Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Microbial protease and cellulase are in high demand by different industries due to their minimal cost and availability. This study was aimed to maximize the production of protease and cellulase using two bacteria, Corynebacterium alkanolyticum ATH3 and Bacillus licheniformis CBH7, isolated from fish gut. This study demonstrated the effect of different culture parameters in protease and cellulase production using two different bacterial strains. Results of this study clearly indicated the importance of different parameters such as moisture content, pH, incubation temperature, incubation period, inoculum size, carbon sources and nitrogen sources in enzyme production. The most critical parameters affecting the enzymes production were pH, temperature, carbon and nitrogen sources. Further investigations are required to enhance the enzymes production using genetic engineering."

"ABSTRAKXanthomonas oryzaepv. oryzae (Xoo) menyebabkan hawar daun bakteri (HDB) pada padi (Oryza sativaL.), yangmerupakan penyakit utama dan menjadi pembatas bagi produksi tanaman pokok di banyak negara di dunia. IsolasiXoodilakukan dari daun padi yang terserang hawar daun bakteri. Identifikasi X. oryzae pv. oryzae dilakukan berdasarkanpada gejala yang ditimbulkannya, patogenisitas, karaktermorfologi, fisiologi, dan genetik biakan bakteri yang diisolasidari tanaman padi yang terinfeksi Xoo. Sebanyak 50 isolat yang didugaXoo telah berhasil diisolasi. Bakteri tersebutbersifat aerobik, berbentuk batang, dan tergolong Gram negatif. Isolat-isolat tersebut diuji hipersensitivitasnya padatanaman tembakau dan patogenisitasnya pada padi. Kelima puluh isolat bakteri tersebut mampu menginduksi reaksihipersensitif pada tanaman tembakau dan menyebabkan gejala sakit pada tanaman padi dengan perkembangan gejalayang berbeda. Hasil uji fisiologi, reaksi hipersensitivitasdan patogenisitas, tiga isolat bakteri yang diduga kuat Xooyaitu STG21, STG42, dan STG46 menunjukkan bahwa bakteri tersebut tidak membentuk indol, tidak menghasilkanpigmen flouresens, menghidrolisis kasein, memiliki aktivitas enzim katalase, tetapi tidak memiliki aktivitas enzimoksidase. Hasil parsial sekuensing gen penyandi 16S rRNA dari STG21 dan STG42 menunjukkan homologi dengan X.oryzae pv oryzae masing-masing sebesar 80% dan 82%,sedangkan STG46 menunjukkan homologi dengan X.campestris sebesar 84%. Mutagenesis dengan transposon Mini-Tn5 pada STG21 menghasilkan salah mutan (M5) yangtidak dapat menginduksi reaksi hipersensitif pada tanaman tembakau dan berkurang patogenisitasnya pada padi.Panjang gejala HDB pada padi yang ditimbulkan mutan M5 berkurang sebesar 80%.

---

AbstractX. oryzae pv. oryzae (Xoo) causes bacterial leaf blight (BLB) of rice (Oryza sativa L.), a major disease that constrains production of the staple crop in many countries of the world. Identification of X.oryzae pv. oryzae (Xoo) was conducted based on the disease symptoms, pathogenicity, morphological, physiological,and genetic characteristics of bacterial cultures isolated from the infected plants. Fifty bacterial isolates predicted as Xoohave been successfully isolated. They are aerobic, rod shaped, and Gram negative bacteria. The isolates were evaluatedfor their hypersensitivity in tobacco andpathogenicity in rice plant. Fifty isolates induced hypersensitive reaction intobacco and showed pathogenicity symptom in rice in different length. Based on physiological test, hypersensitivity andpathogenicity reactions, three bacterial isolates strongly predicted asXoo, i.e. STG21, STG42, and STG46, were nonindole formation, non pigment fluorescent, hydrolyzed casein, catalase activity positive, but negative oxidase. Partialsequencing of 16S rRNA genes of STG21 and STG42 showed 80% and 82% homology with X. oryzae, respectively,while STG46 showed 84% homology withX. campestris. Mini-Tn5 transposon mutagenesis of STG21 generated one ofthe mutants (M5) lossed it?s ability to induce hypersensitive reaction in tobacco plant and deficient in pathogenicity onrice. The lesion length of rice leaf causedby the mutant M5 decreased up to 80%. "

