Pemanfaatan Palm Oil Mill Effluent (POME) sebagai bahan baku biodiesel merupakan upaya potensial untuk mengurangi limbah industri kelapa sawit sekaligus menghasilkan energi terbarukan. Penelitian ini bertujuan mengembangkan metode produksi biodiesel dari POME menggunakan ekstrak enzim lipase kasar yang dihasilkan oleh fungi lokal. Dari 50 isolat fungi diseleksi dari koleksi InaCC BRIN menggunakan media padat yang mengandung minyak zaitun. Aktivitas lipase dianalisis melalui uji zona degradasi rhodamine-b, dan sebanyak 21 isolat yang memiliki diameter zona degradasi >1,5 cm. Enzim lipase kasar komersial terbaik yang berhasil menghasilkan kandungan FAME sampai 96%. ekstrak enzim lipase kasar yang dihasilkan diaplikasikan dalam reaksi esterifikasi enzimatik terhadap asam lemak dalam POME untuk menghasilkan Fatty Acid Methyl Ester (FAME), yang dikarakterisasi menggunakan GC-MS. Isolat F242 (Trichoderma harzianum) menunjukkan performa terbaik sebagai biokatalis pada biodiesel yang dihasilkan memiliki kandungan FAME sebesar 6,28%, melebihi kandungan FAME yang dihasilkan dari hasil biodiesel dengan katalis enzim hasil isolat F021 yang memiliki aktivitas spesifik tertinggi. Isolat F242 yang ditumbuhkan pada media dengan sumber karbon POME menghasilkan enzim dengan aktivitas lebih rendah dibandingkan ketika isolat yang sama ditumbuhkan pada media bersumber karbon olive oil. Enzim dengan inducer olive oil menghasilkan FAME 21,71% (komposisi 40%), lebih tinggi dari inducer POME yang menghasilkan 18,82% (komposisi 20%).

---

The use of Palm Oil Mill Effluent (POME) as a raw material for biodiesel is a potential effort to reduce palm oil industry waste while producing renewable energy. This study aims to develop a biodiesel production method from POME using crude lipase enzyme extracts produced by local fungi. Out of 50 fungal isolates selected from the InaCC BRIN collection using solid media containing olive oil, lipase activity was analysed through the rhodamine-B degradation zone test, with 21 isolates exhibiting a degradation zone diameter >1.5 cm. The best commercial crude lipase enzyme successfully produced FAME content up to 96%. The crude lipase enzyme extract was applied in enzymatic esterification reactions on fatty acids in POME to produce Fatty Acid Methyl Ester (FAME), characterised using GC-MS. Isolate F242 (Trichoderma harzianum) showed the best performance as a biocatalyst, with the biodiesel produced containing 6.28% FAME, exceeding the FAME content produced from biodiesel using the enzyme catalyst from isolate F021, which had the highest specific activity. Isolate F242 grown on media with POME as the carbon source produced enzymes with lower activity compared to when the same isolate was grown on media with olive oil as the carbon source. Enzymes with olive oil as the inducer produced 21.71% FAME (40% composition), higher than those with POME as the inducer, which produced 18.82% (20% composition).