Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Ion kalsium (Ca2+) merupakan kation yang berperan dalam kondensasi kromosom. Berbagai penelitian mengenai pengaruh Ca2+ terhadap struktur kromosom telah dilaporkan. Akan tetapi, penelitian-penelitian tersebut masih terbatas pada galur sel kanker atau sel hewan mamalia dengan pendekatan analisis ultrastruktur. Pengaruh Ca2+ terhadap struktur dan pola banding kromosom pada sel manusia non-kanker belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh Ca2+ terhadap struktur dan pola banding kromosom dari sel darah manusia melalui teknik GTL-banding. Sel darah manusia dikultur, kemudian dilakukan pemanenan kromosom dan banding menggunakan pewarna Leishman. Pengaruh Ca2+ dievaluasi dengan menginkubasikan kromosom pada dua larutan berbeda, yaitu larutan 1 mM BAPTA sebagai chelator spesifik Ca2+ dan 1 mM EDTA sebagai chelator kation, dan dibandingkan dengan kontrol. Data yang diperoleh dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan menentukan nilai kromosom berdasarkan kriteria Quality Assessment (QA) dari International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil yang diperoleh menunjukkan kromosom kelompok perlakuan 1 mM BAPTA memiliki struktur tidak padat, membentuk struktur fibrous, dan berukuran lebih lebar dibandingkan kromosom kontrol dengan pola banding tidak jelas dan kabur. Kromosom kelompok perlakuan 1 mM EDTA membentuk struktur tidak padat dan berukuran lebih panjang dibandingkan kelompok kontrol. Rata-rata nilai kromosom pada kelompok kontrol, BAPTA, dan EDTA berturut-turut adalah 4,467 ± 0,78; 4,30 ± 0,75; dan 4,467 ± 0,86. Perbedaan struktur kromosom, pola banding, dan rata-rata nilai kromosom pada kromosom 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA menunjukkan bahwa kation Ca2+ merupakan faktor penting dalam kondensasi struktur kromosom.

---

Calcium ion (Ca2+) is a cation that has a major role in chromosome condensation. Studies about Ca2+ effect in chromosome structure have been reported. However, the studies are limited for cancer cell lines using the ultrastructure analysis approach. The effect of Ca2+ on chromosome structure and banding pattern of the human non-cancer cell line is still unknown. This study aims to determine the effect of Ca2+ on human blood cell chromosome structure and banding pattern using the GTL-banding technique. The blood cell was cultured and then the chromosome was harvested and banded with Leishman dye. The Ca2+ effect was evaluated by using 1 mM BAPTA as Ca2+ specific chelator and 1 mM EDTA as common cation chelator and then compared with the control. The data were then analysis both qualitatively by observing chromosome structure and banding pattern, as well as quantitatively by determining chromosome value based on Quality Assessment (QA) from International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result showed that the BAPTA-treated chromosome structure was fuzzy, fibrous, and wider than the control group with a less clear banding pattern than the control. In addition, EDTA-treated chromosome structure was less condensed and longer than those of the control. The mean chromosome value of control, BAPTA-, and EDTA-treated chromosome are 4.467 ± 0.78; 4.30 ± 0.75; and 4.467 ± 0.86. Distinct characteristic of chromosome structure, banding pattern, and mean of chromosome value from BAPTA- and EDTA-treated chromosome further indicates that Ca2+ plays an important role in chromosome condensation."

