Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Sebagian besar bakteri asam laktat (BAL) menghasilkan eksopolisakarida (biopolimer fruktan) yang mempunyai banyak manfaat dalam industri makanan, kosmetik, kesehatan dan farmasi. Sintesis biopolimer ini melibatkan peran enzim fruktansukrase atau fruktosiltransferase (ftf). Rekayasa genetika dapat dilakukan untuk mendapatkan biopolimer yang berkriteria unggul, yaitu biopolimer inulin yang mempunyai derajat polimerisasi tinggi. Weissella confusa galur MBFCNC-2(1) telah menjadi sumber gen fruktansukrase yang dikloning lengkap di inang E. coli BL21 StarTM.Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan klon versi terpenggal dari gen fruktansukrase karena klon gen lengkap dilaporkan mempunyai masalah dalam ekspresinya. Sebagai template untuk kloning digunakan plasmid dari E. coli BL21 StarTM rekombinan, plasmid rekombinan pO_ftfNS pembawa gen lengkap, dan DNA genomik. PCR dilakukan menggunakan primer FTFdel_Fw dan FTFdel_Rv. Hasil PCR disekuensing dan dianalisis menggunakan BLAST. Sebagai hasil, gen fruktansukrase versi terpenggal didapatkan dari plasmid rekombinan pO_ftfNS pembawa gen ftf lengkap.

---

Most of Lactic Acid Bacteria (LAB) produce exopolysaccharide (fructan biopolymer) that has many advantages in food, cosmetic, health, and pharmacy industries. Synthesis of this biopolymer involves the role of fructansucrase enzyme of fructosyltransferase (ftf). Genetic engineering could be done to obtain biopolymer with excellence characteristcs, that is inulin with high degree of polymerization. Weisella confusa strain MBFCNC-2(1) has been used as a source of fructansucrase gene which is full-length clonned at E. coli BL21 StarTM.The aim of this study was to obtain truncated gene of fructansucrase because fulllength clone has problem on its expression. The PCR template used in this study were plasmid of Recombinant E coli BL21 StarTM, recombinant plasmid pO_ftfNS carrying full-length gene, and genomic DNA. PCR was carried out by FTFdel_Fw and FTFdel_Rv primer. The PCR product was sequenced and analyzed by using BLAST. Result revealed that truncated fructansucrase gene was obtained from plasmid recombinant pO_ftfNS carrying full-length gene."

"Antimicrobial Resistance (AMR) menyebabkan penurunan efektivitas pengobatan dan dapat dideteksi dengan keberadaan Antibiotik Resistance Genes (ARG) seperti bla_CTX-M yang paling banyak ditemukan dan memberikan resistansi terhadap antibiotik sefotaksim. Hingga saat ini, belum ada penelitian yang bertujuan untuk mendeteksi keberadaan gen bla_CTX-M pada Sungai Bekasi. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis konsentrasi bakteri Escherichia coli non-selektif dan resistan pada hilir Sungai Bekasi, menganalisis keberadaan ARG bla_CTX-M pada bakteri E. coli tersebut, serta memberikan rekomendasi lokasi sampling bakteri E. coli untuk mendeteksi AMR. Metode Polymerase Chain Reaction pada penelitian ini digunakan untuk mengamplifikasi DNA dan dilanjutkan dengan elektroforesis untuk pembacaan ukuran DNA. Berdasarkan hasil penelitian, hilir Sungai Bekasi memiliki rata-rata konsentrasi bakteri E. coli non-selektif sebesar 261 CFU/mL dengan titik sampling 1/3 dari pinggir sungai dan sebesar 207 CFU/mL dengan titik sampling di pinggir sungai. Sedangkan, rata-rata konsentrasi bakteri E. coli resistansi antibiotik sefotaksim sebesar 26 CFU/mL dengan titik sampling 1/3 dari pinggir sungai dan sebesar 20 CFU/mL dengan titik sampling di pinggir sungai. Rasio perbandingan bakteri E. coli resisten antibiotik dengan bakteri E. coli non-selektif adalah 9,78% dengan titik sampling 1/3 dari pinggir sungai dan 9,27% dengan titik sampling di pinggir sungai. Hasil penelitian mendapatkan bahwa adanya keberadaan gen resistansi antibiotik bla_CTX-M pada hilir Sungai Bekasi sebanyak 80% dari sampel yang diambil. Dimana gen yang mendominasi adalah CTX-M grup 1 yang beranggotakan gen CTX-M-1, CTX-M-3, dan CTX-M-15. Hasil penelitian juga menunjukan bahwa sampel dari pinggir sungai memiliki hasil yang lebih homogen dan lebih mudah untuk dilakukan.

