Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Jamu merupakan satu di antara obat tradisional, karena itu perlu dilakukan uji keamanan, salah satunya dengan menentukan nilai LD50, melalui uji toksisitas akut. Jamu yang akan digunakan pada penelitian ini mengandung ekstrak Guazuma ulmifolia Lamk, ekstrak Camellia sinensis, ekstrak Phaseolus vulgaris, dan ekstrak Garcinia cambogia yang secara empiris berkhasiat untuk menurunkan berat badan. Penelitian ini tidak hanya bertujuan untuk menentukan nilai LD50, tetapi juga untuk mengamati pengaruh pemberian jamu pelangsing SF terhadap fungsi dan histologis organ hati. Pada penelitian ini digunakan 100 ekor mencit putih (50 ekor mencit jantan dan 50 ekor mencit betina). Tiap jenis kelamin dibagi ke dalam lima kelompok dengan 10 mencit untuk tiap kelompoknya. Kelompok I adalah kelompok kontrol yang diberi CMC 0,5%, sedangkan kelompok II, III, IV,dan V diberi dosis 2812,5 mg/kg bb, 5625 mg/kg bb, 11250 mg/kg bb dan 22500 mg/kg bb. Pengamatan terhadap jumlah kematian dilakukan pada 24 jam setelah pemberian jamu, dan hasilnya adalah tidak ada kematian pada hewan uji dan jamu yang diuji praktis tidak toksik (> 15 g/kg bb). Pengukuran aktivitas ALT dan alkali fosfatase plasma yang dilakukan pada 24 jam dan 14 hari setelah pemberian jamu, menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan bermakna baik antar kelompok perlakuan maupun dengan kelompok kontrol. Demikian pula pada pemeriksaan histologis hati yang dilakukan pada 14 hari setelah pemberian jamu, menunjukkan tidak terdapat perbedaan bermakna baik antar kelompok perlakuan maupun dengan kelmpok kontrol."

"Jamu ?DNR? merupakan salah satu obat tradisional Indonesia yang telah digunakan untuk mengatasi diare. Jamu ini mengandung attapulgit, karbon aktif, ekstrak daun jambu biji, ekstrak rimpang kunyit, ekstrak buah mojokeling, ekstrak kulit buah delima, dan ekstrak biji jali. Untuk menjamin penggunaannya, maka perlu dilakukan penelitian terhadap keamanannya, salah satunya dengan melakukan uji toksisitas akut.Penelitian ini bertujuan untuk menentukan nilai LD50 dan mengetahui efek toksik terhadap fungsi hati ditinjau dari aktivitas aminotransferase dan fungsi ginjal ditinjau dari kadar urea dan kreatinin plasma. Penelitian menggunakan hewan uji mencit putih galur ddY, yang dikelompokkan menjadi lima kelompok, masing-masing kelompok terdiri atas 5 ekor mencit jantan dan 5 ekor mencit betina. Kelompok I, II, III, IV adalah kelompok perlakuan yang diberikan larutan uji dengan dosis berturut-turut 1650, 3300, 6600, dan 13200 mg/kg bb, sedangkan kelompok V adalah kelompok kontrol yang diberikan larutan CMC 0,5%. Penentuan nilai LD50 dilakukan dengan menghitung jumlah hewan yang mati selama 24 jam pemberian jamu ?DNR?.Hasilnya adalah pada dosis tertinggi yang diberikan (13200 mg/kg bb) tidak menimbulkan kematian pada hewan uji. Selanjutnya, dilakukan pengambilan darah melalui sinus orbital mata pada 24 jam dan 14 hari setelah perlakuan. Darah tersebut digunakan untuk mengukur aktivitas aminotransferase dengan metode kolorimetri(Reitmann-Frankel), kadar urea plasma dengan metofe Jaffe termodifikasi, dan kadar kreatinin plasma menggunakan Diasetil Monoksim.Hasil yang diperoleh kemudian dianalisis menggunakan uji statistik Analisis Varian Satu Arah dengan = 0,05. Pada hasil pengukuran tersebut tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna antar kelompok dosis dengan kelompok kontrol. Hasil ini menunjukkan bahwa pada pemberian jamu ?DNR? sampai dosis tertinggi 13200 g/kg bb tidak mempengaruhi fungsi organ hati dan ginjal mencit putih. "