"Ion kalsium (Ca2+) merupakan kation yang berperan dalam kondensasi kromosom. Berbagai penelitian mengenai pengaruh Ca2+ terhadap struktur kromosom telah dilaporkan. Akan tetapi, penelitian-penelitian tersebut masih terbatas pada galur sel kanker atau sel hewan mamalia dengan pendekatan analisis ultrastruktur. Pengaruh Ca2+ terhadap struktur dan pola banding kromosom pada sel manusia non-kanker belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh Ca2+ terhadap struktur dan pola banding kromosom dari sel darah manusia melalui teknik GTL-banding. Sel darah manusia dikultur, kemudian dilakukan pemanenan kromosom dan banding menggunakan pewarna Leishman. Pengaruh Ca2+ dievaluasi dengan menginkubasikan kromosom pada dua larutan berbeda, yaitu larutan 1 mM BAPTA sebagai chelator spesifik Ca2+ dan 1 mM EDTA sebagai chelator kation, dan dibandingkan dengan kontrol. Data yang diperoleh dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan menentukan nilai kromosom berdasarkan kriteria Quality Assessment (QA) dari International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil yang diperoleh menunjukkan kromosom kelompok perlakuan 1 mM BAPTA memiliki struktur tidak padat, membentuk struktur fibrous, dan berukuran lebih lebar dibandingkan kromosom kontrol dengan pola banding tidak jelas dan kabur. Kromosom kelompok perlakuan 1 mM EDTA membentuk struktur tidak padat dan berukuran lebih panjang dibandingkan kelompok kontrol. Rata-rata nilai kromosom pada kelompok kontrol, BAPTA, dan EDTA berturut-turut adalah 4,467 ± 0,78; 4,30 ± 0,75; dan 4,467 ± 0,86. Perbedaan struktur kromosom, pola banding, dan rata-rata nilai kromosom pada kromosom 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA menunjukkan bahwa kation Ca2+ merupakan faktor penting dalam kondensasi struktur kromosom.

---

Calcium ion (Ca2+) is a cation that has a major role in chromosome condensation. Studies about Ca2+ effect in chromosome structure have been reported. However, the studies are limited for cancer cell lines using the ultrastructure analysis approach. The effect of Ca2+ on chromosome structure and banding pattern of the human non-cancer cell line is still unknown. This study aims to determine the effect of Ca2+ on human blood cell chromosome structure and banding pattern using the GTL-banding technique. The blood cell was cultured and then the chromosome was harvested and banded with Leishman dye. The Ca2+ effect was evaluated by using 1 mM BAPTA as Ca2+ specific chelator and 1 mM EDTA as common cation chelator and then compared with the control. The data were then analysis both qualitatively by observing chromosome structure and banding pattern, as well as quantitatively by determining chromosome value based on Quality Assessment (QA) from International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result showed that the BAPTA-treated chromosome structure was fuzzy, fibrous, and wider than the control group with a less clear banding pattern than the control. In addition, EDTA-treated chromosome structure was less condensed and longer than those of the control. The mean chromosome value of control, BAPTA-, and EDTA-treated chromosome are 4.467 ± 0.78; 4.30 ± 0.75; and 4.467 ± 0.86. Distinct characteristic of chromosome structure, banding pattern, and mean of chromosome value from BAPTA- and EDTA-treated chromosome further indicates that Ca2+ plays an important role in chromosome condensation."

"ABSTRAKPasien kanker payudara sering terjadi penurunan sistem imun yaitu menurunnya limfosit, yang dapat meningkatkan angka kematian. Akupunktur diharapkan dapat menjadi pilihan terapi untuk meningkatkan limfosit karena terapi farmakologi saat ini harganya sangat mahal dan mempunyai efek samping. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan tindakan EA sebagai immunomodulator terhadap imunitas seluler dengan meningkatkan jumlah persentase limfosit sediaan apus darah tepi pada mencit C3H model adenokarsinoma payudara. Penelitian eksperimental laboratorik dengan post test only control group design melibatkan dua puluh sediaan apus darah tepi yang diambil dari 20 mencit C3H model adenokarsinoma payudara yang dibagi menjadi 4 kelompok yaitu Kelompok K tidak diberi perlakuan EA, kelompok P1 dilakukan EA 1 kali, kelompok P2 dilakukan EA 2 kali dan P3 dilakukan EA 3 kali. Tindakan EA dilakukan pada titik ST36 Zusanli, BL18 Ganshu, BL20 Pishu dengan frekuensi 2Hz selama 15 menit. Hasil penelitian didapatkan rata-rata persentase limfosit tertinggi terdapat pada kelompok P2 49,60 7,021 . Dengan uji ANOVA jumlah persentase limfosit antara kelompok P1, P2, P3 dan kelompok kontrol tidak terdapat perbedaan rerata yang bermakna p=0.811 . Kesimpulan yang diperoleh yaitu elektroakupunktur meningkatkan jumlah persentase limfosit sediaan apus darah tepi pada mencit C3H model adenokarsinoma payudara.

