Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Tujuan: Metabolit yang dihasilkan oleh mikroorganisme merupakan sumber yang potensial untuk dieksplorasi guna memperoleh senyawa aktif antimikroba, salah satunya adalah kelompok biosurfaktan lipopeptida. Berbagai senyawa lipopeptida mempunyai aktifitas biologi yang tinggi. seperti aktifitas antikanker, antivirus, antipembekuan darah, immunomodulator, antiadesif, antiparasit, antibakteri dan antijamur. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengeksplorasi kekayaan biodiversitas nasional dengan melakukan isolasi dan skrining mikroba penghasil biosurfaktan lipopeptida serta karakterisasi dari lipopeptida yang dihasilkan sebagai antimikroba untuk aplikasi di bidang biomedis.Metode: Isolasi dan skrining mikroba penghasil biosurfaktan lipopeptida dilakukan dengan mengambil sampel berupa tanah dan air dari lokasi yang tercemar minyak baik di darat maupun di laut. Isolat terpilih digunakan dalam proses fermentasi untuk produksi lipopeptida. Uji aktifitas antibakteri dilakukan terhadap beberapa bakteri uji gram positif maupun negatif. Senyawa aktif lipopeptida yang dihasilkan diisolasi dan dikarakterisasi strukturnya menggunakan spektrometri massa. Optimasi produksi juga dilakukan guna memperoleh kondisi proses yang optimal menggunakan Respon Surface Methodology. Studi efek kombinasi senyawa lipopeptida dengan antibiotik lain dilakukan menggunakan metode double disk dan metode checkerboard.Hasil: Diperoleh mikroba penghasil biosurfaktan lipopeptida Bacillus amyloliquefaciens MD4-12 yang diisolasi dari lokasi di sekitar kilang minyak Pertamina di Palembang. Lipopeptida yang dihasilkan mampu menghambat pertumbuhan bakteri uji gram positif dan negatif secara in-vitro menggunakan metode difusi cakram termasuk bakteri resisten MRSA (methicillin resistant strain Staphylococcus aureus) dan E. coli ATCC 32518, bakteri penghasil betalaktamase. Hasil karakterisasi senyawa menunjukkan bahwa lipopeptida yang dihasilkan adalah surfaktin homolog yang terdiri dari C12-C17 surfaktin. Pada optimasi produksi senyawa surfaktin diperoleh peningkatan produksi sebesar 2,4 kali dari perolehan sebelum dilakukan optimasi, yaitu dari 0,51 g/L menjadi 1,21 g/L. Studi kombinasi senyawa lipopeptida dengan antibiotik ampisilin menunjukkan efek sinergi dan aditif dalam menghambat pertumbuhan bakteri uji Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Nilai FIC indeks yang diperoleh berkisar antara 0,31 ? 0,63. Penelitian ini menunjukkan potensi senyawa lipopeptida surfaktin sebagai antibakteri untuk aplikasi di bidang biomedis.

---

Objective. Metabolites produced by microorganisms are potential sources to be explored to obtain biological active compound. One of them belongs to lipopeptide biosurfactants group. Various active compounds of lipopeptide have high biological activity for biomedical application such as anticancer, antiviral, inhibit fibrin clot formation, immunomodulators, antiadesif, antiparasitic, antibacterial and antifungi. The aim of this study was to explore the national biodiversity to obtained microbial lipopeptide biosurfactants producers with antimicrobial activity.

Methods: To isolate and screen lipopeptide-producing microbes, soil and water samples were taken from oil contaminated from terrestrial and marine. Selected isolates were used for fermentation to produce lipopeptides. Active compound were isolated and characterized structurally by mass spectrometry. Optimization of production was also carried out to obtain optimal process conditions using the Response Surface Methodology. The effect of lipopeptides combination with other antibiotics for antimicrobial activity were performed against several test bacteria using double disc and checkerboard methods.

Result: Lipopeptide biosurfactant-producing microbe was obtained from the soil sample around Pertamina oil refinery plant at Palembang. Furthermore the isolate was identified as Bacillus amyloliquefaciens MD4-12. The Lipopeptides capable to inhibit the growth of gram positive and negative tests bacteria in-vitro, including resistant bacteria MRSA (methicillin resistant strain Staphylococcus aureus) and E. coli ATCC 32518, a betalactamase-producing strain, using diffusion disc method. Characterization of lipopeptide compounds using mass spectrometry showed that the lipopeptide is surfactin homolog consist of C12-C17 surfactin. Optimum medium composition was obtained during optimization of surfactin production using respon surface methodology. Surfactin production increased 2.4 times from 0.51 g/L, prior to optimization, to 1.21 g/L. Combination lipopeptide with ampicillin for antibacterial activity showed synergistic and additive effects against the test bacteria Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. The range of FIC index is 0.31 to 0.63. This research showed that surfactin lipopeptide have great potency for antimicrobial activity for biomedical application."