---

Antimicrobial Resistance (AMR) causes a decrease in the effectiveness of treatment and can be detected by the presence of Antibiotic Resistance Genes (ARG) such as bla_CTX-M which is the most commonly found and provides resistance to the antibiotic cefotaxime. Until now, there has been no research aimed at detecting the presence of the bla_CTX-M gene in the Bekasi River. This study aims to analyze the concentration of non-selective and resistant Escherichia coli bacteria at downstream of the Bekasi River, analyze the presence of ARG bla_CTX-M in the E. coli bacteria, and provide recommendations for sampling locations for E. coli bacteria to detect AMR. The Polymerase Chain Reaction method in this study was used to amplify DNA and was followed by electrophoresis to read the size of the DNA. Based on the research results, the downstream Bekasi River has an average concentration of non-selective E. coli bacteria of 261 CFU/mL with a sampling point 1/3 from the riverbank and 207 CFU/mL with a sampling point on the riverbank. Meanwhile, the average concentration of cefotaxime-resistant E. coli bacteria was 26 CFU/mL with a sampling point of 1/3 from the riverbank and 20 CFU/mL with a sampling point on the riverbank. The ratio of antibiotic resistant E. coli bacteria to non-selective E. coli bacteria was 9.78% with a sampling point of 1/3 from the riverbank and 9.27% with a sampling point on the riverbank. The results of the study found that the presence of the bla_CTX-M antibiotic resistance gene in the downstream of the Bekasi River was as much as 80% of the samples taken. Where the dominant gene was CTX-M group 1 consisting of the CTX-M-1, CTX-M-3, and CTX-M-15. The results of the study also shown that samples from the riverbank have more homogeneous results and are easier to carry out."

"Kanker kolorektal adalah jenis kanker pada kolon dan rektum usus besar yang disebabkan oleh pertumbuhan abnormal. Kasus kanker kolorektal di Indonesia merupakan kasus kanker tertinggi urutan ketiga dan mengalami peningkatan setiap tahunnya. Oleh karena itu, deteksi kanker kolorektal diperlukan untuk diagnosis dan prognosis kanker kolorektal. Salah satu metode deteksi yang digunakan adalah deteksi ekspresi RNA untuk mengetahui gen yang diekspresikan secara berlebih atau sebaliknya pada jalur perkembangan kanker kolorektal yang terpengaruh. Ekspresi heparanase (HPSE) diketahui menginduksi perkembangan kanker kolorektal. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat ekspresi HPSE pada jaringan normal dan kanker kolorektal. Penelitian ini menggunakan sepuluh sampel untuk masing-masing jaringan normal dan kanker kolorektal dari pasien kanker kolorektal. Nilai ekspresi HPSE diukur dengan reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR). Selanjutnya, analisis statistik dilakukan menggunakan aplikasi SPSS. Hasil RT-qPCR menunjukkan bahwa ekspresi HPSE RNA pada jaringan kanker 6,912 kali lebih tinggi dibandingkan pada jaringan normal. Berdasarkan nilai perbandingan ekspresi gen relatif yang diatur dengan nilai 1. Ekspresi HPSE untuk setiap individu pasien dikelompokkan menjadi ekspresi meningkat (>1) dan menurun (<1). Berdasarkan hasil qPCR, ekspresi HPSE tidak terdeteksi pada tiga sampel pasien yang ditunjukkan dengan tidak terjadinya amplifikasi. Hasil ini diduga disebabkan oleh template RNA yang digunakan mengalami degradasi. Analisis statistik menunjukkan ekspresi HPSE pada jaringan kanker kolorektal tidak memiliki perbedaan secara signifikan dengan jaringan normal berdasarkan nilai p > 0,05.