---

ABSTRACTBreast Cancer Patients often decrease the immune system that is decreased lymphocytes, which can increase mortality. Acupuncture is expected to be a therapeutic option to increase lymphocytes because current pharmacological therapy is very expensive and has side effects. This study aims to prove the action of EA as an immunomodulator against cellular immunity by increasing the percentage of lymphocytes of peripheral blood smear in C3H mice of breast adenocarcinoma model. Laboratory experimental study with post test only control group design involving twenty peripheral blood smear preparations taken from 20 mice C3H breast adenocarcinoma model divided into 4 groups ie Group K not given EA treatment, group P1 performed EA 1 times, group P2 performed EA 2 times and P3 done EA 3 times. The action of EA is done at ST36 Zusanli point, BL18 Ganshu, BL20 Pishu with frequency of 2Hz for 15 minutes. The result showed that the highest percentage of lymphocyte was found in group P2 49,60 7,021 . With ANOVA test, the number of lymphocyte percentages between P1, P2, P3 and control group did not have significant mean difference p 0.811 . The conclusion obtained is that electroacupuncture increases the percentage of lymphocytes of the peripheral blood smear in C3H mice of breast adenocarcinoma model. "

"Ion kalsium (Ca2+) adalah salah satu kation divalen yang berperan dalam proses kondensasi kromosom. Pengaruh Ca2+ pada kondensasi kromosom dengan melihat pola banding dan nilai kromosom belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ion kalsium (Ca2+) pada kondensasi struktur kromosom sel HeLa dengan teknik G-banding-trypsin-Leishman (GTL-banding) dan karyotyping. Sebaran kromosom pada tahap metafase diperoleh dengan mengkultur sel HeLa pada suhu 37 °C (5% CO2). BAPTA 1 mM sebagai chelator spesifik Ca2+ dan EDTA 1 mM sebagai chelator kation diberikan sebelum pemanenan kromosom. Kromosom yang telah dipanen selanjutnya dilakukan banding dengan pewarna Leishman. Pengaruh Ca2+ pada kondensasi kromosom diamati dengan membandingkan kromosom pada kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol. Data dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur kromosom dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan mengacu pada Quality Assessment (QA) berdasarkan International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kromosom pada kelompok kontrol memiliki struktur yang padat dengan pola banding yang jelas teramati dengan nilai kromosom 2 hingga 5. Kelompok perlakuan 1 mM BAPTA memiliki struktur kromosom yang tidak padat dengan ukuran yang lebih besar dari kelompok kontrol dan memiliki pola banding yang kurang jelas dengan nilai kromosom 2 hingga 5. Kelompok perlakuan 1 mM EDTA memiliki struktur kromosom yang tidak padat dan fibrous dengan ukuran yang lebih besar dan panjang dari kelompok kontrol serta memiliki pola banding yang kurang jelas dengan nilai kromosom 2 hingga 6. Kromosom pada kelompok perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA memiliki struktur lebih tidak padat dan pola banding yang kurang jelas jika dibandingkan dengan kelompok kontrol sehingga mengindikasikan peran Ca2+ dalam kondensasi struktur kromosom.