"Pada penelitian ini dilakukan uji toksisitas akut dengan parameter nilai LD50, fungsi hati yang dinilai dari aktivitas enzim transaminase dan fungsi ginjal yang dinilai dari kadar urea serta kreatinin plasma. Hewan coba yang digunakan berupa mencit putih jantan dan betina galur ddY berumur lebih kurang dua bulan dengan berat badan 20 ? 35 gram masing-masing 50 ekor. Bahan uji yang digunakan adalah bahan obat herbal "X" yang merupakan ekstrak daun sukun (Artocarpus altilis) yang terdiri dari flavonoid sebanyak 30%. Pengujian menggunakan empat kelompok dosis yang diberikan bahan uji berturut-turut adalah 2,08; 4,17; 8,34 dan 16,67 gram ekstrak/kgbb dan sebagai kelompok kontrol yang digunakan adalah larutan CMC 1%. Uji LD50 ditentukan oleh banyaknya kematian dalam kelompok selama 24 jam dari perlakuan berupa satu kali pemberian dalam dosis tinggi. Hasilnya menunjukkan bahan obat herbal "X" bersifat praktis tidak toksik karena pemberian dosis tertinggi adalah16,67 gram ekstrak/kgbb tidak menimbulkan kematian terhadap hewan uji. Pengambilan darah dilakukan melalui ekor, dan dilakukan pengukuran fungsi hati dan ginjal setelah 24 jam dan 14 hari dari perlakuan. Penilaian fungsi hati dinilai dari aktivitas enzim transaminase yang menggunakan metode kolorimetri, penilaian fungsi ginjal dinilai dari kadar urea yang diukur menggunakan metode fearon dan kadar kreatinin yang diukur menggunakan metode jaffe yang dimodifikasi. Hasil ANAVA terhadap fungsi hati dan ginjal didapatkan kesimpulan bahan obat herbal "X" tidak menunjukkan perbedaan bermakna antar kelompok perlakuan maupun dengan kelompok kontrol. Sehingga bahan obat herbal "X" aman untuk fungsi hati dan ginjal mencit.

---

In this research, acute toxicity test has been done by LD50 while liver function is assessed from transaminase enzyme activity and kidney function assessed from rate urea and creatinin plasma. As animal experimental were 50 female and male white mice of ddY, two month old with body weight was 20-30 gram. Test substance was "X" herbal medicine which is bread-fruit leaf extract (Artocarpus altilis) that consist of 30% flavonoid. Mice were divided into four groups which was given to 2,08; 4,17; 8,34 and 16,67 gram extract /kgbw consecutively and as a group control used CMC 1%. The LD50 test was determined by the number of death in group during 24 hour after giving once high dose.

The result showed "X" herbal medicine was practically non toxic, because the highest dose was given 16,67 gram/kgbw did not generate the death to animal experimental. Blood was collected from tail, measurement of liver and kidney function was done after 24 hours and 14 week from treatment. Liver function is known from transaminase enzyme activity by using colorimetri method. Measurement of kidney is done from urea concentration by using fearon method and creatinin concentration using jaffe modification method. The result of ANAVA for liver and kidney function was concluded that there was no significant differentiation between treatment group and control group, the result was "X" herbal medicine was harmless for the function of liver and kidney mice."

"Pengaruh pencegahan Vitamin A terhadap sifat-sifat karsinogenik dan toksik yang diinduksikan oleh Dimethylnitrosamine (DMN) terhadap hati tikus, telah diteliti melalui 2 (dua) pendekatan: pendekatan tes karsinogenitas dan pendekatan tes toksisitas subakut. Pada penelitian pangaruh karsinogenitas DMN dalam tes prakarsinogenisitas, telah dipergunakan 60 (enam puluh) ekor tikus putih percobaan betina dari Lembaga Makanan Rakyat (LMR), masing-masing berumur satu bulan.Berdasar penemuan dalam penelitian pendahuluan, Vitamin A diberi selama satu minggu sebelum dan delapan minggu selama pemberian dosis DMN. Dosis efektif Vitamin A yang dipergunakan sebesar 3,000 S.I./tikus secara berseling hari,dengan memasukkannya langsung ke dalam mulut tikus, sedangkan DMN diberikan pada dosis 30 ppm (mg per kg air), dilarutkan dalam air minum secara bebas (ad libitum). Hasil penelitian menunjukkan bahwa DMN menurunkan konsumsi air minum dan makanan pada tikus-tikus percobaan dan DMN, seperti juga sebagian besar jenis bahan beracun lain, dapat menurunkan kecepatan tumbuh dari tikus percobaan tersebut, sedangkan Vitamin A dapat mengurangkan tingkat pengaruh dari DMN itu.DMN juga memberikan retensi air di dalam hati tikus dan meningkatkan berat basah dari hati dan ginjal binatang-binatang tersebut. Tikus yang diberi DMN and Vitamin A memperlihatkan peningkatan berat hati.Penelitian fungsi hati: Tikus-tikus yang diberi DMN dengan tanpa Vitamin A memperlihatkan kadar Amino transferase aspartat (AST - Aspartate Amino Transferase) Amino transferase Y-glutamat (GGT - Y! Glutamyl Amino Transferase), dan Triglycerida (TG) dalam batas-batas normal, tetapi kadar Phosphatase lindi (AP - Alkaline Phosphatase) meningkat dua kali lipat, sedangkan kadar protein (albumin) terdapat pada tingkat dalam tingkat normal.Pada kelompok yang diberi DMN bersamaan dengan Vitamin A, pada satu minggu pemberian DM, Vitamin A memberikan pengaruh terhadap induksi aktivitas Damethylase DMN, bila Vitamin A itu diberikan sebelum atau berbareng dengan pemberian DMN, tetapi pengaruh tersebut tidak tampak bila Vitamin A setelah pemberian DMN.Penelitian di bawah mikroskap memperlihatkan bahwa kelompok-kelompok tikus yang diberi DMN dengan atau tanpa Vitamin A tidak memberikan gambaran hati yang berbeda secara makna statistik, bila diberi DMN untuk satu minggu, tetapi bila pemberian DMN dilakukan untuk waktu lebih lama, yaitu untuk 2 (dua) minggu, terlihat perbedaan pada gejala-gejala toksik yang didukung oleh hasil yang terdapat pada penelitian prakarsinigenisitas (diberi DMN) untuk selama 8 (delapan) minggu. Penelitian makroskopik maupun mikroskopik tidak memperlihatkan pertumbuhan yang bermakna pada ginjal tikus-tikus percobaan tersebut. Vitamin A mempunyai pengaruh melindungi melawan sifat karsinogenisitas dan toksisitas terhadap hati tikus percobaan yang diinduksi oleh DMN dalam dua cara: yang pertama melalui penghambatan bersaring terhadap enzim-enzim mikrosoma dan memblokade tingkat penting dari proses pengaktifan DI1N, dan yang kedua melalui peningkatan respons immunologik dari tikus-tikus percobaan itu terhadap benda-benda asing, penyakit-penyakit dan termasuk pula terhadap sel-sel hati yang mengalami perubahan pada masa proses proleferasi dan multiplikasi. Dan Vitamin A mempunyai juga pengaruh yang menghambat, terhadap peningkatan dari kegiatan Demethylase DMN yang bersangkutan dengan proses penggiatan metabolik dari DMN tersebut. Dengan singkat dapat dikatakan bahwa Vitamin A dapat menghindarkan pengaruh DMN sebagai bahan toksik dan karsinagenik terhadap hati tikus, meskipun tidak secara mutlak.