---

Colorectal cancer is a type of cancer of the colon and rectum of the large intestine caused by abnormal growth. Colorectal cancer cases in Indonesia are the third highest cancer cases and are increasing every year. Therefore, detection of colorectal cancer is needed for the diagnosis and prognosis of colorectal cancer. One of the detection methods used is RNA expression detection to determine which genes are overexpressed or otherwise in the affected colorectal cancer development pathway. The expression of heparanase (HPSE) is known to induce the development of colorectal cancer. This study aims to determine the level of HPSE expression in normal tissue and colorectal cancer. This study used ten samples for each of normal and colorectal cancer tissue from colorectal cancer patients. Relative expression value HPSE measured by reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR). Furthermore, statistical analysis was performed using the SPSS application. RT-qPCR results showed that HPSE expression in cancer tissue was 6,912 higher than in normal tissue. Based on the comparative value of relative gene expression, which was set to a value of 1. The HPSE expression for each individual patient was grouped into increased (>1) and decreased (<1) expressions. Based on the results of RT-qPCR, HPSE expression was not detected in three patient samples as indicated by the absence of amplification. This result was thought to be caused by the degradation of the template RNA. HPSE in colorectal cancer tissue did not differ significantly from normal tissue based on p > 0.05."

"Polimorfisme gen penyandi Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) diketahui berasosiasi dengan penyakit hipertensi yang merupakan salah satu masalah global penyebab utama kematian di seluruh dunia, termasuk Indonesia. Salah satu cara mengidentifikasi polimorfisme gen adalah dengan Polymerase Chain Reaction (PCR). Pada penelitian ini bertujuan melakukan perancangan protokol identifikasi polimorfisme dengan PCR dari berbagai literatur, kemudian melakukan identifikasi polimorfisme I/D pada sejumlah sampel relawan, dan menganalisis hasil identifikasi polimorfisme gen ACE terhadap alel insersi (I) maupun delesi (D). Prosedur yang dilakukan pada penelitian ini yaitu melakukan ekstraksi DNA, mengamplifikasi fragmen gen ACE menggunakan PCR, dan memvisualisasi hasil PCR berupa fragmen amplikon menggunakan elektroforesis gel agarosa. Hasil menunjukkan bahwa protokol untuk identifikasi polimorfisme dengan PCR sudah terancang dengan baik. Selain itu, hasil identifikasi polimorfisme gen ACE dari sejumlah sampel menunjukkan bahwa kedua alel I dan D terkonfirmasi alel polimorfisme. Hasil analisis statistik dari jumlah sampel yang diterapkan dalam penelitian ini menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan signifikan antara genotipe dengan hipertensi dan non-hipertensi, serta pada alel dengan hipertensi dan non-hipertensi.

---

Polymorphism of the gene encoding Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) is known to be associated with hypertension, which is one of the main global problems causing death worldwide, including Indonesia. One way to identify gene polymorphisms is using Polymerase Chain Reaction (PCR). This study aims to design a protocol for identifying I/D polymorphism with PCR from various literatures, then identify I/D polymorphisms in a number of volunteer samples, and analyze the results of the identification of ACE gene polymorphisms for both the insertion (I) and deletion (D) alleles. The procedures carried out in this study were DNA extraction, amplification of the ACE gene fragment using PCR, and visualizing the PCR results in the form of amplicon fragments using agarose gel electrophoresis. The results showed that the protocol for identifying polymorphisms by PCR was well designed. In addition, the identification of ACE gene polymorphisms from several samples showed that both I and D alleles were confirmed as polymorphism alleles. The statistical analysis results from the number of samples applied in this study showed no significant difference between the genotypes with hypertension and non-hypertension, as well as in the alleles with hypertension and non-hypertension."

"Peningkatan kesadaran masyarakat muslim akan kehalalan produk farmasi menyebabkan kebutuhan sertifikasi halal produk farmasi terus meningkat. Metode pemeriksaan berbasis DNA telah disepakati sebagai salah satu pemeriksaan yang wajib dilakukan dalam pemeriksaan halal. qPCR berbasis SYBR Green merupakan metode pemeriksaan berbasis DNA yang memiliki kecepatan analisis yang lebih tinggi dibandingkan PCR konvensional dan lebih ekonomis dibandingkan qPCR berbasis probe. Multiplex PCR merupakan reaksi PCR yang menggabungkan beberapa primer dalam satu reaksi untuk mengamplifikasi beberapa gen secara sekaligus. Penggunaan primer universal telah dikembangkan untuk meningkatkan reprodusibilitas multiplex PCR berbasis SYBR Green, tetapi belum berhasil melakukan diskriminasi spesies hewan. Pada penelitian ini, primer forward universal yang didampingin dengan primer reverse spesifik untuk porcine, canine, dan murine berhasil dikembangkan. Selain itu, setiap primer menghasilkan amplicon dengan nilai Tm yang berbeda sehingga diskriminasi spesies hewan dapat dilakukan. Multiplex qPCR dari kombinasi primer tersebut ditemukan dapat mengamplifikasi ketiga gen secara sekaligus dengan variasi intra-assay dan variasi inter-assay sebesar 9,83% dan 11,53%. Multiplex qPCR yang dikembangkan dalam mendeteksi gen porcine dalam 6,81 pg/μL DNA total, gen murine dalam 22,88 pg/μL DNA total, dan gen canine dalam 88,06 pg/μL DNA total. Multiplex qPCR yang dikembangkan terbukti dapat mendeteksi sisa DNA yang terdapat pada produk farmasi maupun kosmetik.