---

Calcium ion (Ca2+) is one of the divalent cations involved in the chromosome condensation process. The effect of Ca2+ on chromosome condensation by observing banding patterns and chromosome value has yet known. This study aimed to determine the effect of calcium ion (Ca2+) on HeLa cell chromosome structure condensation using G-banding-Trypsin-Leishman (GTL-banding) technique and karyotyping. Metaphase chromosome spreads were obtained by culturing the HeLa cell at 37 ℃ (5% CO2). 1 mM BAPTA as Ca2+ chelator and 1 mM EDTA as cation chelator was added prior to the chromosome harvest. G-banding was carried out on harvested chromosomes using Leishman dye. The effect of Ca2+ on chromosome condensation was determined by comparing the treated chromosome to the control chromosome. The data were obtained and analyzed qualitatively by observing chromosome structure and banding pattern, as well as quantitatively by referring to the International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result showed that the chromosome in the control group had a condensed structure with a clear banding pattern and chromosome value ranged from 2 to 5. Chromosome treated with 1 mM BAPTA had a less condensed structure with a bigger size compared to the control group and had chromosome value ranged from 2 to 5. Chromosome treated with 1 mM EDTA was also less condensed with longer and fibrous structure and had chromosome value ranged from 2 to 6. BAPTA-treated and EDTA-treated chromosomes had a less condensed structure with less clear banding pattern compared to the control which indicated the role of Ca2+ in the chromosome condensation process."

"Ion Magnesium (Mg2+) merupakan salah satu kation divalen yang berperan dalam kondensasi kromosom. Penelitian mengenai pengaruh Mg2+ terhadap kondensasi kromosom dengan menggunakan kromosom yang berasal dari berbagai sel, terutama sel kanker, telah dilakukan. Namun, hingga saat ini, belum ada penelitian yang menggunakan kromosom yang berasal dari sel normal (non-kanker). Salah satu sel yang dapat digunakan adalah limfosit dari sel darah. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh Mg2+ terhadap struktur kromosom limfosit dengan menggunakan teknik GTL-banding dan karyotyping. Kromosom pada tahap metafase diperoleh dengan mengultur sel darah dan dilanjutkan dengan banding menggunakan Leishman stain. Pengaruh Mg2+ diteliti dengan memberikan larutan XBE5 yang mengandung 5 mM Mg2+ sebagai kontrol, XBE yang mengandung 0 mM Mg2+, dan 1 mM EDTA sebagai chelator kation. Kromosom pada masing-masing perlakuan diberikan penilaian berdasarkan Quality Assesment yang disusun oleh Association for Clinical Cytogenetics berdasarkan International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kromosom kontrol yang mengandung 5 mM Mg2+ memiliki struktur padat dengan pola banding yang jelas dan intensitas band tebal, sedangkan kromosom pada kelompok perlakuan XBE (0 mM Mg2+) dan 1 mM EDTA memiliki struktur tidak padat dan fibrous dengan pola banding kurang jelas dan intensitas band yang tipis. Nilai rata-rata±SD kromosom kelompok XBE (4,389±0,607) dan EDTA (4,611±0,607) lebih tinggi dibandingkan kontrol XBE5 (4,222±0,427). Hal ini menunjukkan bahwa Mg2+ memiliki pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia.

---

Magnesium ion (Mg2+ ) is one of the divalent cations that have an important role in chromosome condensation. Researches about the role of Mg2+ have been conducted on the chromosome from various type of cells, especially human cancer cell line. However, there has not been any research conducted using human normal cells such as blood cells lymphocyte chromosome. This study aims to evaluate the effects of Mg2+ on chromosome structure from lymphocyte using GTL-banding and karyotyping. Metaphase chromosomes were obtained by culturing blood cells, followed by banding using Leishman stain. Magnesium ion role was assessed by using XBE5 solution that contains 5 mM Mg2+ as control, XBE solution that contains 0 mM Mg2+, and 1 mM EDTA solution as a cation chelator. The chromosome value from each treatment was evaluated using Quality Assessment from Association for Clinical Cytogenetics according to the International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result shows that the control chromosome (XBE5) had a compact structure with a clear banding pattern and bold band intensity, while those treated with XBE and EDTA had a less compact and fibrous structure with an unclear banding pattern and thin band intensity. In addition, the average chromosome score±SD of the XBE (4.389±0.607) and EDTA-treated (4.611±0.607) chromosomes were higher than those of control (4.222±0.427). These data indicated that Mg2+ affects the structure of the human lymphocyte chromosome."

