Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
ABSTRACT
Stem cell therapy has been implemented in Cipto Mangunkusumo General Hospital RSCM, Jakarta. However, technical problems necessitate one to store the already prepared stem cells in a solution which best preserves them, without hampering their viability and functions PDT, until the operation is ready. Thus, this experiment explored the effect of phosphate buffered saline PBS, as a storage medium, on human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells hUCMSCs viability and PDT over 168 hours. The experiment used passage 9 hUC MSCs that are placed into 8 groups 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96 and 168 hours with 4 observations each. After the time of interest elapsed, a sample of the cells were taken to determine their viability and its average value, while the others were seeded at 10,000 cells in a multi-well plate. When the seeded cells reached 70-80% confluence, they were harvested and their PDTs, as well as the average value, were checked using a formula. All the obtained data failed to meet the assumption of normal distribution and/or homogenous spread when Shapiro-Wilks test and Levenes test were used respectively. Thus, Kruskal Wallis test was used. When the time of interests were compared to 0-hour time point, viability starting at 6 hours and PDT starting at 3 hours already showed significant difference P0.05. By considering the FDA recommendation for stem cell therapy and statistical significance for both viability and PDT, it is concluded that hUCMSCs can only be stored for less than 3 hours in PBS for optimal transplantation. Nevertheless, this clinical recommendation is an oversimplification since other potency criteria of stem cells should be assessed for a successful therapeutic transplantation.

---

ABSTRACT
Terapi sel punca sudah diimplementasikan di Rumah Sakit Cipto Mangunkusumo (RSCM), Jakarta. Namun, kendala teknis mendesak kita untuk menyediakan satu medium penyimpanan bagi sel punca yang sudah siap guna. Penyimpanan ini bersifat sementara dan tidak boleh membuat kualitas sel punca rusak. Oleh sebab itu, penelitian ini berupaya untuk menyelidiki kualitas sel punca mesenkimal yang diperoleh dari tali pusar (hUCMSCs)viabilitas dan kemampuan berproliferasi PDTketika ia disimpan di dalam phosphate buffered saline PBS selama 168 jam. Penelitian ini menggunakan hUCMSCs passage 9 yang dibagi menjadi 8 kelompok 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96 dan 168 jam dengan masing-masing 4 observasi. Setelah waktu yang ditentukan lewat, sampel dari sel punca diambil untuk menentukan viabilitas, serta didapatkan nilai rata-ratanya. Juga, 10,000 sel ditanam pada multi-well plate dan mereka dipanen pada saat mereka mencapai konfluensi 70-80% untuk mendapatkan PDT, serta nilai rata-ratanya. Hitungan yang didapat dari viabilitas dan PDT kemudian diperiksa menggunakan uji Shapiro-Wilk dan uji Levene, tetapi mereka gagal memenuhi kondisi distribusi normal dan persebaran data yang homogen. Oleh sebab itu, uji Kruskal-Wallis dipakai dan, ketika hasilnya dibandingkan dengan waktu 0 jam, viabilitas sel pada 6 jam dan PDT sel pada 3 jam sudah menunjukkan perbedaan yang signifikan P0.05. Dengan mempertimbangkan rekomendasi FDA tentang terapi sel punca dan signifikansi statistik untuk viabilitas dan PDT, dapat disimpulkan bahwa hUCMSCs hanya dapat disimpan di dalam PBS kurang dari 3 jam untuk transplantasi yang optimal. Namun, rekomendasi klinis ini merupakan sebuah penyederhanaan karena kriteria potensi dari sel punca yang lain juga perlu dinilai untuk sebuah terapi yang sukses