---

The preventive effect of vitamin A on carcinogenicity and toxicity induced by dirnethylnitrosamine (DIN) on rat livers was studied through 2 tests, precarcinogenicity test and sub acute toxicity test.To study on carcinogenic effect of DMN in the precarcinogenicity test, 60 albino female Lembaga Makanan Rakyat (LMR) Rats with the age of one-month were used.Based on the preliminary study of this experiment vitamin A was given 1 week before and 8 weeks during DMN treatment. The effective dosage of vitamin A given was 3,000 IU'rat alternate days by dropping into the mouth and the DMN at a dosage of 30 ppm through drinking water adlib. The results show that DM decreases water and food consumption of experimental rats and DMN, like most toxic agents, can decrease growth rate of experimental rats and that vitamin A can decrease the degree of this toxic effect induced by DM.N. DMN also causes water retention in the rat livers and kidneys causing weights increase.In the DMN and vitamin A treated rats liver weights have also increased, Liver function tests show that serum levels of aspartate amino transferase (AST), glutamyl amino transferase (GGT) and triglyceride (TG) of the DMN with/without vitamin A treated rats are in the normal values, but alkaline phosphates (AP) levels rise 2-fold, and protein (albumin) levels are significantly low.In the DMN and vitamin A treated rats globulin levels are high, and DIN demethylase activity of the liver is also increased.Macroscopic findings show that 18 out of 20 rats in the DMN treated group developed red discolored lesions of the livers, but only 6 out of 19 rats in the DMN and vitamin A treated group. It also shows that 10 out of 20 rats of DMN treated group developed hepatocyte nodules but no nodules were found in the DMN and vitamin A treated group. Macro and Microscopic findings show no significant changes of the kidneys."

"ABSTRAKRambut jagung untuk peluruh air seni, penurun tekanan darah tinggi, dan penurun kadar kolesterol belum diketahui keamanan penggunaannya, sehingga perlu dilakukan penelitian mengenai keamanannya. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui keamanan penggunaan ekstrak air rambut jagung yang ditinjau dari nilai LD50 dan pengaruhnya terhadap fungsi hati dilihat dari dari aktivitas alanin aminotransferase (ALT) dan alkali fosfatase (ALP) plasma serta fungsi ginjal dilihat dari kadar urea dan kreatinin plasma. Hewan uji berupa mencit jantan dan betina galur DDY, sebanyak 50 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok 1, 2, 3, dan 4 diberi ekstrak air rambut jagung dengan dosis berturut¬turut 3,84; 7,68; 15,36; 30,72 g/kg bb, sedangkan kelompok 5 diberi larutan CMC 0,5%. Nilai LD50 ditentukan dengan menghitung jumlah hewan yang mati selama 24 jam setelah pemberian ekstrak. Pengukuran fungsi hati dan ginjal dilakukan pada 24 jam dan 14 hari setelah perlakuan. Penilaian fungsi hati ditinjau dari aktivitas ALT dan ALP menggunakan metode kolorimetri, penilaian fungsi ginjal ditinjau dari kadar urea menggunakan metode Fearon dan kadar kreatinin menggunakan metode Jaffe yang dimodifikasi. Hasilnya menunjukkan pemberian ekstrak air rambut jagung sampai dosis tertinggi 30,72 gram ekstrak/kg bb tidak menimbulkan kematian dan tidak mempengaruhi fungsi hati dan ginjal mencit.