---

The rise of muslim awareness in halal pharmaceutical has caused an increase in demand for halal certified pharmaceutical. DNA based detection has been approved as a gold standard in halal examination. Intercalating dye-based qPCR is more economically available compared to available commercial kits which employs probe-based qPCR and also require less analysis time compared to conventional PCR. Multiplex qPCR could amplify more than one target by combining two primer set in one reaction. Universal primer have been developed to increase intercalating dye based Multiplex qPCR reproducibility. However, discrimination of animal species with universal primer have not been successful. In this study, universal forward primer was combined with a specific reverse primer for porcine, canine, and murine. These primers were found to be specific and were able to produce a different melting temperature, enabling animal species discrimination. Multiplex qPCR with these primers was repeatable with an intra assay variance and inter assay variance of 9,83% and 11,53%. The developed multiplex qPCR could detect porcine gene in 6,81 pg/μL DNA solution, murine gene in 22,88 pg/μL DNA solution, and canine gene in 88,06 pg/μL DNA solution. Moreover, the developed multiplex qPCR was proven to be able to detect DNA remnant in pharmaceutical and cosmeuticals."

"Deteksi Infeksi Submikroskopis Necator americanus, Ancylostoma duodenale, dan Ascaris lumbricoides dari Sampel Feses di Nangapanda, Ende, Menggunakan Real-Time Polymerase Chain Reaction. Infeksi dari Soil-Transmitted Helminthes (STH) (N. americanus, A. duodenale (Hookworm), dan A. lumbricoides) dapat menyebabkan anemia, kekurangan zat besi, bahkan malnutrisi. Pemeriksaan infeksi STH dapat dilakukan menggunakan mikroskop, tetapi metode tersebut masih kurang sensitif. Penelitian bertujuan mendeteksi dan mengetahui persentase infeksi submikroskopis STH dari sampel feses anak (usia 5-18 tahun) di Nangapanda, Ende menggunakan metode real-time polymerase chain reaction (PCR). Sampel feses dikoleksi sebanyak dua kali, yaitu sebelum dan sesudah pemberian albendazole 400 mg. Total sampel yang diperoleh adalah 242 tetapi hanya 45 sampel yang negatif secara mikroskopis yang diuji dengan real-time PCR. DNA sampel diisolasi dan diamplifikasi menggunakan primer dari daerah internal transcribed spacer (ITS-1 dan ITS-2) rDNA. Deteksi dengan real-time PCR menghasilkan kurva amplifikasi pada fluorophore VIC, FAM, dan Texas Red. Sebanyak tiga sampel (6,7%) pada pre treatment termasuk low load of DNA (N. americanus and A. lumbricoides) (Ct > 35), empat sampel (9,1%) termasuk low load of DNA untuk N. americanus saja (Ct > 35), dan lima sampel (11,4%) termasuk moderate load of DNA untuk A. lumbricoides saja (30 < Ct < 35) pada post treatment. Hasil penelitian menunjukkan bahwa real-time PCR dapat mendeteksi infeksi submikroskopis dari Hookworm dan A. lumbricoides.