"Ion Magnesium (Mg2+) merupakan salah satu kation divalen yang berperan dalam kondensasi kromosom. Penelitian mengenai pengaruh Mg2+ terhadap kondensasi kromosom dengan menggunakan kromosom yang berasal dari berbagai sel, terutama sel kanker, telah dilakukan. Namun, hingga saat ini, belum ada penelitian yang menggunakan kromosom yang berasal dari sel normal (non-kanker). Salah satu sel yang dapat digunakan adalah limfosit dari sel darah. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh Mg2+ terhadap struktur kromosom limfosit dengan menggunakan teknik GTL-banding dan karyotyping. Kromosom pada tahap metafase diperoleh dengan mengultur sel darah dan dilanjutkan dengan banding menggunakan Leishman stain. Pengaruh Mg2+ diteliti dengan memberikan larutan XBE5 yang mengandung 5 mM Mg2+ sebagai kontrol, XBE yang mengandung 0 mM Mg2+, dan 1 mM EDTA sebagai chelator kation. Kromosom pada masing-masing perlakuan diberikan penilaian berdasarkan Quality Assesment yang disusun oleh Association for Clinical Cytogenetics berdasarkan International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kromosom kontrol yang mengandung 5 mM Mg2+ memiliki struktur padat dengan pola banding yang jelas dan intensitas band tebal, sedangkan kromosom pada kelompok perlakuan XBE (0 mM Mg2+) dan 1 mM EDTA memiliki struktur tidak padat dan fibrous dengan pola banding kurang jelas dan intensitas band yang tipis. Nilai rata-rata±SD kromosom kelompok XBE (4,389±0,607) dan EDTA (4,611±0,607) lebih tinggi dibandingkan kontrol XBE5 (4,222±0,427). Hal ini menunjukkan bahwa Mg2+ memiliki pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia.

---

Magnesium ion (Mg2+ ) is one of the divalent cations that have an important role in chromosome condensation. Researches about the role of Mg2+ have been conducted on the chromosome from various type of cells, especially human cancer cell line. However, there has not been any research conducted using human normal cells such as blood cells lymphocyte chromosome. This study aims to evaluate the effects of Mg2+ on chromosome structure from lymphocyte using GTL-banding and karyotyping. Metaphase chromosomes were obtained by culturing blood cells, followed by banding using Leishman stain. Magnesium ion role was assessed by using XBE5 solution that contains 5 mM Mg2+ as control, XBE solution that contains 0 mM Mg2+, and 1 mM EDTA solution as a cation chelator. The chromosome value from each treatment was evaluated using Quality Assessment from Association for Clinical Cytogenetics according to the International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result shows that the control chromosome (XBE5) had a compact structure with a clear banding pattern and bold band intensity, while those treated with XBE and EDTA had a less compact and fibrous structure with an unclear banding pattern and thin band intensity. In addition, the average chromosome score±SD of the XBE (4.389±0.607) and EDTA-treated (4.611±0.607) chromosomes were higher than those of control (4.222±0.427). These data indicated that Mg2+ affects the structure of the human lymphocyte chromosome."