---

ABSTRACTCorn silk for diuretic, antihypertension, and antihyperlipidemia is unknown its safety of use, so that research was needed to find out its safety of use. This study was intended to find out the safety of use of aqueous extract of corn silk reviewed from LD50 and its effect on liver function in terms of alanin aminotransferase (ALT) and alkali phosphatase (ALP) activity and renal function in terms of urea and creatinine level. Fifty DDY male and female mice were used and divided into 5 groups. First to fourth groups were given the aqueous extract of corn silk with dose respectively 3.84; 7.68; 15.36; 30.72 g/kg bw, while fifth group was given 0.5% of CMC solution. LD50 value was determined by calculating dead mice for 24 hours of administration of extract. Measurements of liver and renal function were carried out in 24 hours and 14 days after treatment. Assessment of liver function in terms of ALT and ALP was using colorimetry method, assessment of renal function in terms of urea level was using Fearon method and creatinine level was using modified Jaffe method. Results showed that administration of aqueous extract of corn silk until dose of 30.72 g/kg bw did not cause death and did not affect liver and renal function of mice."

"Tanaman Jintan (Plectranthus amboinicus) dikenal sebagai tanaman bangun-bangun, dikenal sebagai salah satu tanaman berkhasiat obat bagi masyarakat Indonesia. Penelitian ini bertujuan menganalisis aktivitas ekstrak daun jintan dan mengetahui efek toksisitas akut pada tikus putih yang diinduksi arthritis. Ekstrak dari daun jintan segar disarikan dengan metode maserasi ethanol 96%, dan diencerkan dengan larutan CMC-Na. Tikus putih Wistar jantan dan betina, umur 2-3 bulan dibagi 5 kelompok: Kontrol, induksi arthritis (P1), induksi artritis dan ekstrak daun jintan dosis 19 g/kgBB (P2), induksi artritis dan ekstrak daun jintan dosis 38 g/kgBB (P3) dan kelompok obat allopurinol 2,5 mg/kgBB (P4). Seluruh kelompok tikus diinduksi arthritis menggunakan uric acid 2% dan oxonic acid 1,5% per oral selama 15 hari berturut-turut. Setelah terbentuk lesi arthritis, diberikan ekstrak daun jintan secara intra peritoneal selama 7 hari. Sampel serum darah diambil sebelum dan sesudah perlakuan untuk mengukur konsentrasi monosodium urea (MSU). Uji toksisitas akut menggunakan 4 kelompok tikus putih Wistar jantan dan betina yang diberi ekstrak daun jintan mulai dosis 1900 mg/kg BB, 3800 mg/kgBB dan 5000 mg/kgBB. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak daun jintan secara kualitatif mempunyai kandungan senyawa Flavonoid, Saponin, Polifenol, Terpen dan Antrakuinon. Uji aktivitas ekstrak daun jintan memperlihatkan penurunan konsentrasi MSU (p<0,05) pada kelompok P2 dan P3, sedangkan pada kelompok P1, P4 dan kontrol tidak ada perbedaan (p>0,05) sebelum dan sesudah perlakuan. Uji toksisitas akut ekstrak daun jintan tidak menimbulkan kematian 50% (LD50) dan tidak menimbulkan gejala toksik, gangguan syarafi dan penurunan aktivitas pada semua kelompok perlakuan sehingga ekstrak daun jintan dapat digolongkan sebagai bahan yang ?praktis tidak toksik.

---

Anti Inflammation Effects and Acute Toxicity of Jintan Leaves (Plectranthus amboinicus) Extract on Arthritis Induced Rats. Jintan plant (Plectranthus amboinicus) is known as bangun-bangun plant and known as one of medicinal plants for Indonesian people. The purposes of this study were to analyze jintan leaves extract activity and to understand acute toxicity effect on arthritis induced rats. Extract were obtained from fresh jintan leaves by ethanol 96% maceration method, then diluted with CMC-Na. White rats strain wistar aged 2?3 months were divided into 5 groups: Control; treatment arthritis induced (P1), treatment arthritis induced given extract dose of 19 g/kg BW (P2); treatment arthritis induced given extract dose of 38 g/kgBW (P3) and treatment group with allopurinol dose of 2.5 mg/kg BW. Arthritis induced was done by uric acid 2% and oxonic acid 1.5% intraperitoneal for 15 days. After formed a lesion arthritis, jintan extract and allopurinol were given for 7 days. Blood serum sample were collected before and after treatment to measure Monosodium Urea (MSU) concentration. Acute toxicity test using 4 groups of Wistar rats given jintan extract starting dose of 1900 mg/kgBW, 3800 mg/kgBW and 5000 mg/kgBW. The results showed that jintan extract contain relative fraction of flavonoid, saponin, polyphenol, terpen and antraquinon. Activity test of jintan extract showed decrease concentration of MSU (p<0.05) in group P2 and P3, while in group P1, P4, and control no differences (p>0.05) before and after treatment. Acute toxicity test showed no lethal dose 50% and there were no toxic symptoms of neurological disorders and physical activity disturbance in all treatment group, so that jintan leaves extract can be classified as ?practically nontoxic? herbal plant."