Abstrak :
Sekretom stem cell dapat menjadi pilihan sebagai terapi adjuvan stroke karena efek neuroprotektif dan neuroregeneratifnya. Efek ini muncul karena faktor parakrin seperti Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) dan Stromal-Cell Derived Factor-1 (SDF-1) yang dapat diinduksi dengan prekondisi hipoksia. Selama ini model uji produk terapi baru untuk stroke belum dapat menggambarkan keadaan sesungguhnya yang mendekati terapi stroke di manusia. Sekretom dari umbilical cord M. fascicularis yang ketersediaannya berlimpah sebagai limbah pembiakan hewan uji vaksin PT Bio Farma, diharapkan dapat menjadi model uji yang baik karena memiliki kemiripan secara genetik dengan manusia. Penelitian ini melakukan optimasi prekondisi hipoksia pada Umbilical Cord MSC (UCMSC) Macaca fascicularis. Isolasi dan kultur UCMSC dilakukan pada medium MEM dengan suplementasi 20% FBS. Karakterisasi fenotipik dilakukan dengan flow-cytometry sementara karakterisasi diferensiasi menggunakan kit kemudian diamati secara mikroskopis. Prekondisi hipoksia 1%, 3% dan 5% dikerjakan dalam inkubator dua gas. Konsentrasi BDNF dan SDF-1 dipantau menggunakan metode ELISA. UCMSC Macaca fascicularis telah berhasil dikultur dan dikarakterisasi dalam hal fenotip dan diferensiasi. Prekondisi hipoksia mampu menginduksi sekresi BDNF hingga 264 pg/mL dan SDF-1 hingga 666 pg/mL. Kesimpulan penelitian ini menunjukkan profil prekondisi hipoksia dengan oksigen 3% dapat menginduksi sekresi BDNF dan SDF-1 yang paling optimal, dibandingkan dengan hipoksia 1% dan 5%. ......Stem cell secretome may offer a promising option as adjuvant therapy for stroke due to its neuroprotective and neuroregenerative effects. These benefits are attributed to paracrine factors like Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF) and Stromal-Cell Derived Factor-1 (SDF-1), which can be enhanced through hypoxic preconditioning. Current testing models for stroke therapies often fail to accurately replicate human stroke conditions. The secretome from the umbilical cord of Macaca fascicularis, a by-product of vaccine test animal breeding at PT Bio Farma, is considered a viable model due to its genetic similarity to humans. This research aims to optimize hypoxia preconditioning in Umbilical Cord MSC (UCMSC) from Macaca fascicularis. UCMSC were isolated and cultured in MEM medium with 20% FBS, and characterized phenotypically by flow cytometry while differentiation characterization using kits was then observed microscopically. Hypoxia preconditioning at 1%, 3%, and 5% oxygen levels was conducted in a two-gas incubator. BDNF and SDF-1 concentrations were measured by ELISA. Results showed that UCMSC could be successfully cultured and characterized, with 3% oxygen hypoxia preconditioning inducing the highest levels of BDNF (264 pg/mL) and SDF-1 (666 pg/mL), compared to 1% and 5% oxygen levels.

