Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Strip-tes immunokromatografi dikembangkan dengan menggabungkan metode ini dengan teknik elektrokimia untuk menghasilkan metode alternatif uji melamin secara cepat dan sederhana. Pada dasarnya strip tes immunokromatografi adalah aplikasi teknik immunoassay pada suatu kertas kromatografi untuk menghasilkan deteksi yang mudah, cepat dan selektif. Pada penelitian ini, kombinasi dengan metode elektrokimia dikembangkan untuk menghasilkan deteksi secara kuantitatif sesudah proses immunokromatografi. Mula-mula, antibodi poliklonal melamin (anti melamine) disintesis. Untuk menghasilkan antibodi, suatu antigen harus diimmunisasikan ke dalam kelinci, sehingga antibodi dihasilkan dalam darah. Melamin bukan antigen. Karena itu agar dapat bersifat seperti antigen, melamin harus dimodifikasi sebagai hapten yang kemudian dikonjugasikan dengan BSA. Hapten yang disintesis dari melamin dan anhidrida suksinat memiliki persen hasil 81% dengan titik leleh 362-3630C. Karakterisasi dengan spektroskopi UV-vis menghasilkan serapan maksimum pada 229 nm, sedangkan dengan spektroskopi IR menunjukkan pembentukan C=O ulur dari asam karboksilat pada 1708 cm-1 dan C = O ulur dari amida sekunder pada 1683-1666 cm-1 yang menunjukkan sintesis hapten telah berhasil.Hasil spektrometri massa menunjukkan kemunculan puncak pada m/z 227 yang menunjukkan hapten terprotonasi. Kemudian, hapten dikonjugasikan dengan BSA dan diimunisasikan ke kelinci untuk memproduksi antibodi poliklonal melamin. Antibodi yang diperoleh dikonjugasi dengan horseradish peroxidase (HRP) menghasilkan HRP-anti melamin. Konfirmasi anti melamin yang dihasilkan dilakukan dengan uji ELISA. HRP-anti melamin yang dihasilkan digunakan untuk strip-test. Strip-test dibuat dari membran nitroselulosa (NC) dan terdiri dari 4 komponen, yaitu tempat sampel, tempat konjugasi, daerah pengujian, dan lapisan penyerap. Antibodi melamin dibubuhkan pada tempat konjugasi dan daerah pengujian. Ketika sampel diteteskan di tempat sampel, sampel akan bergerak sepanjang membran NC, melalui tempat konjugat, menuju daerah pengujian. Di tempat konjugat, melamin akan bereaksi secera selektif dengan anti melamin, dan di daerah pengujian akan terbentuk kompleks HRP-anti melamin-melamin-anti melamin. Karena itu jika suatu perangkat elektrokimia ditempatkan di bawah daerah pengujian, HRP yang terkonjugasi pada anti melamin dapat diukur. Dengan asumsi jumlah HRP ekivalen dengan anti melamin dan juga melamin, konsentrasi melamin dapat diukur.Perangkat elektrokimia dibuat dari elektroda intan terdoping boron yang dimodifikasi dengan platinum dan polipirol (Pt-BDD) sebagai elektroda kerja, sistem Ag/AgCl sebagai elektroda pembanding, dan kawat platina sebagai elektroda penunjang. Untuk menyiapkan Pt-BDD, elektroda intan terdoping boron (BDD) 1% dengan terminasi O diberi perlakuan voltammetri siklik (CV) sebanyak 80 siklik dalam larutan heksa kloro platinat (IV) (H2PtCl6) dalam larutan HCl. Strip-tes membutuhkan waktu ~7 menit sejak sampel diteteskan hingga daerah pengujian. Pengukuran elektrokimia dengan teknik CV dilakukan setelah melarutkan daerah pengujian dengan 150 L larutan 1 mM H2O2 dalam 50 mM larutan fosfat buffer. Rentang potensial yang digunakan -0,5 V - 1,0 V. Linieritas dalam rentang konsentrasi 5-125 mg/L dapat dicapai dengan limit deteksi 0.694 mg/L melamin, mengindikasikan bahwa metoda ini cukup menjanjikan sebagai pendeteksi melamin.