"Tujuan Menunjukkan adanya A. anitratus pada isolat klinik (darah) yang berasal dari pasien rawat di rumah sakit di Jakarta selama periode 2002-2008 dan pola sensitivitas mikroorganisme ini terhadap antibiotika. Metode Penelitian ini merupakan penelitian retrospektif dari semua spesimen darah yang masuk ke laboratorium Mikrobiologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia (LMK-FKUI) dari tahun 2002-2008. Kultur dan pemeriksaan kepekaan terhadap antibiotik dilakukan berdasarkan praktek standar di LMK-FKUI dan Clinical Laboratory Standard Institute pada tahun yang bersangkutan. Data dikumpulkan dengan menggunakan program WHO-NET 5.4. Semua mikroorganisme Gram negative yang diisolasi dari spesimen darah ditabulasi juga termasuk dengan uji kepekaan A. anitratus terhadap antibiotik. Selain itu juga dilakukan analisis terhadap asal spesimen atau dari institusi mana spesimen tersebut berasal. Hasil A. anitratus merupakan bakteri Gram negatif yang paling banyak diisolasi selama tujuh tahun sejak 2002 sampai 2008 dari spesimen darah, dan selalu ditemukan setiap tahunnya. Hampir 50% bakteri yang diisolasi terdiri dari bakteri tersebut dan Pseudomonas aeruginosa, dan keduanya adalah bakteri lingkungan. Pemeriksaan kepekaan bakteri A. anitratus terhadap antibiotik menunjukkan adanya resistensi terhadap beberapa antibiotik yang diuji. Evaluasi asal spesimen darah menunjukan sebagai berikut: 88 spesimen (74%) berasal dari Rumah Sakit pemerintah, 18 spesimen (15%) dari Rumah Sakit swasta, 3 spesimen (3%) dari pasien praktek dokter dan 10 spesimen (8%) tidak diketahui asalnya. Kesimpulan Ditemukan A.anitratus setiap tahun sejak 2002 sampai 2008 dari spesimen darah dari pasien rawat inap di beberapa Rumah Sakit di Jakarta. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mencari faktor resiko bakteremia A. anitratus agar dapat mengurangi kemungkinan terjadinya infeksi rumah sakit. Selain itu sangat dianjurkan untuk melanjutkan sampai tahap genotyping untuk menentukan hubungan antara strain yang ada di Rumah Sakit dengan strain yang diisolasi dari pasien.

---

AbstractAim To report the presence of environmental microorganisms, A. anitratus, in blood of hospitalized patients in Jakarta from 2002 to 2008 and their susceptibility to antibiotics. Methods A Retrospective study w as performed on all blood specimens that were received in Clinical Microbiology Laboratory (CML) Faculty of Medicine University of Indonesia during 2002-2008. Culture and antimicrobialsusceptibility examination were carried out according to up to date standard practice in CML and Clinical Laboratory Standard Institute, recpectively. Data was collected by WHONET 5.4 program. All Gram-negative microorganisms that were isolated from blood specimens were tabulated, and so the antibiotics susceptibility of A. anitratus. The origin of the specimens in term of institutions where the specimens came from was also analyzed. Results In a 7 year period up to 2008, A. anitratus was found in blood specimens, and these invironmental bacteria were in fact the most predominant isolated Gram negative microorganisms. Together with another environmental microorganism, Pseudomonas aeruginosa, it composed nearly 50%. Antimicrobial susceptibility test of this microorganism showed some degree of resistance to all tested antibiotics. The origin of those blood specimens which yielded A. anitratus were mainly from government-owned hospitals, that was 88 specimens (74%), followed by private hospitals (18 specimens, 15%), individuals (3 specimens, 3%), and unknown source (10 specimens, 8%). Conclusion Persistent occurrence of A. anitratus in blood specimens of hospitalized patients in hospitals in Jakarta was observed. In the near future, a study to fi nd risk factors for the acquisition of A. anitratus bacteremia is needed to reduce potential hospital associated infection. Moreover, genotyping is advised in order to determine the relationship of hospital and patient derived strains."