Abstrak :
Latar belakang : Kanker payudara merupakan kanker dengan prevalensi tertinggi pada wanita. Di dalam suatu masa tumor, terjadi ketidakseimbangan kurangnya oksigen dengan tinggi nya kebutuhan sel tumor yang terus berproliferasi. Ketika homeostasis dari oksigen terganggu, sel akan mengekspresikan dan menstabilisasi suatu protein yang sangat sensitif terhadap oksigen, bernama Hypoxia Inducible Factor (HIF). HIF2alpha adalah subunit dari keluarga HIFalpha yang dapat mendukung aktivasi dari beberapa gen target seperti VEGF, Oct4, yang dapat mendukung proliferasi, angiogenesis, dan perubahan mekanisme glikolisis pada sel. Berbeda dengan HIF1alpha yang sudah sering diperbincangkan dalam berbagai literatur, peran dan ekspresi dari HIF2alpha ini masih diperdebatkan. HIF2alpha berperan dalam kondisi hipoksia kronik yang terdapat pada jaringan tumor, yang dapat mempertahankan proliferasi dan keganasan sel kanker, bahkan dapat memicu adanya metastasis. Beberapa hipotesis mengatakan bahwa eradikasi dari HIF2a dapat dijadikan target untuk cara penyembuhan dengan menginhibisi sel punca kanker. Metode : Sampel diambil dari sel kanker payudara yang telah dipurifikasi sebelumnya oleh tim riset Wanandi melalui proses pemisahan sel magnetik menjadi sel punca kanker payudara. Sel diinduksi hipoksia dengan durasi yang berbeda-beda (0 jam, 30 menit, 4 jam,6 jam, dan 24 jam). Sel selanjutnya diisolasi untuk mendapatkan RNA, dan dilakukan RT-qPCR serta elektroforesis untuk mengetahui tingkat ekspresi dari HIF2alpha. Hasil : Hasil dari eksperimen ini berbeda dengan studi literatur kami. Setelah dianalisis kuantifikasi relatif dengan gen 18s sebagai housekeeping gen, tingkat ekspresi dari HIF2a mengalami penurunan dibandingkan dengan sebelum diinduksi hipoksia (0 jam). Meningkatnya durasi hipoksia tidak berbanding lurus dengan peningkatan dari HIF2alpha, melainkan menunjukan fluktuasi. Kesimpulan : Ekspresi HIF2alpha pada sel punca kanker payudara CD44+/CD24- menurun setelah diinduksi hipoksia. ......Background: Breast cancer is the cancer with the highest prevalence in women. In a period of a tumor, there is an imbalance lack of oxygen to his high needs tumor cells continue to proliferate. When homeostasis of oxygen is interrupted, the cell will express and stabilize a protein that is highly sensitive to oxygen, called Hypoxia Inducible Factor (HIF). HIF2a is a subunit of HIF family that can support the activation of multiple target genes such as VEGF, Oct4, which can support the proliferation, angiogenesis and glycolysis mechanisms of the cell changes. Unlike the HIF1a that has often been discussed in the literature, the role and expression of HIF2a is still debated. HIF2a said to play a role in chronic hypoxic conditions found in tumor tissue, which can maintain the proliferation and the malignancy of cancer cells, it can even lead to metastasis. Some hypotheses say that the eradication of HIF2a can be targeted for healing way to inhibit cancer stem cells. Methods: Samples were taken from breast cancer cells that had been purified previously by the Wanandi?s research group via magnetic cell separation process into breast cancer stem cells. Cells will be induced hypoxia with different duration (0 hours, 30 minutes, 4 hours, 6 hours, and 24 hours). Cells will be further isolated to obtain RNA, and performed RT-qPCR and electrophoresis to determine the level of expression of HIF2a. Results: The results of this experiment differ from our literature study. Having analyzed the relative quantification of gene 18s as a housekeeping gene, the expression level of HIF2a decreased compared with the prior-induced hypoxia (0 hours). Increasing duration of hypoxia is not directly proportional to the increase of HIF2a, but showed fluctuation. Conclusion : The expression of HIF2alpha in breast cancer stem cell CD44+/CD24- declines after being induced hypoxia.

Abstrak :
The main objective of this book is to provide a comprehensive review on stem cells and their role in tissue regeneration, homeostasis and therapy. In addition, the role of cancer stem cells in cancer initiation, progression and drug resistance are discussed. The cell signaling pathways and microRNA regulating stem cell self-renewal, tissue homeostasis and drug resistance are also mentioned. Overall, these reviews will provide a new understanding of the influence of stem cells in tissue regeneration, disease regulation, therapy and drug resistance in several human diseases.