---

Immunochromatographic strip-test was developed to combine with an electrochemical technique for an alternative method for a simple and rapid detection of melamine. An immunochromatographic strip-test is basically applies an immunoassay technique using a chromatography paper to provide a simple, fast, and selective detection. In this work, combination with an electrochemical method was developed to provide a quantitatve detection after immonochromatographic assay. Initially, a polyclonal antibody against melamine (anti melamine) was produced. In order to produce the antibody, antigen has to be immunized into a living body, such as rabbit. Therefore, antibody was produced in the rabit's blood. Since melamine is not an antigen, melamine, to act as an antigen, has to be modified as a hapten which conjugated to BSA,. The hapten was synthesized from melamine and succinic anhydride. The product yield was 81 % with melting point of 362 - 363 0C. Characterization using a UV-vis spectroscopy showed a maximum absorbance at 229 nm, while IR spectroscopy showed the formation of C=O stretching from carboxylic acid at 1708 cm-1 and C=O stretching from secondary amide at 1683 - 1666 cm-1, indicating to the successful of the synthesis.The mass spectrometry showed a peak appeared at m/z 227 suggesting the protonated hapten. Then, hapten was conjugated to BSA and immunized to rabbit, to produce a polyclonal antibody against melamine. The obtained antibody was then conjugated to horseradish peroxidase (HRP) to form HRP-anti melamine. Anti-melamine result was confirmed by using ELISA test. The HRP-anti melamine was then used for the developed strip-test. The striptest was fabricated using nitrocellulose (NC) membrane and consisted of 4 components, including a sample pad, a conjugate pad, a test zone, and an absorbent pad. The melamine antibody was placed at the conjugate pad and test zone. When sample was dropped at the sample pad, the sample moves through the NC to the conjugate pad, respectively, towards the test zone. At the conjugate pad melamine sample selectively reacts to HRP-anti melamine, while at the test zone sandwich of HRP-anti melamine-melamine-anti melamine will formed. Therefore, by placing an electrocemical device under the test zone, HRP, which indirectly conjugated at the melamine can be measured. Assummed that the concentration of HRP was equivalent to antibody as well as melamine, melamine concentration can be determined.The electrochemical device was fabricated using an overoxidized polypyrrole (OPPy)-platinum modified at boron-doped diamond electrode (Pt-BDD) as the working electrode, an Ag/AgCl system as the reference electrode, and a platinum wire as the counter electrode. To prepare Pt-BDD, an optimum condition of 1 % boron-doped diamond (BDD) with O termination was used with 80 cycles of cyclic voltammetry (CV) in a solution of platinum acid (H2PtCl6) in HCl. The immunochromatographic strip-test requires ~7 min from sample dropped to achieve the test zone. The electrochemical measurement was then performed using CV technique by dissolving the test zone using 150 μL of 1 mM H2O2 in 50 mM phosphate buffer solution. The potential range of -0.5 V to 1.0 V was applied. Linear concentration range of 5-125 mg/L could be achieved with a limit of detection of 0.694 mg/L melamine, indicating the method was promising for melamine detection."

"Sintesis nanopartikel Ni OH 2 Ni OH 2NP telah berhasil dilakukan menggunakan metode pengendapan kompleks dengan keadaan hidrotermal. Ni OH 2NP dikarakterisasi menggunakan Spektrofotometer UV-Visible, Fourier Transform InfraRed FTIR , X-Ray Diffraction XRD , dan Transmission Electron Microscopy TEM . Metode Anodic Stripping Voltammetry ASV menggunakan elektroda Boron-doped Diamond BDD digunakan untuk penentuan konsentrasi Ni OH 2NP secara elektrokimia. Kondisi optimum yang diperoleh dari hasil penelitian ini adalah potensial deposisi -600 mV, waktu deposisi 90 sekon, scanrate 100 mV/s pada larutan HClO4 pH 1. Kurva kalibrasi menunjukkan bahwa ASV Na OH 2NP linier pada rentang konsenstrasi 5-25 ?M dengan limit deteksi LOD 0,481 ?M. Ni OH 2NP kemudian dikonjugasikan dengan antibodi melamin yang telah dipurifikasi Ni OH 2NP-Ab dan dikarakterisasi dengan spektrofotometer UV-Visible, FTIR, zeta potensial, dan TEM. Ni OH 2NP-Ab kemudian digunakan sebagai pengenal dalam strip test immunokromatografi untuk mendeteksi melamin dengan asumsi konsentrasi melamin berbanding lurus dengan Ni OH 2NP-Ab. Pengujian strip test immunokromatografi sebagai perangkat sensor untuk deteksi melamin secara kuantitatif dilakukan dengan metode ASV menggunakan elektroda BDD dengan kondisi seperti pada pengujian Ni OH 2NP. Strip test yang difabrikasi berhasil mendeteksi melamin secara linier R2 = 0,9605 pada rentang konsentrasi 25 ndash; 250 ppm dengan LOD 53,90 ppm.