"Hingga saat ini di Indonesia belum ada metode uji toksisitas akut limbah yang terakreditasi oleh Komite Akreditasi Nasional (KAN). Organization for Economic Cooperation & Development (OECD) merupakan salah satu organisasi yang sudah mengeluarkan prosedur standar pengujian toksisitas lingkungan OECD 425 secara internasional.Penelitian ini dilakukan untuk menganalisis apakah metode OECD 425 memenuhi persyaratan validasi yaitu akurasi dan presisisi serta dapat digunakan sebagai metode standar pengujian toksisitas akut limbah di Indonesia. Pada penelitian ini digunakan tembaga (II) sulfat pentahidrat sebagai reference toxicant untuk mengetahui nilai LD50 dan pengaruh pemberian larutan tersebut pada hati dan ginjal. Hewan uji berupa mencit betina galur DDY sebanyak 120 ekor. Kelompok perlakuan diberi tembaga (II) sulfat pentahidrat dengan dosis berturut-turut 840 dan 2150 mg/kg bb, sedangkan kelompok kontrol diberi akuades. Nilai LD50 ditentukan dengan software AOT425StatPgm, kemdian dilakkan validasi nilai LD50 tersebut.Hasil uji toksisitas akut oral OECD 425 menunjukkan nilai LD50 tembaga (II) sulfat pentahidrat 1344 mg/kg bb yang sesuai dengan literatur. Pemeriksaan histologi hati dan ginjal menunjukkan adanya pengaruh pemberian dosis 840 mg/kg bb dan 2150 mg/kg bb. Metode pengujian toksisitas akut oral OECD 425 memenuhi persyaratan akurasi dan presisi serta dapat menjadi metode acuan untuk pengujian toksisitas akut oral limbah di Indonesia.

---

Up to this time in Indonesia, an acute oral toxicity test of waste hasn?t been accreditated by the National Accrediatation Committee (KAN). Organization for Economic Cooperation & Development (OECD) is one of the organization which published an OECD 425 guideline method for environmental toxicology testing internationally.

This study was intended to find out whether the OECD 425 method can satisfy the accuracy and precision of validation criteria and can be used as the standard acute toxicity test for waste in Indonesia. Copper (II) sulphate pentahydrate was used as a reference toxicant in order to determine the LD50 value and determine the effect of the solution on liver and kidney. One hundred and twenty DDY female mice were used in the trial. Treated groups were given the reference toxicant solution of copper (II) sulphate pentahydrate with dose of 840 and 2150 mg/kg bw, while control group was given the aquadest. LD50 value was determined by AOT425StatPgm software.

The results of the acute oral toxicity OECD 425 test showed that LD50 value of copper (II) sulphate pentahydrate was 1344 mg/kg bw which was in agreement with literature. The histology examinations data showed that administration of the reference toxicant solution dose 840 mg/kg bw and 2150 mg/kg bw affect the liver and kidney of mice. Acute oral toxicity OECD 425 method has proved its accuracy and precision of validation criteria, thus can be used as the reference acute toxicity method for waste in Indonesia."