Abstrak :
It is pointed out that a cancer stem cell is a type within a tumor that possesses the capacity of self-renewal and can give rise to the heterogeneous lineages of cancer cells, which comprise the tumor. It is emphasized that a unique feature of cancer stem cells is that, although conventional chemotherapy kills most cells in a tumor, cancer stem cells remain intact. Vast applications of the following specific stem cells in disease and tissue injury are discussed: embryonic stem cells, human mesenchymal stem cells, cancer stem cells, arterial stem cells, neural stem cells, cardiac stem cells, dental stem cells, limbal stem cells, and hematopoietic stem cells. Because human embryonic stem cells possess the potential to produce unlimited quantities of any human cell type, considerable focus is placed on their therapeutic potential in this volume. These cells are used in tissue engineering, regenerative medicine, pharmacological and toxicological studies, and fundamental studies of cell differentiation. It is pointed out that the formation of embryoid bodies, which are three-dimensional aggregates of embryonic cells, is the initial step in the differentiation of these cells. Therapeutic implications of signalling pathways in cancer stem cells are pointed out. Targeting self-renewal pathways in cancer stem cells are also included. Application of mesenchymal stem cells for treating ischemic brain injury is explained. Neural stem cells proliferation into the surrounding area of the traumatic brain injury is explained.

Abstrak :
Pendahuluan: Osteoartritis (OA) adalah penyakit sendi degeneratif yang ditandai oleh kerusakan tulang rawan. Kemampuan regenerasi tulang rawan artikular yang terbatas menimbulkan tantangan dalam pengobatan. Eksosom sel punca mesenkimal (SPM) telah menunjukkan potensi regenerasi struktur tulang rawan pada studi-studi in vivo pada hewan kecil sebelumnya. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan efektivitas injeksi intra-artikular eksosom SPM dari jaringan adiposa dan hyaluronic acid (HA) terhadap regenerasi tulang rawan model osteoartritis domba Metode: Studi in vivo melibatkan 18 domba jantan yang diinduksi OA melalui menisektomi. Domba kemudian dirandomisasi dan dibagi menjadi tiga kelompok perlakuan: Kelompok 1 (eksosom SPM adiposa + HA); Kelompok 2 (eksosom SPM adiposa); Kelompok 3 (HA). Pemeriksaan struktur dan mikrostruktur dilakukan 6 minggu pasca perlakuan. Penilaian mikroskopik menggunakan gambaran histologi dengan skor pineda, regenerasi tulang rawan dinilai dari pemeriksaan histokimia and immunohistokimia, dan pemeriksaan mikrotopografi dinilai dengan scanning electron microscope (SEM) Hasil dan Diskusi: Regenerasi tulang rawan pada kelompok kombinasi eksosom SPM adiposa + HA memiliki area kartilago hialin yang lebih luas dibandingkan dengan eksosom SPM adiposa atau HA saja (40,38 ± 9,35 % vs 34,93 ± 2,32 vs 31,08 ± 3,47; p = 0,034) dan area fibrokartilago yang lebih sempit dibandingkan dengan eksosom SPM adiposa atau HA saja (13,06 ± 2,21 vs 18,67 ± 3,13 vs 28,14 ± 3,67; p = 0,037). Gambaran mikrotopografi didapatkan permukaan jaringan jauh lebih homogen dan memiliki permukaan yang lebih halus pada kelompok kombinasi eksosom SPM adiposa + HA dibandingkan kelompok eksosom SPM adiposa HA saja Kesimpulan: Pada OA sendi lutut model domba yang mendapatkan injeksi kombinasi eksosom SPM jaringan adiposa + HA memiliki regenerasi tulang rawan yang lebih baik dibandingkan dengan injeksi eksosom SPM jaringan adiposa atau HA saja ......Introduction: Osteoarthritis (OA) is a degenerative joint disease characterized by cartilage damage. The limited regenerative capability of articular cartilage poses a therapeutic challenge. Mesenchymal stem cell (MSC) exosomes have shown potential in regenerating cartilage structure in previous in vivo studies on small animals. This study aims to compare the effectiveness of intra-articular injections of adipose-derived MSC exosomes and hyaluronic acid (HA) on cartilage regeneration in a sheep osteoarthritis model. Methods: This in vivo study involved 18 male sheep induced with OA through meniscectomy. The sheep were randomized and divided into three intervention groups: Group 1 (adipose MSC exosomes + HA), Group 2 (adipose MSC exosomes), and Group 3 (HA). Structural and microstructural assessments were conducted 6 weeks post-intervention. Microscopic evaluation using histological scoring with the Pineda score, cartilage regeneration assessment through histochemical and immunohistochemical examinations, and microtopographic examination using a scanning electron microscope (SEM) were performed. Results and Discussion: Cartilage regeneration in the combination group of adipose MSC exosomes + HA exhibited a larger area of hyaline cartilage compared to adipose MSC exosomes or HA alone (40.38 ± 9.35% vs. 34.93 ± 2.32% vs. 31.08 ± 3.47%; p = 0.034) and a smaller area of fibrocartilage compared to adipose MSC exosomes or HA alone (13.06 ± 2.21% vs. 18.67 ± 3.13% vs. 28.14 ± 3.67%; p = 0.037). Microtopographic examination showed a much more homogeneous and smoother cartilage surface in the combination group of adipose MSC exosomes + HA compared to the adipose MSC exosomes or HA groups alone. Conclusion: In a sheep knee OA model, intra-articular injection of a combination of adipose-derived MSC exosomes + HA can enhance cartilage regeneration compared to injections of adipose-derived MSC exosomes or HA alone.