---

The synthesis of Ni OH 2 nanoparticles Ni OH 2NPs has been successfully performed using hydrothermal complexation precipitation method. Ni OH 2NPs were characterized by UV Visible Spectrophotometer, Fourier Transform InfraRed FTIR , X Ray Diffraction XRD , and Transmission Electron Microscopy TEM . Anodic Stripping Voltammetry ASV method at Boron doped Diamond BDD electrode was employed to determine the concentration of Ni OH 2NPs electrochemically. The optimum electrochemical conditions were obtained at the deposition potential of 600 mV, the deposition time of 90 seconds with a scanrate of 100 mV s in HClO4 pH 1 solution. Linear calibration curve showed that the ASV of Ni OH 2NP was linear in the concentration range of 5 25 M with limit of detection LOD of 0.481 M. The Ni OH 2NPs was then conjugated with purified melamine antibodies Ni OH 2NPs Ab and characterized by UV Visible spectrophotometers, FTIR, zeta potential, and TEM. The Ni OH 2NPs Ab was employed as the sensing in immunochromatographic strip test for the detection of melamine with assumption that the melamine concentration will be proportional with Ni OH 2NPs. The quantitative determination was determined by using the ASV method with BDD, which was previously optimized. The strip test can succesfully detect melamine linearly R2 0.9605 in the concentration range of 25 ndash 250 ppm with LOD of 53.90 ppm."

"Pada penelitian ini dilakukan uji optimasi dan aplikasi pada pengembangan strip test immunokromatografi untuk deteksi selektif melamin. Strip test dibuat pada permukaan membran nitroselulosa menggunakan koloid Au-np yang terkonjugasi dengan antibodi melamin (Ab) sebagai label, sehingga Ab dapat secara selektif membentuk kompleks melamin-Ab-Aunp. Pengukuran konsentrasi Aunp diasumsikan berbanding lurus dengan konsentrasi Ab sehingga akan menghasilkan kuantitas melamin. Metode elektrokimia anodic stripping voltammetry digunakan untuk mengukur kuantitas Au-np dengan boron doped diamond (BDD) dan glassy carbon (GC) sebagai elektroda kerja, platina spiral sebagai elektroda pendukung, dan Ag/AgCl sebagai elektroda pembanding. Keadaan optimum diperoleh pada penggunaan elektroda BDD dengan ukuran Au-np optimum adalah sebesar 12,26 nm, optimasi konsentrasi BSA dan Ab berturut-turut 10% dan 5%. Optimasi volume reagen melamin yang digunakan dalam strip test adalah 50 μL, Aunp-Ab 30 μL, Ab 5% 60 μL, dan HClO4 225 μL. Strip test ini memiliki panjang sebesar 27,5 mm dengan ukuran optimum dari strip test ini adalah sample pad 5 mm x 5 mm, conjugate pad 5 mm x 5 mm, nitrocellulose membrane 1 cm x 5 mm, test zone 5 mm x 5 mm, absorbent pad 7,5 mm x 5 mm. Waktu immunoreaksi yang dibutuhkan adalah 10 menit dengan waktu oksidasi Au-np sebesar 3 menit. Limit deteksi (LOD) dari pengukuran melamin standar adalah 5 μg/ mL PBS dengan reprodusibilitas arus yang baik (RSD 6,723% untuk 10 kali pengukuran). Uji interference dengan menggunakan urea dan asam sianurat menghasilkan sinyal negatif dan uji sampel susu mengandung melamin 5 μg/mL memberikan sinyal dengan besar kesalahan relatif sebesar 8%.