"Kebutuhan akan industri mikro semakin meningkat setiap tahunnya sehingga membutuhkan pengembangan dalam teknologi fabrikasinya,dengan biomachining menjadi salah satu alternatif yang low cost dan ramah lingkungan. Oksigen sangat berpengaruh terhadap metabolisme dari bakteri Acidithiobacillus ferrooxidans sebagai cutting tool Biomachining. Pengaruhnya terlihat dari adanya perbedaan nilai material removal rate dalam setiap komposisi oksigen di setiap ketinggian penempatan sampel. Dengan demikian penelitian ini dilakukan untuk melihat signifikansi pengaruh tersebut dengan menyuplai udara dengan oksigen di dalamnya ke dalam proses dan melakukan karakterisasi terhadap proses biomachining dengan dan tanpa penambahan udara untuk melihat perbandingan pengaruhnya. Percobaan dilakukan dengan tiga ketinggian benda kerja yang berbeda dengan temperatur ruangan 23-25°C. Hasil penelitian menunjukkan adanya pengaruh penambahan udara terhadap nilai MRR dengan kenaikan sebesar 350-400%. Selain itu ditemukan bahwa perbedaan ketinggian tidak memberikan pengaruh signifikan terhadap perbedaan nilai MRR. Nilai Ra yang terukur dalam percobaan dengan penambahan udara memiliki nilai yang lebih tinggi dari nilai Ra tanpa penambahan udara dengan kecenderungan yang menurun seiring bertambahnya waktu pemesinan.

---

Needs of micro product industry is increasing every year so the fabrication technology will need to be increased too with biomachining is one of the alternative that is low cost and environtmentally friendly. Oxygen has a big effect for metabolism of Acidithiobacillus ferrooxidans as biomachining cutting tool. The effect is seen in the difference value of Material Removal Rate in the difference composition of oxygen within the height of work piece's placement.

So this research is done to see how significant that effect by supplying air, with oxygen as its composition, to the process and do the characterization of biomachining process with and without the added air to see the comparison of the effect. The experiment is done with three different heights of work piece's placement and in the room temperature of 23-25°C.

The result shows that there is an effect of adding air to the value of material removal rate with the rise of 350- 400%. The difference of the height of work piece's effect has shown unsignificant effect to the performance of the bacteria. The measured Ra number of added air biomachining has a higher value than the Ra number of non added air with the trend of decreasing along with the increasing of machining time."

"Biomachining merupakan proses alternatif dalam fabrikasi mikro yang tergolong ramah lingkungan karena menggunakan bakteri sebagai cutting tool. Proses biomachining menghasilkan kualitas permukaan yang lebih baik karena tidak menghasilkan panas pada permukaan benda kerja dan berpotensi menghasilkan produk dengan skala mikro yang lebih kompleks. Dalam penelitian ini, proses biomachining mulai dikembangkan variasi teknologi pemakanan, yang bertujuan untuk membuktikan seberapa besar pengaruh pemberian potensial listrik DC terhadap kinerja bakteri Acidithiobacillus ferrooxidans NBRC 14262 yang bisa dilihat dari nilai material removal rate (MRR) dan dibandingkan dengan proses biomachining normal (tanpa perlakuan khusus). Hasil pengujian menunjukan bahwa MRR pada penambahan potensial listrik meningkat 15% pada waktu pemakanan 12 dan 24 jam, sedangkan pada waktu pemakanan 18 jam turun 15-20%.

---

Biomachining is an alternative process in the micro-fabrication categorized as environmental friendly because it uses bacteria as a cutting tool. Biomachining process produces a better surface quality because it does not generate heat on the surface of the workpiece thatpotentially developedto producemore complex microproducts.In this study, the process was developed variations biomachining technology of material removal rate (MRR), which aims to prove how much of the effect of DC electric potential on the performance of the bacteria Acidithiobacillus ferrooxidans NBRC 14262 which can be seen from the value of material removal rate (MRR) and compared with normal biomachining process (without special treatment). The test results showed that the MRR on the potential addition of electricity increased by 15% at the time of removal 12 and 24 hours, while the removal at 18 hours down 15-20%."