"Tujuan umum: Mengetahui profil keamanan dan efek getah J. curcas terhadap jaringan gigi dan periapeks dalam persiapan untuk memanfaatkan pemakaian bahan alami getah J. curcas pada radang pulpa. Tujuan khusus (1) Mengetahui kandungan golongan senyawa getah J. curcas. (2) Mengetahui sitotoksisitas getah J. curcas. (3) Mengetahui toksisitas akut pemberian secara oral dosis tunggal getah J. curcas pada hewan percobaan. (4) Mengetahui aktivitas hemolisis getah J. curcas pada darah manusia secara in vitro. (5) Mengetahui sifat mutagenisitas getah J. curcas. (6) Mengetahui efek getah J. curcas terhadap pembebasan interleukin-1β oleh sel makrofag. (7) Mengetahui efek getah J. curcas terhadap pembebasan kolagenase pada set fibroblast. (8) Mengetahui efek histopatologik getah J. curcas terhadap pulpa dan jaringan periapeks gigi pada hewan percobaan. (9) Mengetahui efek getah J. curcas terhadap kekerasan macro jaringan keras gigi manusia secara in vitro. (10) Mengetahui efek getah J. curcas terhadap jaringan keras gigi manusia dalam hal kelarutan unsur kalsium dan fosfat secara in vitro. Metode penelitian: Disain penelitian eksperimental dan eksplorasi. Penelitian dibagi atas (1) skrining fitokimia, (2) tahap 1 dan (3) tahap 2 evaluasi biologik getah J. curcas. Untuk standardisasi getah J. curcas diambil dari satu petak tanaman dalam satu musim, kemudian diukur pH, volume basah, diliofilisasi, diukur berat kering, dan disimpan pada -20°C sebagai sampel. (1). Skrining fitokimia getah J. curcas. Analisis kualitatif golongan senyawa diidentifikasi dari ekstrak eter, etil asetat, dan air. (2). Uji toksisitas 1. Uji sitotoksisitas. (1) Metoga agar overlay. Getah J. curcas dan kontrol diserap oleh cakram selulosa, kemudian diletakkan di atas permukaan agar yang menutupi selapis sel Fib L929 yang telah diwarna neutral red. Evaluasi berdasar luas zona dekolorisasi dan zona lisis yang terbentuk setelah 24 jam. (2) Assay MTT. Getah J. curcas dalam medium diberikan pada kultur set Fib L929 cell line dan sel primer fibroblast gingiva manusia yang tumbuh dalam mikroplat 96-sumur. Setelah 1-4 hari, dilakukan assay MTT. Evaluasi berdasar perbandingan nilai OD kontrol dan perlakuan. 2. Uji toksisitas akut. Mencit diberi getah J. curcas secara intragastrik sebanyak 1 kali. Dihitung LD5O berdasar jumlah mencit yang mati. Dibandingkan antara kelompok perlakuan dan kontrol dalam hal tanda toksisitas, berat badan selama 2 minggu, pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik organ tubuh. 3. Uji hemolisis. Darah dicampur dengan berbagai konsentrasi getah J. curcas. Evaluasi berdasar pembebasan hemoglobin, dibandingkan OD kelompok perlakuan dengan kontrol positif air, dan kontrol negatif salin. 4. Uji mutagenisitas. Getah J. curcas dikultur dengan bakteri S. typhi dan E. coil mutan. Evaluasi berdasar penghitungan koloni reversi bakteri, dibandingkan kelompok perlakuan, kontrol positif dan kontrol negatif. (3) Efek getah J. curcas terhadap makrofag dan fibroblast 1. Efek getah J. curcas terhadap pembebasan IL-1β. Lima dosis getah J. curcas dimasukkan ke dalam kultur makrofag peritoneum mencit BALB/c, secara bersamaan, sebelum, atau sesudah pemberian LPS. Setelah 1 dan 2 hari, IL-1β dalam supernatan diukur secara ELISA dengan Quantikine IL-1β for mouse kit. 2. Efek getah J. curcas terhadap pembebasan kolagenase oleh fibroblast. Empat dosis getah J. curcas dan IL-1β dimasukkan dalam kultur sel primer fibroblast gingiva manusia. Setelah 1-4 hari kolagenase dalam supematan diukur dengan assay kolagenase. Hasil degradasi kolagen dipisahkan dengan SDS-PAGE. Pita 3/4 αA diukur dengan program komputer Adobe Photo. (4) Efek histopatologik getah J. curcas pada jaringan pulpa dan periapeks. Getah J. curcas dimasukkan ke dalam kavitas gigi monyet. Setelah 3 hari, gigi diproses untuk pembuatan sediaan histologik. Evaluasi berdasar perbandingan pemeriksaan keadaan mikroskopik jaringan pulpa dan peripeks dalam hal inflamasi dan nekrosis, antara kelompok kontrol dan perlakuan. (5) Efek getah J. curcas terhadap jaringan keras gigi. 1. Efek getah J. curcas terhadap kekerasan mikro dentin dan email. Mahkota gigi premolar dibelah 4 longitudinal, lalu ditanam di dalam akrilik dengan 1 permukan tidak tertutup akrilik. Setelah direndam dalam 3 konsentrasi getah J. curcas, permukaan dentin dan email diberi indentasi oleh intan Knoop. Evaluasi berdasar perbandingan KHN kelompok kontrol dan perlakuan. 