---

In this research, optimization and applications was done on the development of immunochromatographic strip test for selective detection of melamine. Strip test was made on the surface of nitrocellulose membrane using colloidal gold nanoparticles (GNPs) which was conjugated with melamine antibody (Ab) as a label that can be selectively form complexes melamine-Ab-Aunp. The GNPs concentration are assumed directly proportional to the concentration of Ab therefore it will produce the quantity of melamine. Electrochemical anodic stripping voltammetry method was used to measure the quantity GNPs with boron doped diamond (BDD) and glassy carbon (GC) as the working electrodes, a platinum spiral as the counter electrode, and Ag/AgCl as the reference electrode. The BDD electrode was found to be the optimum working electrode and the optimum size of GNPs was 12.26 nm. The concentration 10 % of BSA and 5 % of Ab were the best concentration. Optimization of the volume of reagents used in the strip test are 50 μL of melamine, 30 μL of GNPs-Ab, 60 μL of Ab with 5% concentration, and 225 μL of HClO4. Strip test which consisted of sample pad, conjugate pad, nitrocellulose membrane, test zone, and absorbent pad created total length about 27.5 mm and 5 mm with the optimum dimensions are 5 mm x 5 mm of a sample pad, 5 mm x 5 mm of a conjugate pad, 1 cm x 5 mm of nitrocellulose membrane, 5 mm x 5 mm of a test zone, 7.5 mm x 5 mm of an absorbent pad. Immunoreaction time required was 10 minutes and oxidation time of GNPs was 3 minutes. Limit of detection (LoD) of melamine measurement standard was 5 μg/mL PBS with current good reproducibility (RSD 6.723% for 10 times measurement). Interference test using urea and cyanuric acid generated negative signal with relative error of 8%."

"Strip test immunokromatografi telah dikembangkan untuk deteksi kuantitatif kandungan melamin dalam sampel susu dan produk susu. Strip test ini dibuat berdasarkan reaksi kompleks antigen-antibodi (melamin-anti melamin). Nanopartikel emas (AuNP) digunakan sebagai label terhadap antibodi membentuk kompleks nanopartikel emas-antibodi (AuNP-Ab). Studi kuantifikasinya dilakukan dengan mengukur nanopartikel emas secara elektrokimia menggunakan metode anodic stripping voltammetry (ASV). Perangkat elektroda pada strip test difabrikasi dengan menggunakan boron-doped diamond (BDD) sebagai elektroda kerja, Ag/AgCl sebagai elektroda standar, dan platina (Pt) sebagai elektroda penunjang. Limit deteksi (LOD) untuk AuNP sebesar 24.3 μM dapat dicapai menggunakan perangkat ini. Komponen strip test immunokromatografi dilakukan dengan kondisi volume sampel melamin 100μL, nanopartikel emas-antibodi (AuNP-Ab) 60 μL, antibodi penangkap 10 μL, waktu immunoreaksi 7 menit, volume pelarut HClO4 0.02 M sebesar 200 μL, dan dengan kondisi elektrokimia pada rentang potensial dari -0.5 V sampai 1.5 V, scan rate 100 mV/s, serta waktu deposisi 240 sekon. Limit deteksi (LOD) strip test immunokromatografi yang dapat dicapai adalah 0.15 mg melamin/mL PBS (phosphate buffer solution) (150 ppm). Hasil ini menunjukkan bahwa strip test immunokromatografi tersebut dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan melamin secara kuantitatif.

---

Immunochromatographic strip test was developed for quantitative detection of melamine in sample milk and milk products. The strip test was developed based on antigen-antibody (melamine-anti melamine) complex reaction. Gold nanoparticle (AuNP) was used as a label to antibody to form antibody-labeled gold nanoparticle (AuNP-Ab). The quantification study was studied by electrochemical measurement of gold nanoparticle using anodic stripping votlammetry (ASV) method. Electrode device for the strip test was fabricated using boron-doped diamond (BDD) as the working electrode, Ag/AgCl as the reference electrode, and platinum (Pt) as the counter electrode. Limit of detection(LOD) of AuNP detectable in the strip test electrode device was 24.3 μM. Immunochromatographic strip test using sample volume of 100μL, AuNP- Ab of 60 μL, capturing antibody of 10 μL, immunoreactions time of 7 min, volume HClO4 0.02M of 200 μL performed by electrochemical condition of scan rate of 100 mV/s and deposition time of 240 s, showing an LOD of 0.15 mg melamine/mL PBS (phosphate buffer solution) (150 ppm). The results indicated that the strip test immunochromatographic could be used to quantitative detection of melamine."