"Ion magnesium (Mg2+) merupakan salah satu faktor utama yang berperan dalam kondensasi kromatin menjadi kromosom. Berbagai penelitian mengenai pengaruh Mg2+ terhadap struktur kromosom sel HeLa telah dilakukan, namun hingga saat ini pengaruh Mg2+ terhadap pola banding yang menunjukkan bagian heterokromatin dan eukromatin belum diketahui. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh Mg2+ terhadap kondensasi kromosom sel HeLa menggunakan teknik G-Band-Trypsin-Leishman (GTL) banding karyotyping. Sediaan sebaran metafase kromosom diperoleh dari kultur sel HeLa, kemudian dilakukan banding menggunakan pewarna Leishman. Pengaruh Mg2+ dievaluasi dengan memberikan tiga larutan yang berbeda, yaitu larutan XBE5 yang mengandung 5 mM Mg2+ sebagai kontrol, larutan XBE (0 mM Mg2+), dan larutan 1 mM EDTA sebagai chelator kation. Data yang diperoleh dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan menganalisis nilai kromosom berdasarkan jumlah band yang dihasilkan sesuai dengan Quality Assessment (QA) dari International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada 5 mM Mg2+ struktur kromosom padat dengan nilai 2 hingga 3 dan memiliki pola banding yang jelas. Sementara itu, kromosom pada 0 mM Mg2+ memiliki area kromosom yang meluas dan struktur kromosom lebih fibrous dengan pola banding yang tipis. Kromosom pada 0 mM Mg2+ memiliki nilai panjang 2 hingga 4. Struktur kromosom pada 1 mM EDTA masih terlihat dengan struktur fibrous, namun dengan batas yang sulit ditentukan dan pola banding yang dihasilkan kabur. Nilai kromosom pada 1 mM EDTA berkisar antara 3 hingga 6. Hasil pengamatan struktur, pola banding, dan nilai kromosom yang diperoleh menunjukkan kromosom pada 0 mM Mg2+ dan 1 mM EDTA lebih panjang dari kromosom kontrol (5 mM Mg2+). Kromosom pada 5 mM Mg2+ lebih padat dengan band yang dihasilkan lebih jelas jika dibandingkan dengan kromosom yang diberikan perlakuan dengan 0 mM Mg2+ dan 1 mM EDTA. Hal ini menunjukkan bahwa magnesium diperlukan untuk menjaga kondensasi struktur kromosom sel HeLa.

---

Magnesium ion (Mg2+) is one of the major factors responsible for chromosome condensation. Studies about the effects of Mg2+ on chromosome structure of the HeLa cell have been reported, however, the effects of Mg2+ on the banding pattern showing the heterochromatin and euchromatin areas are yet to be investigated. This research was carried out to determine the effect of Mg2+ on chromosome condensation of the HeLa cells structure using karyotyping by G-Band-Trypsin-Leishman (GTL) banding technique. Chromosome were obtained from the cultured HeLa cell. The chromosomes banding was evaluated using Leishman dye. The effect of Mg2+ was evaluated by giving three different solutions, namely XBE5 solution containing 5 mM Mg2+ as a control, XBE solution (0 mM Mg2+), and 1 mM EDTA solution as cation chelator. The obtained data was analyzed qualitatively by observing the structure and banding pattern of the chromosomes, as well as quantitatively by analyzing the value of chromosomes based on the number of bands produced according to the Quality Assessment (QA) from International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The results showed that at 5 mM Mg2+, chromosome structure was more solid with a value of 2 to 3 and had a clear banding pattern. Meanwhile, the chromosomes treated with buffer containing 0 mM Mg2+ showed an expanded chromosome area and a more fibrous structure with a pale banding pattern, the chromosome at 0 mM Mg2+ showed a value of 2 to 4. Futhermore, the structure of chromosomes treated with EDTA was still visible with fibrous structure, but with boundaries that were difficult to determined and the blurred banding pattern. The value of the chromosome in 1 mM EDTA ranges from 3 to 6. Based on the observations of the structure, banding pattern, and the value obtained, the chromosomes at 0 mM Mg2+ and 1 mM EDTA were longer than those treated with 5 mM Mg2+. Chromosomes at 5 mM Mg2+ were more condensed with the clear bands compared to those treated with 0 mM Mg2+ and 1 mM EDTA. These results further emphasize that Mg2+ is required for chromosome condensation and maintenance of chromosome structure of the HeLa cell."