"Seiring peningkatan kebutuhan infrastruktur yang maju disertai penerapan ilmu pengetahuan dan teknologi yang berwawasan lingkungan, tidak dapat dihindari pembangunan konstruksi di atas lahan gambut. Penelitian ini bertujuan menganalisa nilai CBR dan nilai DCP tanah gambut daerah Kecamatan Kayu Agung, Sumatera Selatan pada kondisi unsoaked, terhadap penambahan mikroorganisme selulolitik potensial asli. Pada penelitian ini dilakukan metode pencampuran secara konvensional dengan alat penyemprot dengan volume pencampuran (satuan liter) sebanyak 10% dari berat tanah (satuan kg). Setelah dilakukan fermentasi selama 30 dan 45 hari terjadi peningkatan nilai CBR unsoaked dan penurunan nilai DCP unsoaked dari kondisi asli namun perubahan yang terjadi tidak signifikan.

---

Along with the increase of advanced infrastructure needs and application of green science and technology, constructions on peatland is undeniable. This research aims to increase CBR value and to decrease DCP value for improving support capability of peat soil. Addition of potential cellulolytic potential microorganisms is a kind of natural solution for faster improvement on mechanical property of peat soil.

In this research, the mixing is conventionally by using sprayer with microorganisms volume as much as 10% of soil mass (in litre unit). After fermentation of 30 and 45 days, it shows increase of CBR value and decrease of DCP value from its initial condition yet the results obtained is still in bad condition."

"Penyebaran mikroba yang resisten terhadap pengobatan merupakan tantangan kesehatan masyarakat yang menyeluruh, yang akan menurunkan efektivitas obat dan mengakibatkan tingginya angka kesakitan dan kematian serta bertambahnya biaya pengobatan. Pengawasan resistensi obat antimikrobial melalui laporan data tentang pola resistensi mikroba terhadap suatu antimikroba akan berguna untuk mencegah timbulnya resistensi. Pada studi ini akan dilaporkan tentang pola resistensi mikroba terhadap ceftriaxone dalam 4 tahun terakhir. Data yang dilaporkan ini berasal dari spesimen yang diperiksa di Laboratorium Mikrobiologi Klinik, Departemen Mikrobiologi FKUI dari tahun 2002 sampai dengan 2005. Spesies mikroba ditentukan melalui kultur dan uji identifikasi. Disc Diffussion Methods digunakan untuk uji sensitivitas ceftriaxone terhadap 14 bakteri Gram-negatif dan 7 bakteri Gram-positif. Hasilnya memperlihatkan, walaupun angka resistensi mikroba terhadap ceftriaxone meningkat dari tahun 2002 sampai 2005, tetapi secara umum masih kurang dari 50%. Angka resistensi yang rendah (< 3%) terlihat untuk Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Shigella flexneri, Serratia marcescens, dan Streptococcus pneumoniae. Hasil ini dapat digunakan untuk menyusun pedoman penggunaan ceftriaxone di Indonesia.

---

AbstractThe spread of drug resistant microbes is a global public health challenge which impairs the efficacy of antimicrobial agents and causes substantial increase in morbidity and mortality rates, including healthcare-associated costs. Monitoring of antimicrobial drug resistance from documented microbial epidemiology & resistance rate is useful in preventing the emergence of resistance. This study reports on the pattern of bacterial resistance against ceftriaxone in the past 4 years. The data were obtained from specimens examined in the Clinical Microbiology Laboratory, Department of Microbiology Faculty of Medicine, University of Indonesia from 2002 to 2005. Microbial species were determined from culture and identification tests. Disc diffusion method was used for sensitivity testing of ceftriaxone to 14 Gram-negative and 7 Gram-positive bacteria. Although resistance rates were increased from 2002 to 2005, resistance rates of ceftriaxone were found to be less than 50%. Low resistance rates (< 3%) were observed for Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Shigella flexneri, Serratia marcescens, and Streptococcus pneumoniae. These results could be useful in developing guidelines on the use of ceftriaxone in Indonesia. "