"ABSTRACTKandungan logam berat seperti nikel, vanadium, dan besi pada crude oil dapat meracuni katalis dalam proses residue catalytic cracking. Persebaran kandungan logam dalam crude oil diketahui dengan mengelompokan fraksi maltenes dan asphaltenes dengan cara ekstraksi didapatkan bobot fraksi maltenes dan asphaltenes sebesar 61,16 dan 1,004 . Pemisahan fraksi maltenes dilakukan dengan menggunakan metode kormatografi kolom dengan menggunakan eluen n-heptan:etil asetat 8,5:1,5 dan metode ekstraksi menggunakan metanol. Sementara itu, pemisahan asphaltenes dilakukan dengan menggunakan metode soxhlet dan sonikasi dengan menggunakan silika gel sebagai campuran asphaltenes dan menggunakan metanol sebagai pelarut. Hasil pemisahan pada fraksi maltenes dan asphaltenes dianalisa menggunakan FTIR menunjukkan adanya cincin pirol pada bilangan gelombang 800 cm-1 yang merupakan kerangka pembentukan porfirin. Sementara itu hasil spektrofotometer UV-Vis menunjukan terdapat porfirin bebas dan porfirin yang terikat dengan logam pada fraksi maltenes dan profirin bebas pada fraksi asphaltenes pada panjang gelombang 390-425 nm untuk porfirin bebas dan 480-700 nm untuk porfrin yang terikat pada logam. Uji kualitatif unsur dilakukan dengan menggunakan EDX ditemukan logam C, Si, S, V, Fe, Ni dan Al pada fraksi maltenes, asphaltenes dan hasil pemisahan kedua fraksi. Hasil analisa LC-MS pada hasil pemisahan maltenes dengan kolom kromatografi menunjukkan adanya senyawa C39H36N4V1O1S dan hasil pemisahan asphaltenes terdapat senyawa meso-tetra 4-carboxyphenyl porphyrin.Kata Kunci : metalporfirin, maltenes, asphaltenes, kromatografi, ekstraksi.

---

ABSTRACTThe most abundant and undesireable presence in heavy oil is nickel, iron and vanadium. abundant and undesireable presence in the heavy oil is nickel and vanadium. The existence of these metals can poison the catalyst in catalytic cracking process. Distribution of metal content in crude oil is known by classifying phase asphaltene and maltene using extraction, fraction asphaltenes and maltenes on petroleum was found 61,16 dan 1,004 . The separation of the maltenes fraction is performed using the method of chromatography column by using eluen n heptan ethyl acetate 8,5 1.5 and the method of extraction using methanol. Meanwhile, the separation of asphaltenes is done using soxhlet method and sonikasi using silica gel as a mixture of asphaltenes and uses methanol as the solvent. The results of the maltenes fraction separation and asphaltenes were analyzed using FTIR pyrrol rings showed a wavenumber 800 cm 1, which is the framework for the formation of porphyrins. Meanwhile the results of UV Vis spectrophotometry showed there is a porphyrin and metal porphyrin bound on the fraction of maltenes and asphaltenes in the free fraction of profirin at a wavelength of 390 425 nm free porphyrin and 480 700 nm for porphyrin that are bound to the metal. The qualitative element of the test is carried out using EDX found metal C, Si, S, V, Fe, Ni and Al on the fraction of maltenes and asphaltenes. LC MS analysis of the results on the results by column chromatography separation of the maltenes showed a C39H36N4VOS compounds and separation results of asphaltenes contained compound meso tetra 4 carboxyphenyl porphyrin. Keyword metal porphyrin, maltenes, asphaltenes, chromatography, extraction."