"Kromosom merupakan untai DNA yang mengalami penebalan akibat kondensasi. Kondensasi struktur kromosom sangat mempengaruhi segregasi kromosom saat fase mitotik. Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa kondensasi kromosom sel HeLa dipengaruhi oleh ion kalsium (Ca2+), namun pengaruh Ca2+ pada kromosom manusia normal belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia dengan pemberian 1 mM 1, 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, chelator Ca2+), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, chelator kation), dan PBS (kontrol) yang diamati menggunakan mikroskop cahaya. Sampel darah dikultur selama 72 jam, kemudian kromosom limfosit diisolasi dan diberi perlakuan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS. Kromosom diwarnai dengan Giemsa dan diamati dengan mikroskop cahaya. Hasil yang diperoleh menunjukkan struktur kromosom kontrol lebih pendek, padat, serta memiliki intensitas pewarna yang pekat dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA yang memiliki struktur yang lebih panjang, lebih berongga, serta intensitas pewarna yang kurang pekat. Hasil analisis kuantitatif menunjukkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom kontrol sebesar 1,73±0,73 μm, 0,55±0,43 μm, dan 3,5±2,17 μm2, sedangkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom yang diberi 1 mM BAPTA sebesar 2,91±1,3 μm, 1,43±0,43 μm, dan 4,17±2,75 μm2. Rata-rata panjang dan lebar kromosom yang diberi 1 mM EDTA sebesar 2,26±0,52 μm dan 0,93±0,29 μm. Hasil tersebut memperlihatkan bahwa Ca2+ berperan penting dalam kondensasi struktur kromosom limfosit.

---

The Chromosome is a DNA strand that undergoes thickening due to condensation. Condensation of chromosomal structure affects the segregation of chromosomes during the mitotic phase. Previous studies have reported that chromosomal condensation of HeLa cells is affected by calcium ions (Ca2+). Nevertheless, the effect of Ca2+ on human normal cells has yet to be investigated. This study aims to determine the effect of Ca2+ on the chromosomal structure of human lymphocyte by the treatments of 1 mM 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, a Ca2+ chelator), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, a cation chelator), and PBS (control), using a light microscope. The blood sample was cultured for 72 hours, followed by lymphocyte chromosomes isolation. After that, the samples were treated with PBS (control), 1 mM BAPTA, and 1 mM EDTA. Chromosomes were then stained with Giemsa and observed using a light microscope. The qualitative analysis showed that control chromosomes have shorter, and more condensed structures with a high dye intensity compared with those treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA which showed a longer and fibrous structure with low dye intensity. The quantitative analysis showed that the average length, width, and area of the control chromosome was 1.73±0.73 μm, 0.55±0.2 μm, and 3.5±2.17 μm2, respectively. while those treated with 1 mM BAPTA were 2.91±1.3 μm, 1.43±0.43 μm, and 4.17±2.75 μm2. Then, the average length and width of 1 mM EDTA chromosome was 2.26±0.52 μm and 0.93±0.29 μm. These results showed that Ca2+ plays an important role in the lymphocyte chromosome structure."

