Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
Latar belakang: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans) merupakan salah satu periodontopatogen yang sangat banyak ditemukan pada periodontitis agresif di mana kerusakan tulang sangat cepat terjadi. Periodontitis tidak akan terjadi tanpa diinisasi melalui invasi bakteri ke dalam sel target untuk berproliferasi di dalamnya. Bakteri A. actinomycetemcomitans memiliki faktor virulensi Omp29 yang memediasi proses invasi tersebut ke dalam sel epitel gingiva. Tujuan: Menganalisis interaksi bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel bone marrow macrophage, preosteoklas dan osteoklas berdasarkan ekspresi gen Omp29 sebagai faktor virulensi bakteri. Metode: Studi in vitro diawali dengan menginfeksikan bakteri A. actinomycetemcomitans ke sel prekursor osteoklas (bone marrow macrophage (BMM) dan preosteoklas) dan osteoklas selama 30 menit dengan multiplicity of infection (MOI) 1:1 dan 1:5. Setelah diinfeksikan, terdapat sebagian sel yang langsung dilakukan lisis dengan TRIzol sedangkan sebagiannya lagi diinkubasi kembali selama 16,5 jam sebelum dilisis oleh TRIzol. Analisis ekspresi relatif gen Omp29 bakteri pada medium pasca infeksi dilakukan pada mesin qPCR dengan menggunakan gen 16SrRNA sebagai housekeeping gene. Hasil: Terdapat penurunan ekspresi relatif gen Omp29 pada bakteri A. actinomycetemcomitans 18 jam pasca infeksi sel BMM, preosteoklas dan osteoklas terhadap kontrol yaitu bakteri 1,5 jam pasca infeksi sel-sel yang sama. Penurunan ekspresi relatif yang sama ditemukan pada perbandingan antara bakteri 18 jam pasca infeksi sel preosteoklas dengan MOI 1:5 terhadap bakteri 18 jam pasca infeksi sel preosteoklas dengan MOI 1:1. Kesimpulan: Interaksi direk antara bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel BMM, preosteoklas dan osteoklas menyebabkan kerusakan atau berkurangnya faktor virulensi Omp29 pada bakteri di mana mekanismenya belum diketahui secara pasti. ......Background: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans) is one of the periodontopathogen involved in periodontitis and it is found in abundance in aggressive periodontitis where rapid bone destruction occur. Periodontitis will not happen if it is not initiated by the invasion of bacteria into the targeted cells so that bacteria can proliferate inside them. A. actinomycetemcomitans has a virulence factor named Omp29 which plays a role in gingival epithelium cell invasion. Objective: To analyze the interaction of A. actinomycetemcomitans and osteoclast precursor (bone marrow macrophage (BMM) and preosteoclast) as well as osteoclast itself through the expression of Omp29 gene as a virulence factor. Methods: In vitro study by infecting A. actinomycetemcomitans to osteoclast precursor and osteoclast that is obtained from mice for 30 minutes in two different multiplicity of infection (MOI) which are 1:1 and 1:5. After that, some of the infected cells are immediately lysed using TRIzol and some are incubated again for about 16,5 hours before being lysed. Relative expression of the Omp29 gene from the post-infection medium is obtained using real-time PCR with 16SrRNA as a housekeeping gene. Results: There is downregulation of the relative expression of Omp29 in A. actinomycetemcomitans 18 hpi of BMM, preosteoclast and osteoclast compared to the control which is A. actinomycetemcomitans 1,5 hpi of the same cells in both MOI 1:1 and 1:5. The same is observed when comparing the relative expression of Omp29 in A. actinomycetemcomitans 18 hpi of preosteoclast in MOI 1:1 with MOI 1:5. Conclusion: Direct interaction of A. actinomycetemcomitans and osteoclast cause destruction or decrease of Omp29 which mechanism is still not known and need further study.

Abstrak :
Latar belakang: Bakteri ggregatibacter actinomycetemcomitans merupakan salah satu penyebab periodontitis. Ia memiliki kemampuan untuk berinteraksi langsung dengan sel-sel imun, termasuk sel osteoklas. Salah satu mekanisme interaksi bakteri AA dengan sel osteoklas adalah melalui ekspresi gen CSF1R pada sel osteoklas. CSF1R adalah reseptor untuk sitokin CSF1, yang berperan dalam regulasi fungsi sel osteoklas. Ekspresi gen CSF1R yang meningkat pada sel osteoklas dapat meningkatkan fungsi resorpsi tulang oleh sel tersebut. Peningkatan ekspresi gen CSF1R pada sel osteoklas akibat interaksi dengan bakteri AA dapat menyebabkan kerusakan tulang yang lebih parah pada penderita periodontitis. Tujuan: Menganalisis ekspresi gen CSF1R pada interaksi bakteri AA dengan sel bone marrow macrophage, preosteoklas, dan osteoklas. Metode: Penelitian eksperimental laboratorium secara in vitro pada sel bone marrow macrophage, preosteoklas dan osteoklas yang dikultur dari BMC mencit C57BL/6 jantan. Hasil: Terjadi peningkatan ekspresi gen CSF1R pada sel preosteoklas dan sel osteoklas pasca infeksi 18 jam dibanding sel pasca infeksi 1,5 jam, pada perlakuan MOI 1:1 maupun MOI 1:5. Lalu pada perlakuan MOI 1:5 dibanding MOI 1:1 terjadi peningkatan ekspresi gen CSF1R pada perlakuan MOI 1:5. Kesimpulan: Diketahui bahwa konsentrasi bakteri AA yang diinfeksikan pada sel osteoklas serta lamanya waktu paparan dapat mempengaruhi internalisasi bakteri AA dan peningkatan ekspresi gen CSF1R. ......Background: Aggregatibacter actinomycetemcomitans is a Gram-negative bacterium that is one of the causes of periodontitis. AA has the ability to interact directly with immune cells, including osteoclasts. One mechanism of Aggregatibacter actinomycetemcomitans interaction with osteoclasts is through the expression of the CSF1R gene in osteoclasts. CSF1R is the receptor for the cytokine CSF1, which plays a role in regulating the function of osteoclasts. Increased expression of the CSF1R gene in osteoclasts can enhance their bone resorption function. Elevated CSF1R gene expression in osteoclasts due to interaction with Aggregatibacter actinomycetemcomitan can lead to more severe bone damage in periodontitis patients. Objecive: To analyze the CSF1R gene expression in the interaction between AA bacteria in bone marrow macrophage cells, preosteoclasts, and osteoclasts. Methods: This study is an in vitro laboratory experimental study on bone marrow macrophage cells, preosteoclast, and osteoclast cells cultured from C57BL/6 BMCs. Results: The results show increase in CSF1R gene expression in preosteoclast and osteoclasts after 18 hours of infection compared to 1,5 hours post-infection, both in the MOI 1:1 and MOI 1:5 treatments. Then, in the MOI 1:5 treatment compared to MOI 1:1, it was found that there is an increase in CSF1R gene expression in the MOI 1:5 treatment. Conclusion: It is known that the concentration of AA infected in osteoclast and the duration of its exposure can affect the internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans and the increased expression of the CSF1R gene.