"Lipase mikrobial telah menunjukkan potensi besar sebagai biokatalis di berbagai sektor industri bioteknologi mengingat kemampuannya untuk melakukan aktivitas hidrolitik pada temperatur dan tekanan rendah. Berdasarkan hasil riset, diketahui limbah agoindustri mampu bekerja sebagai substrat yang baik pada proses produksi lipase melalui fermentasi substrat padat (SSF). Penelitian ini bertujuan untuk melakukan sintesis lipase ekstraseluler hasil fermentasi kapang Aspergillus niger dengan metode SSF pada limbah agroindustri berupa bungkil kedelai, bungkil inti sawit, dan serbuk sabut kelapa. Kondisi optimum produksi lipase dikarakterisasi lebih lanjut dengan memvariasikan konsentrasi induser minyak zaitun dan waktu fermentasi. Diperoleh aktivitas spesifik tertinggi 6,22 U/mL dari substrat bungkil kedelai pada waktu fermentasi 9 hari dan penambahan 4% induser. Kinerja lipase dianalisis lebih lanjut pada sampel lipase ekstrak kering hasil pengeringan melalui metode spray drying dan lipase terimobilisasi secara adsorpsi-crosslinking pada resin anion-makropori. Lipase hasil spray drying menunjukkan aktivitas 45 U/g enzim dengan enzyme loading 48,78%. Lipase terimobilisasi diuji nilai aktivitas dengan reaksi hidrolisis dan stabilitas enzim dalam mengkatalisis reaksi interesterifikasi sintesis biodiesel rute non-alkohol pada reaktor batch dengan perbandingan mol reaktan minyak kelapa sawit dan metil asetat 1:12 pada suhu reaksi 40oC selama 50 jam. Diperoleh hasil bahwa lipase terimobilisasi memiliki aktivitas 7,64 U/mL dengan nilai yield relatif 57% dari yield awal setelah empat kali siklus interesterifikasi.

---

Microbial lipase has shown great potentials in acting as a biocatalysts in many biotechnological applications due to its ability to perform hydrolitic activities at low temperature and pressure conditions. Many research proves that agroindustrial residues can be an ex-cellent substrate for the production of lipase by solid state fermentation (SSF). This study aimed to produce extracellular lipase from solid state fermentation of filamentous fungi Aspergillus niger by SSF on agroindustrial residues such as palm kernel cake, soybean meal, and coir pith. Fermentation was carried out at room temperature, initial pH of 7, with no improved condition by stirring or aeration. Produced enzymes were later characterized at several inducer concentration and incubation period.

This research obtained lipase with highest activity of 6,22 U/mL coming from soybean meal with 9 days of incubation and addition of 4% olive oil inducer. Lipase activity was further investigated by spray drying and immobilizing anion-macroporous resin. Spray dried lipase showed 45 U/g enzyme activity and enzyme loading of 48,78%. Immobilized enzyme activity was analyzed by hydrolisis and stability was analyzed by utilizing it as a biocatalyst for interesterification reaction in non-alcohol route of biodiesel synthesis in batch reactor with mole comparison 1:!2 of reactant palm oil and methyl acetate in reaction temperature of 40oC and 50 hour cycle. Immobilized enzyme have activity of 7,64 U/mL and relative yield of 57% after four cycle of interesterification."

"Kebutuhan akan listrik telah menjadi kebutuhan krusial masyarakat Indonesia. Akan tetapi, sumber daya untuk menghasilkan energi listrik saat ini, bahan bakar fosil, diprediksi akan habis dalam waktu belasan tahun ke depan. Dengan sebuah pengembangan teknologi terkini, Microbial Fuel Cell yang menggunakan mikroba untuk memecah suatu substrat yang akan menimbulkan beda potensial dan menghasilkan listrik. Variasi yang dilakukan adalah variasi elektrolit dan penambahan jumlah bakteri. Eksperimen menggunakan elektrolit Kalium Persulfat (K2S2O8) menghasilkan densitas daya lebih tinggi dibanding menggunakan Kalium Permanganat (KMnO4) yaitu 3,01 mW/m2 . Sedangkan, penambahan jumlah bakteri sebanyak 1% medium adalah kondisi yang mampu menghasilkan densitas daya optimum yaitu 66,33 mW/m2 dengan efisiensi coloumbicnya 4,48%. Selain memproduksi listrik, Microbial Fuel Cell juga terbukti menurunkan kadar COD jika substrat yang digunakan adalah limbah cair seperti limbah cair tempe pada penelitian ini yang dapat penurunan terbesarnya mencapai 42,97% pada variasi penambahan jumlah bakteri sebanyak 10% medium.