"Penelitian bertujuan memperoleh identitas isolat-isolat actinomycetes dari Raja Ampat, Papua penghasil antimikroba dan antikanker dengan aktivitas tertinggi. Penapisan aktivitas antimikroba dilakukan menggunakan metode difusi agar terhadap bakteri (Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus) dan khamir (Candida albicans dan Saccharomyces cerevisiae). Metabolit dari isolat terpilih yang memiliki aktivitas antimikroba tertinggi dianalisis lanjut. Nilai Minimum inhibitor concentration (MIC) dari senyawa murni yang diproduksi isolat terpilih terhadap mikroba diukur menggunakan metode mikrodilusi. Kebocoran asam nukleat dan protein dari mikroba uji dideteksi dengan menggunakan metode spektrofotometri pada panjang gelombang 260 dan 280 nm. Kebocoran urasil dianalisis menggunakan HPLC. Perubahan morfologi diamati menggunakan scanning electron microscope (SEM). Uji sitotoksik dilakukan terhadap 6 sel kanker (MCM-B2, Leukemia, T47D, HeLa, A549, dan WiDr) dan satu sel normal (Vero) menggunakan metode trypan blue dan MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Sebanyak sembilan isolat potensial penghasil antimikroba tertinggi (BL-36-1, BL-20-2, BL-14-2, RC-SS-37-4, RC-SS-37-16, BL-22-1, BL-06-5, BL-22-3, dan BL-22-5) diidentifikasi berdasarkan data sekuen penuh gen 16S rRNA (± 1.500 PB). Hasil penelitian menunjukkan 44 % isolat actinomycetes memiliki aktivitas antimikroba. Senyawa F.5.1 merupakan senyawa murni yang diproduksi oleh isolat terpilih BL-22-5. Nilai MIC senyawa tersebut terhadap mikroba uji berkisar 16 -- 64 µg/ml. Aktivitas antifungi senyawa F.5.1 lebih tinggi dibandingkan antibakteri. Senyawa F.5.1 menyebabkan kebocoran protein, asam nukleat, dan urasil pada mikroba uji. Nilai IC50 senyawa F.5.1 berkisar 0,02 -- 3,81 µg/ml terhadap sel kanker dan ≥ 30.000 µg/ml untuk sel normal. Isolat RCSS-37-4, RC-SS-37-16, BL-22-3, dan BL-22-5 teridentifikasi sebagai Streptomyces costaricanus (100 %), Streptomyces costaricanus (99,8 %), Streptomyces parvulus (98,6 %), dan Streptomyces badius (98,9 %). Lima isolat teridentifikasi sebagai Streptomyces spp. (BL-36-1, BL-20-2, BL-14-2, BL-22-1 dan BL-06-5) dan menjadi kandidat spesies baru karena memiliki nilai homologi yang rendah terhadap spesies terdekatnya (93,9% -- 97,4 %).

---

The objective of this research was to obtain the identity of actinomycetes isolates from Raja Ampat, Papua-producing antimicrobial and anticancer with the highest activity. Antimicrobial screening was conducted based on agar diffusion method against bacteria (Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus) and yeast (Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae). Metabolite from selected isolates with the highest antimicrobial activity was chosen for subsequent analysis. Minimum inhibitor concentration (MIC) value against microbial tested of pure bioactive compound was determined using microdilution method. Leakages of nucleic acids and proteins from microbial tested were detected using UV-vis spectrophotometer method on 260 and 280 nm wavelengths. Uracil Leakage was analyzed using HPLC. Morphological changes were observed using a scanning electron microscope (SEM). Determination of cytotoxic activity was conducted in 6 cell lines (MCM-B2, Leukemia, T47D, HeLa, A549, and WiDr) and normal cell (Vero) using trypan blue and MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) methods. Nine selected isolates with the highest antimicrobial activity (BL-36-1, BL-20-2, BL-14-2, RC-SS-37-4, RC-SS-37-16, BL-22-1, BL- 06-5, 22-3-BL and BL-22-5) were identified based on full sequence of 16S rRNA gene (1,500 bp). The results showed 44% of isolates of actinomycetes have antimicrobial activity. F.5.1 is a compound produced by the selected isolate (BL-22-5). MIC values of this compound against tested microbes in range of 16 -- 64 µg/ml. Antifungal activity from F.5.1 compound was higher than antibacterial activity. F.5.1 compound caused leakage of proteins, nucleic acids, and uracil on tested microbes. Inhibitor concentration 50% (IC50) value in the range of 0.02 -- 3.81 µg/ml against cancer cells and ≥ 30,000 µg/ml for normal cells. Isolate RC-SS-37-4, RC-SS-37-16, BL-22-3, and BL-22-5 have been identified as Streptomyces costaricanus (100%), Streptomyces costaricanus (99.8%), Streptomyces parvulus ( 98.6%), and Streptomyces badius (98.9%), respectively. Five isolates (BL-36-1, BL-20-2, BL-14-2, BL-22-1 and BL-06-5) were identified as Streptomyces spp. and can be presumed as candidates for new species because of the low homology value to their closest related species (93.9 % -- 97.4%)."