"Pada penelitian ini dilakukan pengembangan strip test immunokromatografi untuk deteksi selektif melamin menggunakan platform magnetic. Strip test dibuat menggunakan membran nitroselulosa dan tersusun dari sample pad, conjugate pad, test zone, dan absorbent pad. Conjugate pad mengandung antibodi melamin berlabel nanopartikel emas (AuNP-Ab), test zone mengandung antibodi penangkap dan digunakan sebagai tempat pengukuran, sedangkan digunakan absorbent pad untuk mengarahkan aliran sampel. Untuk menahan sampel agar tidak bergerak selama pengukuran di test zone, antibodi pada test zone dimodifikasi dengan magnetic beads (MB). MB yang digunakan adalah MB yang mengandung gugus fungsi avidin. Sehingga dengan memodifikasi antibodi dengan biotin membentuk Ab-biotin, Ab-MB dapat terbentuk melalui interaksi avidin-biotin. Bila sampel melamin mencapai conjugate pad, melamin akan berinteraksi dengan AuNP-Ab membentuk kompleks mel-Ab-AuNP yang akan bergerak ke test zone dan membentuk kompleks MB-Ab-mel-Ab-AuNP. Pengukuran dilakukan dengan meletakkan batang magnet di bawah test zone sehingga komples tersebut tidak bergerak selama pengukuran. Dengan asumsi bahwa konsentrasi AuNP berbanding lurus dengan konsentrasi antibodi dan dengan demikian dengan konsentrasi melamin, pengukuran dapat dilakukan dengan metode anodic stripping voltammetry. Boron doped diamond (BDD) 0.1% digunakan sebagai elektroda kerja, kawat platina spiral sebagai elektroda pendukung, dan Ag/AgCl sebagai elektroda pembanding. Strip test dipreparasi menggunakan volume AuNP-Ab 60 μL dan Ab-MB 30 μL. Deteksi melamin pada strip test immunokromatografi dilakukan dengan volume sampel 100 μL, waktu immunoreaksi 7 menit, dan volume pelarut HClO4 0.02 M 200 μL. Kondisi elektrokimia yang digunakan adalah rentang potensial dari -500 mV sampai 1500 mV, scan rate 100 mV/s, potensial deposisi -500 mV, serta waktu deposisi 240 sekon. Limit deteksi melamin yang diperoleh adalah 150 ppm (0.15 mg melamin/mL PBS).

---

In this research, immunochromatographic strip test for selective detection of melamine was developed by using platform magnetic. The strip test was made from nitrocellulose membrane and composed of sample pad, conjugate pad, test zone, and absorbent pad. The conjugate pad consisted of gold nanoparticle labeled melamine antibody (AuNP-Ab), while the test zone consisted of the capture antibody and used for the measurements. In addition, there was an absorbent pad used to direct the sample flow. In order to keep the sample in the test zone, the capture antibody was immobilized at the magnetic beads (MB). The MB contained avidin functional groups. Therefore, the antibody was modified by biotin (Ab-biotin) to form antibody modified MB (Ab-MB) through avidin-biotin interaction. When the sample contained melamine reach the conjugate pad, melamine interacts to antibody to form mel-ab-AuNP complexes, which then move to the test zone and form MB-Ab-mel-Ab-AuNP complexes. The measurements were performed by placed a magnetic bar under the test zone to avoid the movements of the complexes. As per assumption that the AuNP concentration is equivalent to the antibody as well as the melamine concentrations, the measurement can be performed by Anodic Stripping Voltammetry method. Boron doped diamond (BDD) 0.1% was applied as the working electrode, while a wire platinum spiral and an Ag/AgCl system were used as the counter and the reference electrodes, respectively. The strip test were prepared by using AuNP-Ab and Ab-MB volumes of 60 μL and 30 μL, respectively. The melamine detection was performed with a sample volume of 100 μL, an immunoreaction time of 7 min, and 200 μL of 0.02 M HClO4, while the electrochemical measurements was performed in a potential range from -500 mV to1500 mV, a scan rate of 100 mV/s, a potential deposition of -500 mV and a deposition time of 240 s. Limit of detection of 150 ppm (0.15 mg melamine/mL PBS) can be achieved."