---

Demand for electricity has become a crucial requirement of Indonesian society. Resources to generate electrical energy, fossil fuels, is predicted to run out within the next dozen years. With a development of the latest technology, Microbial Fuel Cell that uses microbes to break down a substrate which will cause electric potential difference and generate electricity. This experiment conducted two variations : electrolyte solution and number of bacteria.

Experiments using potassium persulphate electrolyte (K2S2O8) resulted in a higher power density than using potassium permanganate (KMnO4) is 3,01 mW/m2. Meanwhile, the addition of as much as 1% of bacteria medium is a condition that can produce optimum power density is 66.33 mW/m2 with coloumbic efficiency of 4.48%. Beside that, Microbial Fuel Cell is also shown to reduce levels of COD if the substrate used is wastewater such as tempe wastewater in this study were able to achieve a 42.97% decline in its biggest increase in the number of bacteria on the variation of as much as 10% of medium."

"Terapi mikrobial sebagai kelas baru dari bahan aktif farmasi (API atau Active Pharmaceutical Ingridients) saat ini mulai dikembangkan sebagai produk perawatan kesehatan kulit baik dalam bentuk probiotik maupun postbiotik. Salah satu bakteri yang dinilai berpotensi yaitu Streptococcus macedonicus MBF 10-2 yang merupakan galur bakteri hasil isolasi dari limbah produksi tahu dan bersifat GRAS (generally recognized as safe) dari penelitian sebelumnya. Bakterial S. macedonicus MBF 10-2 telah dikembangkan dalam penelitian bahan aktif produk perawatan kesehatan kulit dalam bentuk postbiotik berupa lisat bakterial. Penelitian ini bertujuan meningkatkan rendemen dan karakteristik lisat bakterial setelah proses pengeringan beku dengan penambahan lioprotektan inulin. Lisat bakterial diperoleh dengan melisiskan sel menggunakan metode ultrasonikasi yang dilanjutkan dengan memformulasikan dengan lioprotektan inulin konsentrasi 2%, 5%, dan 10%, dan kemudian dilakukan proses pengeringan beku. Fraksi-fraksi kering beku lisat dikarakterisasi rendemen, karakteristik fisikokimia dan aktivitas antioksidannya. Rendemen serbuk lisat bakterial dengan lioprotektan inulin 0%, 2%, 5%, dan 10%, secara berturut-turut yakni 19,87%, 27,01%, 32,20%, dan 60,98%. Hasil karakteristik serbuk lisat bakterial memiliki bentuk serbuk kristal, berwarna putih hingga putih kekuningan, dan memiliki bau yang khas. Ukuran partikel serbuk 162-478 nm, pH 6,41-6,50, dan kandungan lembab 7,21%-9,37%. Selain itu, uji aktivitas antioksidan serbuk postbiotik dengan inulin 10% menunjukkan nilai IC50 sebesar 172,414 µg/ml.

---

Microbial therapy as a new class of Active Pharmaceutical Ingredients (API) is nowadays being developed as a skin healthcare product in a form of probiotics and postbiotics. One of the potential bacteria is Streptococcus macedonicus MBF 10-2 which is a bacterial strain isolated from tofu production waste and GRAS (generally recognized as safe) from previous studies. Bacterial S. macedonicus MBF 10-2 has been developed in the research of the skin health care products' active ingredients in the form of postbiotics of bacterial lysates. This study aimed to improve the yield and characteristic of bacterial lysates after freeze-drying with the proliferation of the Lyoprotectant inulin. Bacterial lysates were obtained by lysing cells using the ultrasonication method followed by formulation with 2%, 5%, and 10% concentrations of the lipoprotectant inulin, and then freeze-dried. Freeze-dried lysate fractions were 2 UNIVERSITAS INDONESIA characterized by for its yield, physicochemical characteristics and antioxidant activity. The yield of bacterial lysate powder with inulin lyoprotectants 0%, 2%, 5%, and 10% were 19.87%, 27.01%, 32.20%, and 60.98%, respectively. Bacterial lysate powder was a white to yellowish-white crystalline powder with specific odor. The particle size distribution of the powder was 162-478 nm, with pH of 6.41-6.50, and the moisture content of 7.21%-9.37%. In addition, the antioxidant activity test of postbiotic powder with 10% inulin showed an IC50 value of 172,414 µg/ml."