Perilaku Hidup Bersih dan Sehat PHBS pada pondok pesantren masih perlu ditingkatkan untuk mencegah terjadinya penyakit. Salah satu upaya untuk meningkatkan PHBS adalah mengimplementasikan Pos Kesehatan Pesantren Poskestren . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbandingan praktik perilaku hidup bersih dan sehat santri pondok pesantren Pos Kesehatan Pesantren Poskestren dan Non Poskestren. Desain penelitian menggunakan desain deskriptif komparatif dengan teknik stratified random sampling dengan jumlah sampel sebesar 138 orang. Hasil penelitian menggambarkan tidak ada perbedaan pengetahuan PHBS p=0,137; ?=0,05 , tetapi ada perbedaan sikap p=0,007; ?=0,05 dan praktik PHBS p=0,000; ?=0,05 santri di pondok pesantren Poskestren dan Non Poskestren. Hasil penelitian diharapkan menjadi dasar bagi pondok pesantren untuk meningkatkan kinerja Poskestren bekerja sama dengan Puskesmas untuk melakukan promosi kesehatan.