as Indonesia. This malignancy ranks as the second highest of all malignancies found in women all around the world. The survival that is a part of prognostic of cervical cancer patient can be determined from the level of cancer cells response to radiotherapy. During this time histopathological factor as the degree of differentiation is a prognostic factor, the worst the differentiation degree of cervical cancer the worst its prognostic. Expression of MVP can be used to predict the risk of fail in the treatment, so that in this research MVP was used as a prognostic factor. MVP is closely related to the resistance of cells to radiotherapy and is correlated to the apoptosis through COP-1/p53 pathway. Interaction between P53 and PI3K/Akt has an important role in the determination of cancer cells death.The aim of this research was to know the relationship between MVP, P53 and Akt in cervical cancer before chemoradiotherapy with the therapy response, and to know whether there is a qualitative difference in deoxyribonucleic acid (DNA) of MVP before and after chemoradiotherapy. This research was done with immunohistochemistry staining technique using MVP, P53, and Akt antibodies, on 21 biopsy samples of cervical cancers. Analysis with Real-time PCR was also done to the blood of patients for MVP. Statistical test with SPSS showed that there was no correlation between age and MVP, P53, and Akt (p =0.076, p= 0.801, p= 0.494).Research showed that there was no correlation between stadium with MVP and Akt but there was a correlation between stadium and P53. Results also showed that there was no correlation between MVP and P53, between MVP and Akt, but there was a correlation between P53 and Akt. Moreover there was no correlationship between therapy response with MVP, with P53 and with Akt. MVP was also found in the blood based on Real-time PCR analysis. The conclusion from this research was that the expression of MVP, P53 and Akt proteins in cervical cancer are in mild category (30-70%)."

"Stroke merupakan penyakit yang menyebabkan kematian nomor dua dan kontributor penyebab disabilitas tertinggi di dunia dengan jenis stroke iskemik menjadi penyebab umum stroke. Saat ini, terapi standar stroke yang disetujui oleh Food and Drug Administration (FDA) hanya recombinant tissue plasminogen activator (rtPA). Penelitian mengenai efektivitas terapi rtPA menunjukkan rtPA memiliki tingkat keberhasilan untuk sembuh sepenuhnya hanya sebesar 35%. Oleh karena itu, terapi restoratif dikembangkan untuk penanganan stroke salah satunya terapi berbasis sel menggunakan sekretom dari mesenchymal stem cells (MSC). Dalam patofisiologis stroke, berbagai cascade reaksi molekuler internal sel memiliki peran yang kompleks. Contoh faktor yang terlibat dalam cascade molekuler tersebut adalah Protein kinase B (AKT) sebagai faktor penunjang survivability sel, dan Nuclear factor-kappa B (NF-kB) sebagai faktor pengaktif jalur inflamasi. Dalam penelitian ini, profil ekspresi gen tersebut diteliti dari sel punca MSC yang berasal dari Macaca fascicularis dengan diberikan perlakuan prakondisi hipoksia oksigen 3% selama 48 jam. Tingkat ekspresi mRNA gen tersebut diinvestigasi dengan metode RT-qPCR. Hasil uji ekspresi gen menunjukan peningkatan mRNA gen protein AKT1 dan penurunan mRNA gen protein NF-kB pada MSC prakondisi hipoksia. Hal tersebut menunjukkan potensi sekretom prakondisi sebagai terapi restoratif yang ditunjukkan dari perubahan profil ekspresi gen yang mengarah pada survivability cell.

---

Stroke is the second leading cause of death and the highest contributor to disability worldwide, with ischemic stroke being the most common type. Currently, the only FDA-approved standard therapy for stroke is recombinant tissue plasminogen activator (rtPA). Research on the effectiveness of rtPA therapy indicates that it has a full recovery success rate of only 35%. Consequently, restorative therapies, including cell-based therapies using secretomes from mesenchymal stem cells (MSCs), are being developed for stroke treatment. In the pathophysiology of stroke, various internal cellular molecular cascades play a complex role. Examples of factors involved in these molecular cascades include Protein kinase B (AKT), which supports cell survivability, and Nuclear factor-kappa B (NF-kB), which activates inflammatory pathways. In this study, the gene expression profiles of these factors were investigated in MSCs derived from Macaca fascicularis, subjected to hypoxic preconditioning with 3% oxygen for 48 hours. The mRNA expression levels of these genes were analyzed using the RT-qPCR method. The results showed an increase in AKT1 protein mRNA expression and a decrease in NF-kB protein mRNA expression in hypoxia-preconditioned MSCs. These findings indicate the potential of hypoxia-preconditioned secretomes as restorative therapy, as evidenced by changes in gene expression profiles that promote cell survivability."