Abstrak :
Perkapuran lutut (Osteoartritis Lutut / OA Lutut) merupakan penyakit peradangan pada sendi lutut progresif yang paling sering ditemui. Hingga saat ini, terapi OA lutut yang ada bersifat simtomatik dan belum ada terapi yang terbukti dapat meningkatkan regenerasi tulang rawan. Injeksi intra-artikular (IA) sel punca mesenkimal (SPM) disinyalir dapat meningkatkan regenerasi tulang rawan melalui efek parakrin dengan perantara mikro RNA (miRNA). Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi efek terapi eksosom SPM adiposa pada OA serta peran miRNA. Penelitian ini merupakan studi in-vitro dan in-vivo yang pertama bertujuan untuk mengisolasi, karakterisasi serta evaluasi kandungan miRNA kondrogenesis pada eksosom SPM adiposa, sedangkan yang kedua bertujuan untuk mengevaluasi efek injeksi eksosom serta kombinasi asam hyaluronat (HA) pada model domba OA. Pada tahap in-vitro, studi ini telah berhasil mengisolasi eksosom SPM adiposa dengan karakter yang sesuai dengan ketentuan Minimal Information for Studies of Extra-Cellular Vesicles (MISEV) 2018, serta menemukan 3 miRNA (miR-140-3p, miR-27b-3p, miR-23a-3p) yang mengalami peningkatan ekspresi, serta 3 miRNA (miR485-5p, miR-218-5p, miR-31-5p) yang mengalami penurunan ekspresi pada injeksi eksosom SPM adiposa di jaringan. Secara in-vivo, ditemukan perbaikan klinis dengan penurunan skor Clinical Lameness Score (CLS), makroskopis dan mikroskopis dengan skor OARSI yang bermakna pada model domba OA setelah 3x pemberian eksosom SPM. Pada evaluasi lebih lanjut, ditemukan pemberian kombinasi eksosom dan HA memberikan efek regenerasi tulang rawan paling optimal, terlihat dari perbaikan skor klinis pada bulan kedua, mikroskopis dan makroskopis pada sisi tibia dibandingkan kelompok injeksi HA. Peningkatan regenerasi tulang rawan ini diperantarai oleh peningkatan ekspresi miR-140-3p, miR-27b-3p, miR-23a-3p dan penurunan ekspresi miR-485-5p, miR-218-5p, miR-31-5p melalui jalur proliferasi sel dan anti-apoptosis. ......Knee osteoarthritis (Knee OA) is the most common inflammatory disease of the knee joint and is progressive in nature. Currently, existing knee OA therapies are symptomatic, and there is no proven therapy that can enhance cartilage regeneration. Mesenchymal stem cell (MSC) exosome injections are believed to enhance cartilage regeneration through paracrine effects mediated by microRNAs (miRNAs). This study aims to evaluate the effects of adipose mesenchymal stem cell (MSC) exosome therapy on OA and the role of miRNAs. This research consists of two parts: an in vitro and in vivo study. The first part aims to isolate, characterize, and evaluate the chondrogenic miRNA content of adipose MSC exosomes, while the second part aims to evaluate the effects of exosome injections and hyaluronic acid (HA) combination therapy in an OA sheep model. In the in vitro phase, adipose MSC exosomes were successfully isolated with characteristics conforming to the MISEV 2018 guidelines. Three miRNAs (miR 140-3p, 27b-3p, 23a3p) showed increased expression, while three miRNAs (miR 485-5p, 218-5p, 31-5p) showed decreased expression after adipose MSC exosome injections into the tissue. In the second phase, clinical improvement was observed with a decrease in Clinical Lameness Score (CLS) and significant macroscopic and microscopic improvements with OARSI scores in the OA sheep model after three administrations of adipose MSC exosomes. In the third phase, the combination of exosomes and HA therapy provided the most optimal cartilage regeneration effect, as evidenced by clinical, microscopic, and macroscopic improvements compared to the HA injection group. The combination of adipose MSC exosome injections 3 times and HA injections 2 times intra-articularly in the OA sheep model significantly demonstrated the best clinical, macroscopic, and microscopic outcomes within 6 weeks, mediated by chondrogenic miRNAs through cell proliferation and anti-apoptosis pathways.