"Kromosom merupakan untai DNA yang mengalami penebalan akibat kondensasi. Kondensasi struktur kromosom sangat mempengaruhi segregasi kromosom saat fase mitotik. Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa kondensasi kromosom sel HeLa dipengaruhi oleh ion kalsium ( ), namun pengaruh Ca2+ pada kromosom manusia normal belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia dengan pemberian 1 mM 1, 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, chelator Ca2+), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, chelator kation), dan PBS (kontrol) yang diamati menggunakan mikroskop cahaya. Sampel darah dikultur selama 72 jam, kemudian kromosom limfosit diisolasi dan diberi perlakuan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS. Kromosom diwarnai dengan Giemsa dan diamati dengan mikroskop cahaya. Hasil yang diperoleh menunjukkan struktur kromosom kontrol lebih pendek, padat, serta memiliki intensitas pewarna yang pekat dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA yang memiliki struktur yang lebih panjang, lebih berongga, serta intensitas pewarna yang kurang pekat. Hasil analisis kuantitatif menunjukkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom kontrol sebesar 1,73±0,73 μm, 0,55±0,43 μm, dan 3,5±2,17 μm2, sedangkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom yang diberi 1 mM BAPTA sebesar 2,91±1,3 μm, 1,43±0,43 μm, dan 4,17±2,75 μm2. Rata-rata panjang dan lebar kromosom yang diberi 1 mM EDTA sebesar 2,26±0,52 μm dan 0,93±0,29 μm. Hasil tersebut memperlihatkan bahwa Ca2+ berperan penting dalam kondensasi struktur kromosom limfosit.

---

The Chromosome is a DNA strand that undergoes thickening due to condensation. Condensation of chromosomal structure affects the segregation of chromosomes during the mitotic phase. Previous studies have reported that chromosomal condensation of HeLa cells is affected by calcium ions (Ca2+). Nevertheless, the effect of Ca2+ on human normal cells has yet to be investigated. This study aims to determine the effect of Ca2+ on the chromosomal structure of human lymphocyte by the treatments of 1 mM 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, a Ca2+ chelator), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, a cation chelator), and PBS (control), using a light microscope. The blood sample was cultured for 72 hours, followed by lymphocyte chromosomes isolation. After that, the samples were treated with PBS (control), 1 mM BAPTA, and 1 mM EDTA. Chromosomes were then stained with Giemsa and observed using a light microscope. The qualitative analysis showed that control chromosomes have shorter, and more condensed structures with a high dye intensity compared with those treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA which showed a longer and fibrous structure with low dye intensity. The quantitative analysis showed that the average length, width, and area of the control chromosome was 1.73±0.73 μm, 0.55±0.2 μm, and 3.5±2.17 μm2, respectively. while those treated with 1 mM BAPTA were 2.91±1.3 μm, 1.43±0.43 μm, and 4.17±2.75 μm2. Then, the average length and width of 1 mM EDTA chromosome was 2.26±0.52 μm and 0.93±0.29 μm. These results showed that Ca2+ plays an important role in the lymphocyte chromosome structure."

"Pseudomonas aeruginosa is a Gram negative bacterium that can cause fatal infection in immunocompromised patient. This is an opportunist pathogen which is associated with some dental infections. Pseudomonas aeruginosa produces pyocyanin that functions as an important virulent factor in bacterial invasion. It can be identified in the lesion tissue and capable to induce cellular damage in endothelial cell, respiratory, neutrophil, and lymphocytes. B lymphocyte plays a significant role in the immune response of periapical infection; however, its cellular and molecular response to pyocyanin is unclear.

Objective: To investigate cellular responses of B lymphocyte to the exposure of pyocyanin and the role of caspase-3 in its molecular mechanism.

Methods: B lymphocytes (Raji cells) were cultured, and in five replications were exposed to various concentrations of pyocyanin for 24 h. MTT assay was performed to analyze the cytotoxicity effect of pyocyanin. Cell morphological analysis using phase contrast microscope were done in separate experiments. Immunocytochemical analysis was carried out for the identification of active caspase-3 protein expression, to study the mechanism involved in pyocyanin induced cellular damage.

Results: It showed that cell viability was decreased in pcyocyanin-treated groups. Pyocyanin induced cell death on B lymphocyte in a dose-dependent manner. Statistical analysis using ANOVA demonstrated significant difference between groups with p=0.000. Nuclear fragmentation was observed in pyocyanin-induced cell death; furthermore, caspase-3 was expressed clearly in cell cytoplasm after 24 h incubation.

Conclusion: Pyocyanin is capable of inducing cell death on B lymphocyte. Caspase-3 may play an important role in the molecular mechanism of pyocyanin-induced cell death."