Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"ABSTRAKNama : Elvira YunitaProgram Studi : Program Magister Ilmu BiomedikJudul : Efek In Vitro Andrografolida terhadap Apoptosis Jalur Intrinsik pada Sel Punca Kanker Payudara Manusia yang Dipaparkan Rotenon: Tinjauan Ekspresi Caspase-9, Caspase-3 dan Survivin. Latar belakang: Andrografolida ANDRO merupakan senyawa bioaktif utama yang berasal dari sambiloto, Andrographis paniculata. Penelitian in silico yang telah dilakukan menunjukan ANDRO mempengaruhi apoptosis intrinsik dengan berinteraksi dengan survivin, caspase-9 dan caspase-3. Penelitian lain menunjukkan bahwa Breast Cancer Stem Cell BCSC memiliki survival rate yang lebih tinggi setelah dipaparkan dengan rotenon jika dibandingkan dengan non-BCSC. Oleh karena itu penelitian ini bertujuan untuk menganalisis apoptosis jalur intrinsik pada BCSC yang telah dipaparkan rotenon dan ANDRO.Metode: BCSC dipaparkan dengan 50 ?M rotenon selama 6 jam dan kemudian sel dipaparkan dengan ANDRO 0.075 mM, 0.15 mM, 0.3 mM dan 0.6 mM selama 24 jam. RNA sel diisolasi dan diikuti dengan pengukuran ekspresi mRNA caspase-9 dan 3 dengan qRT-PCR. Protein sel akan digunakan untuk pengukuran ekspresi protein survivin total dan survivin terfosforilasi. Selain itu, Apoptosis sel juga diukur dengan flowcytomety.Hasil: Perlakuan dengan rotenon dan ANDRO dapat meningkatkan ekspresi mRNA caspase-9 dan caspase-3 yang juga disertai dengan penurunan viabilitas. Paparan ANDRO dengan konsentrasi rendah hingga 0.015 mM pada BCSC yang telah diberikan rotenon dapat menurunkan ekspresi mRNA survivin. Dosis yang lebih tinggi dapat meningkatkan ekspresi mRNA survivin. Ekspresi protein survivin mengalami peningkatan yang disertai dengan penurunan rasio survivin yang teraktivasi. Selain itu, persentase apoptosis setelah paparan rotenon dan ANDRO hingga 0.3 mM ANDRO juga mengalami peningkatan seiring dengan bertambahnya konsentrasi ANDRO yang dipaparkan dose dependent manner .Kesimpulan: Paparan rotenon dan ANDRO dapat menginduksi kematian sel melalui apoptosis jalur intrinsik pada BCSC. Selain itu, ANDRO juga diusulkan sebagai senyawa yang potensial menjadi agen terapi pendamping bagi pasien-pasien yang menjalani kemoterapi maupun radioterapi.

---

ABSTRACTABSTRACT Name Elvira YunitaStudy Program Biomedical ScienceTitle In Vitro Effect of Andrographolide on the intrinsic pathway of apoptosis in rotenone induced human breast cancer stem cells Focus on caspase 9, caspase 3 and survivin expression Background Andrographolide ANDRO is an active compound of Andrographis paniculata, has been suggested to have an anti cancer property. Our in silico study has shown that ANDRO could interact with survivin, caspase 9 and caspase 3 which influence the intrinsic apoptotic pathway. We have also demonstrated that human breast cancer stem cells BCSCs could survive better than their counterpart non BCSCs after rotenone treatment. In this study, we aimed to investigate whether andrographolide could induced apoptotic of rotenone induced BCSCs.Method Human BCSCs ALDH cells were first induced by 50 M rotenone for 6 hours and treated with 0.075 mM, 0.15 mM, 0.3 mM dan 0.6 mM of ANDRO for 24 hours. Total RNA from the cells was isolated, followed by determination of survivin, caspase 9 and caspase 3 m RNA expression level using Real Time RT PCR technique. Protein from the cells used to examine expression of survivin and phosphorylated survivin. Besides, examining of apoptotic cell also measured by flowcytometry.Result Treatment of rotenone and ANDRO drastically increase caspase 9 and caspase 3 expression, leading to the decrease of cell viability. Low concentration of ANDRO treatment until 0.15 mM could supress survivin expression, but gradually increased higher than the control in line with the increasing of ANDRO concentration. Survivin protein expression was increased following by decreasing ratio of activated survivin. Besides, percentage of apoptosis after rotenone and ANDRO treatment until 0.3 mM of ANDRO treatment also increased in line with increasing ANDRO concentration dose dependent manner .Conclusion Rotenone and ANDRO treatment could induced apoptotic intrinsic in BCSCs. Thus, we propose that andrographolide as potential compound that could be used as a novel co chemoradiation therapy and radiotherapy targeted to BCSCs."