"3,4-Metilendioksimetamfetamin MDMA atau di Indonesia dikenal dengan ekstasi merupakan recreational drugs golongan stimulant dan halusinasi dari golongan amfetamin yang masih banyak disalahgunakan hingga saat ini. Untuk membuktikan seseorang menyalahgunakan MDMA maka diperlukan uji MDMA dalam tubuh. Selama ini kadar MDMA di dalam tubuh biasanya ditentukan di dalam darah dan urin. Dried Blood Spot sebagai metode yang lebih sederhana dan tidak invasif bila dibandingkan dengan pengambilan darah langsung dari vena yang lebih invasif atau dari urin yang masih diragukan kebenaran pengambilan sampel dikarenakan masalah privasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan metode analisis MDMA dalam sampel DBS mulai dari kondisi kromatografi gas spektrometri massa yang optimum, metode preparasi sampel DBS yang optimum, hingga validasi metode analisis. Kondisi kromatografi optimum adalah kolom kapiler HP-5 MS dengan panjang 30 m, diameter dalam 0,25 mm; fase gerak gas Helium 99,999 ; laju alir 1,2 mL/menit; deteksi MS pada nilai m/z 58,00 dan 135,00 dan efedrin HCl sebagai baku dalam. Preparasi sampel menggunakan metode mikroekstraksi cair-cair dengan pelarut methanol lalu reesidunya dikeringkan dan direkonstitusi dengan etil asetat sebanyak 40 ? L. hasil validasi terhadap metode analisis MDMA yang dilakukan memenuhi persyaratan validasi berdasarkan EMEA Bioanalytical Guideline tahun 2011. Metode yang diperoleh linear pada rentang konsentrasi 25,0-500,0 ng/mL dengan r> 0,9999.

---

3,4 Metilendioxymethamphetamine or in Indonesia known as ecstasy is one of recreational drugs that causing stimulant and hallucinogen of the amphetamine group which is still widely abused. To prove a person abusing MDMA then MDMA test is required in the body. MDMA concentration in the body are usually determined in the blood and urine. Dried Blood Spot as a simple and non invasive method compared to blood taking directly from the vene that usually is invasive and urine that can be still doubtful because privacy issue. This study aims to develop analytical methods for MDMA in DBS sample from the conditions of gas chromatography mass spectrometry optimum, optimum DBS preparation methods, to the validation of analytical methods. The optimum chromatography conditions were HP MS 5 capilarry columns with a length of 30 m 0.25 mm inner diameter mobile phase Helium gas 99.999 flow rate 1.2 mL min detection of MS at m z values of 58.00 and 91.00 and ephedrine HCl as an internal standard. Sample preparation using liquid liquid microextraction with methanol solvent and the residue is dried and reconstituted with about 40 L of ethil acetate. The results of the validation of analytical methods for MDMA that satisfies the validation by the EMEA Guideline 2011. Bioanalytical Methods obtained linear in the concentration range from 25.0 to 500.0 ng mL with r 0.9999."

"ABSTRAKTanaman puding (Polyscias guilfoylei) merupakan tanaman perdu yang termasuk suku Araliaceae, yang digolongkan sebagai salah satu suku yang kaya akan saponin. Tanaman ini secara tradisional digunakan untuk mengobati flu dan borok di kepala.Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menentukan struktur senyawa kimia serta uji pendahuluan aktivitas antimikroba dalam fraksi metanol yang berasal dari daun puding.Isolasi senyawa dilakukan dengan menggunakan tehnik kromatografi (kromatografl kolom dan HPLC) dan penentuan struktur molekulnya dilakukan dengan menggunakan data spektroskopi (JR, MS, 1H-NMR, 13C-NMR). Pada uji antimikroba digunakan metode difusi cakram dengan mengamati zona hambatan yang terbentuk.Tiga senyawa kimia yang berhasil diisolasi diduga adalah asam 3-0-[ß-D-glukopi-ranosil(1-->2)ß-D-gtukuronopiranosil] oleanolat (A), asam 3-0-[J3-1)-glukopiranosil (1>2)[ß-D-glukuronopiranosil] 7-okso-oleanolat {B) dan asam 3-0-[ß-D-giukopiranosil(1-->4)ß-D-glukopiranosil(1-->2)ß-D-glukuronopiranosil] oleanolat (C). Hasil uji antirnikroba menunjukkan bahwa ketiga senyawa yang dihasilkan mempunyai daya hambat terhadap jamur Microsparum canis, tetapi tidak terhadap bakteri Stapylacaccus aureus dan Pseudomanas aeruginosa.

---

ABSTRACT

Polyscias guilfoylei is one of shrubs belongs to Araliaceae containing a rich of saponin substances. This plant is traditionally used for cold medicine and head ulcer.

This study was intended to isolate and determine the chemical structures and a preliminary investigation of antimicroba activity in methanol fractions from the leaves of Polyscias guilfoylei (called Puling in bahasa Indonesia).