---

Soil-transmitted helminth (STH) infections (Necator americanus (hookworm), Ancylostoma duodenale (hookworm), and Ascaris lumbricoides) can lead to anemia, malnutrition, and iron deficiency. Traditionally, STH infections have been diagnosed using microscopy to detect eggs in human fecal samples. However, there are several limitations of this method. The aim of this research was to detect the percentage of submicroscopic STH infections from human fecal samples (children, 5?18 years old) in Nangapanda, Ende, using the real-time polymerase chain reaction (PCR) method. The fecal samples were collected in two time periods, which were before and after treatment, using 400 mg of Albendazole. There were 242 samples in total, but only 45 negative samples from microscopic detection were tested with real-time PCR. The DNA samples were isolated and amplified wih primers of internal transcribed spacer (ITS-1 and ITS-2) region of rDNA. The detection of samples with real-time PCR generated an amplification curve in VIC, FAM, and Texas Red fluorophore. Three samples (6.7%) in pre-treatment were low load of DNA (N. americanus and A. lumbricoides) (Ct > 35). Four samples (9.1%) were low load of DNA (N. americanus) (Ct > 35) in post-treatment. Five samples (11.4%) were moderate load of DNA (A. lumbricoides) (30 < Ct < 35) in post-treatment. real-time PCR could detect submicroscopic infections from specific species of hookworm and A. lumbricoides."

"Deteksi Infeksi Submikroskopis Necator americanus, Ancylostoma duodenale, dan Ascaris lumbricoides dari Sampel Feses di Nangapanda, Ende, Menggunakan Real-Time Polymerase Chain Reaction. Infeksi dari Soil-Transmitted Helminthes (STH) (N. americanus, A. duodenale (Hookworm), dan A. lumbricoides) dapat menyebabkan anemia, kekurangan zat besi, bahkan malnutrisi. Pemeriksaan infeksi STH dapat dilakukan menggunakan mikroskop, tetapi metode tersebut masih kurang sensitif. Penelitian bertujuan mendeteksi dan mengetahui persentase infeksi submikroskopis STH dari sampel feses anak (usia 5-18 tahun) di Nangapanda, Ende menggunakan metode real-time polymerase chain reaction (PCR). Sampel feses dikoleksi sebanyak dua kali, yaitu sebelum dan sesudah pemberian albendazole 400 mg. Total sampel yang diperoleh adalah 242 tetapi hanya 45 sampel yang negatif secara mikroskopis yang diuji dengan real-time PCR. DNA sampel diisolasi dan diamplifikasi menggunakan primer dari daerah internal transcribed spacer (ITS-1 dan ITS-2) rDNA. Deteksi dengan real-time PCR menghasilkan kurva amplifikasi pada fluorophore VIC, FAM, dan Texas Red. Sebanyak tiga sampel (6,7%) pada pre treatment termasuk low load of DNA (N. americanus and A. lumbricoides) (Ct > 35), empat sampel (9,1%) termasuk low load of DNA untuk N. americanus saja (Ct > 35), dan lima sampel (11,4%) termasuk moderate load of DNA untuk A. lumbricoides saja (30 < Ct < 35) pada post treatment. Hasil penelitian menunjukkan bahwa real-time PCR dapat mendeteksi infeksi submikroskopis dari Hookworm dan A. lumbricoides.

---

Soil-transmitted helminth (STH) infections (Necator americanus (hookworm), Ancylostoma duodenale (hookworm), and Ascaris lumbricoides) can lead to anemia, malnutrition, and iron deficiency. Traditionally, STH infections have been diagnosed using microscopy to detect eggs in human fecal samples. However, there are several limitations of this method. The aim of this research was to detect the percentage of submicroscopic STH infections from human fecal samples (children, 5?18 years old) in Nangapanda, Ende, using the real-time polymerase chain reaction (PCR) method. The fecal samples were collected in two time periods, which were before and after treatment, using 400 mg of Albendazole. There were 242 samples in total, but only 45 negative samples from microscopic detection were tested with real-time PCR. The DNA samples were isolated and amplified wih primers of internal transcribed spacer (ITS-1 and ITS-2) region of rDNA. The detection of samples with real-time PCR generated an amplification curve in VIC, FAM, and Texas Red fluorophore. Three samples (6.7%) in pre-treatment were low load of DNA (N. americanus and A. lumbricoides) (Ct > 35). Four samples (9.1%) were low load of DNA (N. americanus) (Ct > 35) in post-treatment. Five samples (11.4%) were moderate load of DNA (A. lumbricoides) (30 < Ct < 35) in post-treatment. real-time PCR could detect submicroscopic infections from specific species of hookworm and A. lumbricoides."