Abstrak :
Kanker telah menjadi salah satu masalah kesehatan utama di seluruh dunia dan menyebabkan banyak kematian. Kanker dapat ditemukan di banyak organ, dan kanker payudara adalah salah satu bentuk kanker yang paling banyak ditemukan. Sel punca kanker merupakan salah satu terobosan di bidang ini, dan dianggap sebagai penyebab perkembangan dan invasi kanker. Sel punca kanker memiliki sifat pluripotensi yang mirip seperti sel punca embrio. Seperti pada sel punca Embrio, pemeliharaan pluripotensi dan ekspresi gen pluripoten mereka ditemukan dalam kondisi hipoksia. Sel punca kanker payudara CD24-/ CD44 dipelajari untuk mengamati ekspresi gen pluripotensi di kondisi hipoksia. Salah satu gen pluripotensi yang diamati adalah KLF4, yang merupakan pengatur utama gen pluripoten lainnya di jaringan pluripotensi inti NANOG, SOX2, Oct4. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pluripotensi CD24-/ CD44 melalui aktivitas KLF4 selama hipoksia. Sel punca kanker payudara CD24-/ CD44 dipaparkan kondisi hipoksia 1 O2, 5 CO2 dan kemudian RNA diisolasi untuk digunakan untuk mendeteksi gen KLF4 menggunakan qRT-PCR. Analisis ekspresi gen diperoleh dari perhitungan Ct dari qRT-PCR dengan menggunakan metode Livak. Percobaan kami menunjukkan bahwa ekspresi gen KLF4 diturunkan dalam semua sampel yang terpapar hipoksia 0.5h, 4h, 6h, 24h . Kesimpulannya, ekspresi KLF4 pada sel kanker payudara CD24-/ CD44 yang digunakan dalam penelitian ini menurun mengikuti lamanya paparan hipoksia. ......Cancer has become one major health problem worldwide and cause so many death. Cancer can be found in many organ with breast cancer as one of the most commonly found form of cancer. Cancer stem cell is one breakthrough fInding that thought to be the cause of cancer progression and invasion. Cancer stem cells suggested to have same pluripotency property as in Embryonic Stem cells. As in Embryonic Stem cells, the maintenance of it rsquo s pluripotency and expression of their pluripotent gene are found in hypoxic condition. Breast cancer stem cells CD24 CD44 are studied to observe their expression of pluripotency gene under hypoxia condition. Such one of the pluripotency gene to be observed is KLF4, which role is as the master regulator of other pluripotent gene in core pluripotency network NANOG, SOX2, OCT4. Therefore, this experiment is aimed to investigate CD24 CD44 pluripotency through KLF4 activity during hypoxia. Breast cancer stem cells CD44 CD24 exposed to hypoxic condition 1 O2, 5 CO2 and then the RNA isolated to be used for KLF4 gene detection using one step qRT PCR. Gene expression analysis obtained from Ct calculation from qRT PCR using Livak Method. From the experiment we found that the KLF4 gene expression was downregulated in all the sample undergo hypoxia 0.5h, 4h, 6h, 24h . In conclusion, the KLF4 expression in breast cancer cells CD24 CD44 that was used in this study was decreasing following the length of hypoxia exposure.