2. Efek getah J. curcas terhadap kelarutan kalsium dan fosfat. Mahkota gigi premolar utuh dibelah 4 secara longitudinal, lalu direndam dalam 3 konsentrasi getah J. curcas. Setelah 1-3 hari, kalsium dan fosfat yang larut dalam rendaman diukur berturut-turut dengan alat atomic absorption spectrophotometer (AAS) dan spektrofotometer (metoda asam askorbat). Hasil penelitian pH getah J. curcas rata-rata 3,49 ± 0,09 dan perbandingan berat kering/volume basah 15,12 ± 0,31%. (1) Skrining fitokimia: getah J. curcas mengandung golongan senyawa sterol, aglikon flavon, tanin, senyawa pereduksi, glikosida steroid, poliose, dan saponin. (2) Uji toksisitas 1.(1) Sitotoksisitas getah J. curcas pada metoda agar overlay ditemukan zona dekolorisasi indeks 2 dari 5 indeks zona. Tak ada lisis sel, bentuk sel masih jelas. (2) Assay MTT: pads getah J. curcas kadar 0,25% terhadap Fib L929 dan kadar 0,12% terhadap fibroblast gingiva, sel nekrosis. 2.(1) LD50 > 5 g/kg BB, sehingga getah J. curcas dapat diklasifikasi dalam toksik ringan. (2) Tidak ada perbedaan berat badan. (3) Tidak ada perbedaan makroskopik dan mikroskopik organ tubuh yang diperiksa. (4) Terjadi inaktivitas pada hari 1 pada kelompok perlakuan, selanjutnya tidak ada perbedaan. 3. Aktivitas hemolisis getah J. curcas 15% adalah 6,5% dibanding air. Tidak ada hemolisis pada konsentrasi getah J. curcas yang lebih rendah. 4. Tidak ada aktivitas mutagenisitas getah J. curcas. (3) Efek getah J. curcas terhadap makrofag dan fibroblast 1. (1) LPS meningkatkan pembebasan 1L-1β oleh makrofag. (2) Pemberian getah J. curcas menghambat pembebasan 1L-1β oleh makrofag. 2. (1) Makin lama waktu kultur, produksi kolagenase makin banyak. (2) Getah J. curcas menurunkan pembebasan kolagenase oleh fibroblast. (4) Efek histopatologik getah J. curcas terhadap jaringan pulpa dan periapeks (1) Inflamasi dan nekrosis terj adi pads daerah yang terbatas dekat dengan daerah yang kontak dengan getah J. curcas. Di bawahnya terdapat jaringan pulpa normal. (2) Tingkat inflamasi pulpa kelompok perlakuan tidak lebih parah dari kelompok kontrol. (3) Tidak ada radang periapeks pads kelompok kontrol dan perlakuan. (5) Efek getah J. curcas terhadap jaringan keras gigi. 1. Efek getah J. curcas terhadap kekerasan mikro dentin dan email. (1) Kekerasan mikro dentin tidak berbeda bermakna pada 1 dan 2 hari perendaman getah J. curcas antara kelompok kontrol dan perlakuan. Namur lebih kecil setelah 3 hari pada konsentrasi getah 15%. (2) Kekerasan mikro email tidak berbeda antara kelompok kontrol dan perlakuan pada 1 dan 3 hari, Namun lebih kecil setelah 2 hari pada konsentrasi getah J. curcas 15%. 2. Kadar kalsium dan fosfat yang larut meningkat sesuai dengan kenaikan konsentrasi getah J. curcas. Namun lama perendaman tidak berpengaruh secara bermakna terhadap kelarutan kalsium. Kesimpulan (1) Getah J. curcas mengandung sterol, aglikon flavon, tanin, senyawa pereduksi, glikosida steroid, poliose, dan saponin. (2) Tahap 1 evaluasi biologik: getah J. curcas relatif aman pada hewan percobaan berdasar LD50>5 g/kg BB sehingga termasuk dalam klasifkasi toksik ringan; hemolisis 6,5% dibanding air; tidak mutagen; dan sitotoksik dengan nekrosis koagulasi. (3) Uji tahap 2: getah J. curcas cukup efektif dalam menanggulangi pulpalgia, berdasar nekrosis pulpa terbatas, tidak ada kelainan periapeks; kekerasan mikro email dan dentin tidak turun pada 1 hari; menghambat pembebasan IL-1β dan kolagenase. Namun getah melarutkan kalsium dan fosfat. Kesimpulan penelitian: penelitian dapat dilanjutkan ke tahap uji klinik atau tahap 3.