Isolation of pure compounds have been carried out, using combine technique of chromatography (column chromatography and IIPLC) and structure of isolated compounds were established by spectroscophic data (IR, MS, 1H-NMR, 13C-NMR). Antimicrobial assay used the diffusion method by observing the inhibitation zone that was created.

Three isolated constituents were probably3-0-[ß-D -glucopyranosyl (1-->2)ß-D -glucoronopyranosyl] oleanolic acid (A), 3-0-[ß-D -glucopyranosyl (1>2)[ß-D- glucoronopyranosyl] 7-oxo-oleanolic acid (B) and 3-0-[ß-D-glucopyranosyl (1-->4)ß-D-glucopyranosyl (1-->2)ß-D-glucopyranosyl]oleanolic acid (C). Antimicrobial assay showed that three isolated compounds showed significant activities tocrosporum cams but these compounds were not. active to Stapylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa."

"6-Merkaptopurin merupakan obat antineoplastik golongan antimetabolit yang digunakan dalam terapi pengobatan leukemia limfositik akut. 6-Merkaptopurin memiliki indeks terapi sempit sehingga diperlukan pemantauan terapi obat. Pemantauan terapi obat tersebut memerlukan metode analisis yang sensitif, selektif, dan valid untuk menganisis kadar analit dan metabolit dalam plasma manusia. Penelitian ini dilakukan untuk mengoptimasi kondisi analisis dan melakukan validasi metode analisis 6-merkaptopurin dan 6-metilmerkaptopurin dalam plasma. Kondisi optimum kromatografi adalah menggunakan kolom C18 SunfireTM (5μm, 250 x 4,6 mm); suhu 30°C; fase gerak air-metanol-asetonitril pada kondisi elusi gradien; laju alir 1,00 mL/menit; dan dideteksi dengan detektor photodiode array pada panjang gelombang 303 nm. Sebagai baku dalam digunakan 5-fluorourasil. Ekstraksi plasma dilakukan dengan metode ekstraksi cair-cair menggunakan diklormetan sebagai pengekstrak. Hasil validasi metode analisis yang diperoleh valid dan linear pada rentang konsentrasi merkaptopurin 2,0 - 200,0 ng/mL dengan nilai r > 0,9991 dan rentang konsentrasi 6-metilmerkaptopurin 20 - 2000 ng/mL dengan nilai r > 0,9993. Akurasi dan presisi intra-hari dan antar-hari memenuhi persyaratan yaitu nilai koefisien variasi ≤ 20% (LLOQ) dan ≤ 15% (sampel QC). Pada uji stabilitas, 6-merkaptopurin dan 6-metilmerkaptopurin stabil dalam plasma suhu -20°C selama 21 hari. Metode analisis yang diperoleh memenuhi persyaratan EMEA bioanalytical guideline.

---

6-Mercaptopurin is antineoplastics drug that included in antimetabolite group used in acute lymphocytics leukemia medication. 6-Merkaptopurin has narrow therapeutic index, so it requires therapeutic drug monitoring. Therapeutic drug monitoring requires sensitive, selective, and valid method to anlyze the level of anlyte and it's metabolite in human plasma. This study aimed to optimize the analytical conditions and do validation for analysis of 6-mercaptopurine and it's one of metabolites (6-methylmercaptopurine) in plasma. Optimal chromatographic condition for analysis was performed using C18 SunfireTM column (5μm, 250 x 4.6 mm); temperature 30°C; the mobile phase contains water-methanol-acetonitril bellow gradient elusion condition; and detected at PDA wavelength of 303 nm. 5-Fluorouracil was used as internal standard. Plasma extraction was done by liquid-liquid extraction method using dichlormethane. The method was valid and linear at concentration range of 2.0 - 200.0 ng/mL with r > 0.9991 for 6-mercaptopurine and 20 - 2000 ng/mL with r > 0.9993 for 6-methylmercaptopurine. Accuracy and precision within-run and between-run fulfill the acceptance criteria, coefficient of variation ≤ 20% (LLOQ) and ≤ 15% (QC samples). 6-Mercaptopurine and 6-methylmercaptopurine was stable in plasma at least for 21 days when stored at -20ºC. This method fulfill the acceptance criteria based on EMEA bioanalytical guideline."