Abstrak :
Terapi kanker payudara dirasa belum efektif karena tidak mengeliminasi sel punca kanker. Maka sedang dikembangkan suatu terapi dengan sel punca kanker payudara sebagai target. Untuk mencapai hal tersebut, dipelajari sifat sel punca kanker payudara dengan metode in vitro. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan kondisi kultur yang baik untuk mempertahankan pluripotensi sel punca kanker payudara. Sel dikultur dalam berbagai medium dengan penambahan matrigel, kemudian diukur sifat pluripotensinya. Sifat pluripotensi sel punca kanker payudara diukur dari jumlah penanda permukaan sel punca kanker payudara dengan metode spektrofluorometri dan dari level ekspresi gen SOX2 sel punca kanker menggunakan metode real-time RT-PCR. Level ekspresi gen dinormalisasi mengunakan PUM1 sebagai kontrol dalam agar pengukuran lebih akurat. Hasilnya menunjukkan bahwa jumlah penanda permukaan tertinggi terdapat pada sel yang ditanam di DMEM/F12 dengan matrigel, kemudian DMEM high glucose dengan matrigel dan conditioned medium (CM) dengan matrigel. Pada pengukuran menggunakan real-time RT-PCR menunjukkan bahwa ekspresi SOX2 pada sel yang dikultur dalam DMEM/F12 dengan matrigel dan DMEM high glucose dengan matrigel meningkat 19,97 kali dan 1,49 kali. Sedangkan pada CM dengan matrigel menurun 0,25 kali. Kami menyimpulkan bahwa kombinasi DMEM/F12 dengan matrigel merupakan kondisi yang paling optimum dalam mempertahankan pluripotensi sel punca kanker payudara.

---

Current breast cancer therapies are considered inadequate in the effort to cure breast cancer patients because the breast cancer stem cells are not eliminated. Therefore, a new therapy with cancer stem cell as the target is currently being developed. In vitro methods were used to understand the breast cancer stem cell characteristics. This study aimed to find a good culture condition for breast cancer stem cells to be able to maintain the pluripotency. Cells were cultured in various media with the addition of matrigel and their pluripotency were measured. Pluripotency of breast cancer stem cells was measured by counting the amount of surface marker using spectrofluorometri and by measuring the expression level of SOX2 with real-time RT-PCR. The expression level was normalized using PUM1 as internal control, as the requirement of real-time RT-PCR technique. Results showed that cells in DMEM/F12 with matrigel have the highest amount of surface markers, followed by DMEM high glucose with matrigel and conditioned medium with matrigel. The measurement using real-time RT-PCR showed that the SOX2 expression in DMEM/F12 with matrigel as well as in DMEM high glucose with matrigel increased 19,97 and 1,49 times, respectively, whereas in conditioned medium with matrigel decreased 0,25 times. In conclusion, the combination of DMEM/F12 with matrigel is the best condition to maintain the pluripotency of breast cancer stem cells.

Abstrak :
This book describes the nuclear reprogramming, chronicling how the field has developed over the last 50-60 years.