---

Biological Study on the Effects of Jatropha Curcas (Euphorbiaceae) Latex on Dental and Periapical TissuesObjective: The objective of this study was to evaluate the safety level and the effects of J. curcas latex on dental and periapical tissues. The aims in details were (1) to identify the main classes of chemical constituent in J. curcas latex; (2) to evaluate the cytotoxicity of J. curcas latex; (3) to determine the acute toxicity of J. curcas latex after single oral administration on mice; (4) to assess hemolytic activity of J. curcas latex; (5) to evaluate mutagenic activity of J. curcas latex; (6) to evaluate the effect on J. curcas latex of IL-1 il release from macrophages; (7) to evaluate the effect of J. curcas latex on collagenase release from fibroblasts; (8) to assess the histopathological effects of J. curcas latex on monkey dental pulp and periapical tissues; (9) to determine the effects of J. curcas latex to dentin and enamel micro-hardness; (10) to assess the effects of J. curcas latex on dissolving calcium and phosphate. Methods: Research design was experimental and explorative. To standardize the sample, J. curcas latex was collected from Balittro, Bogor in 1997, then the pH and wet volume were measured, the latex was lyophilized, dry weight was measured, and latex was stored at-20°C as sample. Biological evaluation was grouped into (1) phytochemical sreening, (2) toxicity test, (3) effects of J.curcas latex on cell, (4) effects of J.curcas latex on dental pulp and periapical tissues, and (5) effects of J.curcas latex on dental hard tissues, (1). Phytochemical screening: the main classes of chemical constituents of J. curcas latex were analyzed qualitatively from ether, ethyl acetate, and water extracts. (2). Toxicity test 1. Cytotoxicity test. (1) Agar overlay technique. J. curcas latex was imbibed in cellulose discs and put on the surface of agar overlaying a neutral red stained Fib L929 cell monolayer. Evaluation was judged on zone index and lysis index after 24 hours incubation. (2) MT assay. J. curcas latex was added to human gingival fibroblasts and Fib L929 cell culture in 96-well micro-plates. After 1-4 days of incubation, MTT assay was performed. Evaluation was based on comparing the OD values of control and test groups. 2. Acute toxicity. A single dose of J. curcas latex was given to male and female mice, intragastrically. LD50 was determined based on mortality rate. Assessment was also performed on 2 weeks observations of body weight, macroscopic and microscopic examinations of several organs. 3. Hemolysis test. Blood was mixed with several concentrations of J. curcas latex. The result was the extent of hemolysis expressed based on the absorbance of the test samples, negative and positive controls. 4. Mutagenicity test. L curcas latex was added to the S. ryphi and E. coil mutans culture. Assessment was based on bacterial revertant colonies, compare to positive and negative controls. (3) Effects of J.curcas latex on macrophages and fibroblasts 1. Effects of .T. curcas latex on the release of IL-1 β from macrophages. Five doses of J. curcas latex from 75-1200 μg/ml were added into the culture of BALB/c mice peritoneal macrophages, along with, after, or before addition of LPS. Following 1-3 days of incubation, IL-1P presence in supernatant was measured by ELISA using Quantikine ]L-1P for mouse kit. 2. Effects of J. curcas latex on the release of collagenase. Four doses of J. curcas latex from 37.5-300 µg/ml were added to human gingival fibroblasts cell culture. After 1-4 days of incubation, collagenase in the supernatant was assayed with collagen. The degradation products were then separated by SDS-PAGE and the density of 3/4 αA bands was measured semi quantitatively by Adobe Photo computer program. (4) Effects of J.curcas latex on dental pulp and periapical tissues. The latex of J. curcas was brought in contact with dental pulp and sealed. Assessment was based on the presence of inflammation and necrosis in dental pulp and periapical tissues, histopathologically. (5) Effects of J.curcas latex on dental hard tissues 1. Effects of J. curcas latex on dentin and enamel micro-hardness. Intact premolar crowns were cut longitudinally into 4 fragments, followed by embedding of each fragment in acrylats leaving 1 free surface. The fragments were then soaked in 3 concentrations of J. curcas latex from 3.7-15% for 1-3 days. The dentin and enamel micro-hardness were assessed by Knoop hardness measurement. 2. Effects of J. curcas latex on dissolved calcium and phosphate. Intact premolar crowns were cut longitudinally into 4 fragments, followed by soaking the fragments in 3 concentration of J. curcas latex from 3.7-15% for 1-3 days. The dissolved calcium and phosphate were measured according to atomic absorption spectrophotometer and spectrophotometer (ascorbic acid method), respectively. Results: The mean ± SD of J. curcas latex pH was 3.49 ± 0.09. The dry weight/wet volume was 15.12 ± 0.31%. (1). Phytochemical screening: sterols, flavone aglycones, tannins, reducing compounds, sterol glycosides, poliose, and saponins were identified in J. curcas latex. (2) Toxicity test 1. (1) Agar overlay technique. 2-5 mm decoloration zones were observed, indicating that J. curcas latex was cytotoxic. No lysis of cells was observed within the decolorized zone. (2) MTT assay. At 2.5 mg/ml J. curcas latex no living Fib L929 cells were observed, while the same result was shown at 1.2 mg/ml J. curcas latex on human gingival fibroblasts. 2. LD50 was more than 5 g/kg BW, hence dry J. curcas latex may be classified into mildly toxic substance. No significant body weight difference was observed. Macroscopic and microscopic examination on several organs showed no differences between test and control groups. 3. 6,5% hemolytic activity of 15% J. curcas latex compared to water was observed, while no hemolisis was observed with lower concentrations of latex. 4. No mutagenic ativity was observed with J. curcas latex. (3) Effects of J.curcas latex on macrophages and fibroblasts 1. (1) LPS increased the release of IL-1β. (2) J. curcas latex inhibited the release of IL-lβ from macrophages. 2. (1) The longer the duration of incubation, the more collagenase was released. (2) J. curcas latex decreased collagenase release by human gingival fibroblast. (4) Effects of I. curcas latex on dental pulp and periapical tissues. Inflammation and necrosis were observed in a limited area, which was in direct contat with J. curcas latex, underneath was normal pulp. Inflammation in the pulp of test group was not greater than in the control group. No inflammation or necrosis in periapical tissues was observed in all groups. (5) Effects of J. curcas latex on dental hard tissues 1. (1) The micro-hardness of dentin was not lowered after 1 and 2 days treatment, but lower after 3 days at 15% J. curcas latex. (2) The enamel microhardness was not decreased after 1 and 3 days immersion in J. curcas latex, but decreased after 2 days at 15% J. curcas latex. 2. The calcium and phosphate release were increased in accordance to the concentration of J. curcas latex. The duration of treatment did not influence the release of calcium, while it influenced the release of phosphate. Conclusions (1) J. curcas latex contains sterols, flavone aglycones, tannins, reducing compounds, sterol glycosides, poliose, and saponins. (2) Level 1 biological evaluation: J. curcas latex is relatively safe in animals based on LD50>5 g/kg BW, 6,5% hemolysis compared to water, not mutagenic, but cytotoxic with coagulative necrosis. (3) Level 2 biological evaluation: J. curcas latex seems to be effective in relieving pulpal pain. It caused coagulative necrosis in pulp, which was in direct contact with J. curcas latex while the tissue underneath was normal. It did not cause inflammation of periapical tissues, and did not lower the dentin and enamel micro-hardness after 1 day of exposure, but it lowered the microhardness after 3 days. It inhibited IL-1β and collagenase release. It dissolved dental calcium and phosphate."