"Asam risinoleat merupakan asam lemak tak jenuh yang banyak terkandung dalam minyak jarak. Asam risinoleat dalam bentuk ester diketahui dapat dimanfaatkan sebagai emulsifier dan antimikroba. Pada penelitian ini, dilakukan esterifikasi gugus hidroksil hasil oksidasi asam lemak minyak jarak dan asam risinoleat dengan pereaksi asam laurat. Hidrolisis minyak jarak dengan katalis basa menghasilkan % randemen sebesar 86,77%. Proses oksidasi dilakukan dengan oksidator KMnO4 encer dalam suasana basa dan menghasilkan penurunan bilangan iod dari 7,02 mg/g menjadi 4,30 mg/g untuk asam lemak minyak jarak dan dari 7,02 mg/g menjadi 4,30 mg/g untuk asam risinoleat komersial. Esterifikasi dilakukan dengan bantuan katalis ZnCl2 dan rasio molar 3:1. Karakterisasi dengan LC-MS/MS menunjukkan bahwa produk ester yang terbentuk merupakan monoester. Produk ester yang diperoleh dapat berperan sebagai emulsifier setelah pengamatan selama 24 jam dengan jenis emulsi air dalam minyak. Aktivitas antibakteri dari produk ester yang diperoleh terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis tergolong lemah. Konsentrasi sampel terkecil dari uji MIC yang dilakukan (25%), belum menunjukkan hambatan minimum terhadap kedua bakteri uji.

---

Ricinoleic acid is an unsaturated fatty acid contained in castor oil. Risinoleic acid in the form of esters is known to be used as an antimicrobial and emulsifier. In this research, esterification of hydroxyl groups of oxidized castor oil fatty acids and ricinoleic acid with lauric acid was carried out. Hydrolysis of castor oil with base catalysts produces 86,77% yields of fatty acids. The oxidation process was carried out using KMnO4 in an alkaline solution and resulted in depression of iodine value from 7.02 mg/g to 4.30 mg/g for castor oil fatty acids and from 7.02 mg/g to 4.30 mg/g for commercial ricinoleic acid. Esterification was carried out using ZnCl2 as catalyst with molar ratio of 3:1. Characterization with LC-MS/MS showed that the products formed were monoester. Ester products can act as an emulsifier. The emulsion formed stable up to 24 hours and the type of emulsion was water-in-oil emulsion. The antimicrobial activity of the ester products against Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermidis was classified as weak. The smallest concentration applied for the MIC test (25%), has not provided minimum inhibition to both bacteria."

"Asam risinoleat merupakan asam lemak tak jenuh yang banyak terkandung dalam minyak jarak. Asam risinoleat dalam bentuk ester diketahui dapat dimanfaatkan sebagai emulsifier dan antimikroba. Pada penelitian ini, dilakukan esterifikasi gugus hidroksil hasil oksidasi asam lemak minyak jarak dan asam risinoleat dengan pereaksi asam laurat. Hidrolisis minyak jarak dengan katalis basa menghasilkan % randemen sebesar 86,77%. Proses oksidasi dilakukan dengan oksidator KMnO4 encer dalam suasana basa dan menghasilkan penurunan bilangan iod dari 7,02 mg/g menjadi 4,30 mg/g untuk asam lemak minyak jarak dan dari 7,02 mg/g menjadi 4,30 mg/g untuk asam risinoleat komersial. Esterifikasi dilakukan dengan bantuan katalis ZnCl2 dan rasio molar 3:1. Karakterisasi dengan LC-MS/MS menunjukkan bahwa produk ester yang terbentuk merupakan monoester. Produk ester yang diperoleh dapat berperan sebagai emulsifier setelah pengamatan selama 24 jam dengan jenis emulsi air dalam minyak. Aktivitas antibakteri dari produk ester yang diperoleh terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis tergolong lemah. Konsentrasi sampel terkecil dari uji MIC yang dilakukan (25%), belum menunjukkan hambatan minimum terhadap kedua bakteri uji.

---

Ricinoleic acid is an unsaturated fatty acid contained in castor oil. Risinoleic acid in the form of esters is known to be used as an antimicrobial and emulsifier. In this research, esterification of hydroxyl groups of oxidized castor oil fatty acids and ricinoleic acid with lauric acid was carried out. Hydrolysis of castor oil with base catalysts produces 86,77% yields of fatty acids. The oxidation process was carried out using KMnO4 in an alkaline solution and resulted in depression of iodine value from 7.02 mg/g to 4.30 mg/g for castor oil fatty acids and from 7.02 mg/g to 4.30 mg/g for commercial ricinoleic acid. Esterification was carried out using ZnCl2 as catalyst with molar ratio of 3:1. Characterization with LC-MS/MS showed that the products formed were monoester. Ester products can act as an emulsifier. The emulsion formed stable up to 24 hours and the type of emulsion was water-in-oil emulsion. The antimicrobial activity of the ester products against Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermidis was classified as weak. The smallest concentration applied for the MIC test (25%), has not provided minimum inhibition to both bacteria."