"Latar belakang: Kanker payudara merupakan jenis kanker terbanyak dan mematikan di dunia. Di antara terapi yang ada, kemoterapi menggunakan doksorubisin menjadi salah satu terapi yang digunakan pada kasus kanker payudara. Doksorubisin memiliki sifat antikanker, yakni dapat memicu apoptosis pada sel kanker. Namun doksorubisin memiliki sifat toksisitas yang tinggi, yakni mengganggu sistem metabolisme tubuh hingga kardiotoksisitas. Di sisi lain, andrografolida yang merupakan salah satu bahan alam, memiliki sifat antikanker pula dengan menekan proliferasi dan memicu apoptosis sel kanker. Pada penelitian ini dilakukan kombinasi andrografolida dan doksorubisin untuk mengamati peran kombinasi ini dalam menurunkan progrsifitas kanker payudara yang ada pada tikus yang diinduksi 7,12-dimetilbenz(a)antrasen (DMBA).Metode: Penelitian eksperimental ini menggunakan tikus Spargue-Dawley yang diinduksi DMBA untuk menginduksi kanker pada payudara tikus. Setelah terbentuk nodul tumor sebesar ~5 cm3, dilakukan terapi dengan andrografolida, doksorubisin, atau kombinasi keduanya. Terapi dilakukan selama 28 hari atau sampai volume tumor mencapai ~2 cm3. Selama terapi, tikus ditimbang berat badannya dan volume tumornya diukur dengan jangka sorong. Setelah mencapai akhir terapi, tikus dinekropsi dan tumor diambil. Tumor kemudian dianalisis histopatologinya dan kadar ekspresi cleaved caspase-3 dengan uji western blot.Hasil: Berat badan tikus meningkat ketika tikus diterapi dengan kombinasi andrografolida dan doksorubisin (p < 0,5). Volume tumor ditemukan menurun pada semua kelompok terapi (p < 0,01). Kombinasi derajat histopatologi ditemukan menurun pada kelompok kombinasi. Jumlah sel mast dan ekspresi cleaved caspase-3 meningkat pada semua kelompok terapi.Kesimpulan: Kombinasi andrografolida dan doksorubisin berhasil menekan progresivitas kanker payudara tikus

---

Introduction: Breast cancer is the most common and deadly type of cancer in the world. Among the existing therapies, chemotherapy using doxorubicin is one of the therapies used in cases of breast cancer. Doxorubicin has anticancer properties, which can trigger apoptosis in cancer cells. However, doxorubicin has high toxicity, from disrupt metabolisms and cardiotoxicity. On the other hand, andrographolide, which is a natural ingredient, also has anticancer properties by suppressing proliferation and triggering apoptosis of cancer cells. In this study, a combination of andrographolide and doxorubicin was carried out to observe the role of this combination in reducing the progression of mammary cancer in 7,12-dimethylbenz(a)anthracene (DMBA) induced rats.

Methods: This experimental study used Spargue-Dawley rats which given DMBA to induce mammary cancer in rat. After the formation of a tumor nodule of ~5 cm3, treatment was carried out with andrographolide, doxorubicin, or a combination of both. Therapy was carried out for 28 days or until the tumor volume reached ~2 cm3. During therapy, the rats were weighed and the tumor volume was measured with a caliper. After reaching the end of therapy, rat were necropsied and tumors removed. Tumors were then analyzed histopathologically and levels of cleaved caspase-3 expression was measured by western blot test.

Results: Rats' body weight increased when rats were treated with the combination of andrographolide and doxorubicin (p < 0.05). Tumor volume was found to be decreased in all treatment groups (p < 0.01). The combination of histopatological grades was found to be decreased in the combination group. Mast cell count and cleaved caspase-3 expression increased in all treatment groups.

Conclusion: The combination of andrographolide and doxorubicin succeeded in suppressing the progression of rat breast cancer"